Mezclas Absorbancia => Ley de Beer – Lambert Pero es para todo el espectro, o sea A depende de es decir que Para dos sustancias I y II, sus espectros son A I ( ) y A II ( ). Considerándolas como funciones La mezcla de ambas A M ( ) = A I ( ) + A II ( ).
A 360 nm A 415 nm f( ) y g( ) se determinan a partir de los espectros de sustancias puras
Es mucho más fácil medir cuando aporta sólo uno, o sea que alguno tenga A 0 Aquí es obvio a 415 nm => A II sólo a 360nm => mezcla se puede plantear suma, pero es ambigua, mejor hacer truco para que la señal de alguno se haga 0.
Derivadas Recordar O sea que para mezclas O también La derivada cumple Ley de Beer – Lambert => CALIBRACIÓN LINEAL
Efecto sobre fondo Espectro absorción 1ª derivada 2ª derivada
Burbujas, objetos grandes => bloquean el paso =reducen luz = aumento de línea de base Turbidez => línea de base inclinada Trazas => señal de analito muy débil Mezclas => pueden tener max superpuestas
Análisis de trazas señal de interés difícil de medir 4ª derivada ?
Método de “derivada-cruce cero”
Otra opción Independizarse en todo el espectro de la “presencia” de uno de los componentes. Así se puede elegir – para el otro - la de mayor amplitud (=> sensibilidad)
Considerándolas como funciones La mezcla de ambas A M ( ) = A I ( ) + A II ( ). Al dividir el espectro mezcla por el espectro de uno de ellos (A ref ) y derivar, queda (Nota : C II es variable de muestras, C II ref es una fija; pero ambas son números) : Más claro: Cumple Ley de Beer- Lambert Dividir por A II y derivar da un resultado independiente de II, sólo depende de I