CLASIFICACION DE LOS METODOS SEGUN LA FORMA DE VISUALIZAR LA REACCION

Presentación del tema: "CLASIFICACION DE LOS METODOS SEGUN LA FORMA DE VISUALIZAR LA REACCION"— Transcripción de la presentación:

1 CLASIFICACION DE LOS METODOS SEGUN LA FORMA DE VISUALIZAR LA REACCION
INTERACCION 1RIA: LA VISUALIZACION DEPENDE DE UN INTERACCION SIMPLE Ag-Ac SISTEMA AUXILIAR DE REVELADo  ALTA SENSIBILIDAD INTERACCION 2RIA: LA VISUALIZACION DEPENDE DE FENOMEno DONDE INTERVIENEN MUCHAS MOLECULAS DE AG Y AC NO REQUIERE SISTEMA DE REVELADO  BAJA SENSIBILIDAD

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3 Inmunógeno: molécula o sustancia capaz de inducir una respuesta inmune específica.
Antígeno: molécula o sustancia capaz de reaccionar con los productos de la respuesta inmune específica. Hapteno: molécula de bajo pesos molecular incapaz de inducir una respuesta inmune a menos que se encuentre conjugada a una proteína carrier

4 Anticuerpo monoclonal: es un anticuerpo que proviene de la activación de una única célula B y que reconoce un único epitope. Anticuerpos policlononales poliespecificos: es una mezcla de anticuerpo provenientes de la activación de muchas células B y pueden reconocer diferentes epitopes de varias moléculas. Ej. anti IgG humana Anticuerpos policlononales monoespecificos: es una mezcla de anticuerpo provenientes de la activación de muchas células B y pueden reconocer diferentes epitopes pero que se encuentran en una única molécula. Ej. anti cadena g humana

5 Reacciones de precipitación
Son reacciones Ag-Ac de tipo secundaria donde ambos reactantes se encuentran solubles. Sin embargo para poder visualizar el fenómeno de precipitación la reacción se llevan a cabo en medios semisólidos (agar o agarosa).

6 Características diferenciales de las reacciones de aglutinación y precipitación
Ag particulado Ag soluble Sensible Poco sensible Fase liquida Fase semisolida (agar)

7 Tipos de reacciones de precipitación
Debido a que estas reacciones se realizan en medios semisolidos y los reactantes difunden a travez de este medio, estas reacciones son conocidas como reacciones de inmunodifusión. Inmunodifusión radial simple (IDRS) o metodo de Manchini Inmunodifusión Inmunodifusión radial doble (IDRD) o metodo de Ouchterlony

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9 Inmunodifusión radial simple (IDRS)
En esta variante el anticuerpo se encuentra diluido en el agar y el antigeno se siembra en un pocillo realizado en el agar. El antigeno difunde por el agar y cuando encuentra su zona de equivalencia con el Ac precipita formando un halo de precipitación

10 IMPORTANTE: El tamaño de halo depende de la del diámetro del pocillo de siembra y de la concentración de Ag. En base a esta característica este método puede emplearse para cuantificar antígenos

11 IDRS Cuantitativa M T1 T2 T3 D2
Medir el diámetro de halo de los testigos y realizar curva calibración. Luego medir el D de la M y extrapolar en la curva para obtener la [ ] [ ]

12 IDRS Cuantitativa La precipitación es un método que tiene baja sensibilidad. A través de este método se puede cuantificar proteínas que se encuentran en altas concentraciones : Inmunoglobulinas: IgG, IgA, IgM Factores de complemento: C3 y C4 Otros: Transferrina

13 Inmunodifusión radial Doble (IDRD)
En este metodo el AC y el AG se siembran en pocillos separados realizado en el agar. El Ac y el Ag difunden por el agar y cuando encuentra su zona de equivalencia forman una línea de precipitación. Este método se utiliza para evidenciar la presencia de un antígeno en una muestra o para analizar el grado de relación entre antígenos

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15 IDRD Cualitativa

16 Inmunoelectroforesis