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Métodos y técnicas de estudio de la función reproductiva

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Presentación del tema: "Métodos y técnicas de estudio de la función reproductiva"— Transcripción de la presentación:

1 Métodos y técnicas de estudio de la función reproductiva
Dr. Hector Godoy Morales Profesor Titular Dr. Alfredo Ulloa Aguirre Profesor Adjunto Presenta: Dr. Horacio Alvarado Delgado R1BR

2 Principios de Evaluación Hormonal
Métodos Inmunológicos Anticuerpos Medición de cantidades muy pequeñas de hormonas Reacción antígeno – anticuerpo INMUNOENSAYOS ENSAYOS INMUNOMETRICOS

3 INMUNOENSAYOS

4 Ensayos Inmunometricos

5 Ensayos inmunometricos
Inmunolite

6 Evaluación Hormonal Sensibilidad Especificidad
Capacidad de medir exactamente el valor menor posible Especificidad Capacidad de medir exactamente unicamente la hormona en cuestión sin reacción con otras hormonas o substancias

7 Evaluación Hormonal Problemas con especificidad Hormonas proteicas
Isoformas Hormonas esteroides Moléculas de tamaños muy pequeños Cantidades de hormona pequeña Mujeres = testosterona

8 Validación y control de calidad de Inmunoensayos
Validación del ensayo Antes de usar debe ser validado Exactitud Precisión Sensibilidad Especificidad

9 Exactitud del ensayo Métodos para establecer la exactitud
Define el grado en que una medición dada está deacuerdo con el valor real Métodos para establecer la exactitud Encontrar el paralelismo entre la curva estándar del ensayo y sus diluciones seriadas de muchas muestras que contienen altas concentraciones de lo que se va a analizar. La recuperación de patrón añadido, en los diferentes niveles, a partir de muestras de pacientes

10 Precisión Se determina Coeficiente de variación Precision intraensayo
Es la variabilidad que existe cuando múltiples mediciones de un compuesto son realizadas en la misma muestra. Se determina Coeficiente de variación Precision intraensayo Precisión interensayo

11 Precisión Coeficiente de variación (%) Precisión Intraensayo
Se evalúa midiendo el análisis en muestras repetidas del mismo ensayo. Precisión Interensayo Análisis en muestras repetidas, cada una incluida en diferentes ensayos SD CV = X 100 media de determinaciones repetidas de una prueba

12 Especificidad Medición
Grado de interferencia de una reacción cruzada que se encuentra a partir de otras substancias del análisis Medición Reacción cruzada del anticuerpo se compara con la curva de dosis respuesta estándar obtenida de los compuestos que están presentes en la misma muestra de la substancia analizada y que pueda unirse a los anticuerpos

13 Especificidad Medición
Grado de interferencia de una reacción cruzada que se encuentra a partir de otras substancias del análisis Medición Comparar los valores analizados de un grupo de muestras medidas por un método especifico de inmunoensayo, el cual es obtenido por un método clásico.

14 Sensibilidad Se define como la cantidad mas pequeña de substancia que se requiere para ser distinguida de cero Depende de la precisión de la curva estándar, la cual se mide analizando 10 replicas de cada concentración estándar y de la estándar “zero”. Esto permite el cálculo de la cantidad media de marcador de anticuerpo límite, lo que corresponde a cada concentración estándar

15 Control de calidad de un ensayo
Parámetros de control de confiabilidad de un inmunoensayo Control de calidad externo Control de calidad interno Curva estándar Cuenta total Fijación no específica Fijación cero estándar Pendiente Intecepción de “y” the doses of the standard at which the percentage of label-bound substance is equal to 20, 50 y 80% Lo que se mide en las muestras

16 Sistemas de enzayos comerciales
Inmunoensayo de fluoresencia de disosciación mayor de lanátidos Sistema inmunolite Sistema IMx

17 Inmunoensayo de fluorecencia de disociación mayor de lanátidos
Fluorocromos Emiten luz visible durante la exitación con radiación Isotiocinato Europium Elemento de la serie de lanátidos, que es quelado a un compuesto substituible. Para mejorar la florescencia, el europium quelado se disocia a un complejo que baja de pH y forma un nuevo quelato, que se fija a la solución para prevenir el enfriamiento

18 Inmunoensayo de fluorecencia de disociación mayor de lanátidos
Fase solida Dos ensayos fluoroinmunométricos Técnica de sandwich Usa dos anticuerpos monoclonales

19 Inmunoensayo de fluorescencia de disociación mayor de lanátidos
Flurecsencia depende de la cantidad de concentración en una muestra

20 Sistema Inmunolite Usa tecnología quimiolumiscente amplificada por enzimas. Hidrólisis de un substrato quimiolumiscente estable Fosfato adamantil dioxetano Enzima Alcalin fosfato

21 Sistema Inmunolite Fosfato de Adamantil dioxetano
Alcalin fosfato Anión adamantil dióxetano Emisión de luz

22 Sistema IMx Analizador de inmunoensayo automatizado, que incorpora
Inmunoensayo de micropartículas (MEIA) Para moléculas de gran peso Hormonas proteicas Fluorometría Inmunoensayo de polarización fluorescente (FPIA) Para moléculas de bajo peso Para hormonas esteroideas Polarización óptica fluorescente

23 Sistema IMx

24 RIA combinado con bioensayos
El primer RIA – bioensayo Dafu et.al. Midieron concentración de testosterona en células de Leyding dispersas bajo la influencia de LH o hCG. Ventajas Actividad biológica de las hormonas cambia. Método de elección Ausencia de hormona por actividad biológica

25 Médición de gonadotropinas
FSH Y LH = IU Preparaciones LER 907 2nd IRPHMG RIA Baja sensibilidad y especificidad PULSATIBILIDAD

26 Medición de gonadotropinas
Si se esperan bajos niveles IRMA IFMA ICMA LH reacción cruzada con hCG Pulsatibilidad (60 – 90 minutos) Presición: toma muestra cada 15 – 20 minutos

27 Medición de gonadotropinas
LH Incrementada Ketoconazol Disminuida Esteroides Fenotiazinas Digoxina Propanolol β-hCG 5 – 20ug Embarazo Tumor productor de bhcg Secreción hipofisiaria normal Interferencia FSH Incrementada Levodopa Ketoconazol Disminuida Estrogenos Fenotiazidas

28 Niveles Sanguíneos de FSH y LH en la mujer
LH – FSH fase folicular RIA 4 – 15 mIU/ml ICMA: NO: falla hipotalámica o hipofisiaria o pubertad Se usan ensayos de tercera generación. Variaciones en laboratorios LH: 8.2 ± 2.1 mIU/ml (4 – 12.4 mIU/mL) FSH: 8 ± 1.8 mIU/ml (4.4 – 11.6 mIU/mL) Razón FSH/LH: 1:1

29 Niveles sanguíneos de LH y FSH en la mujer
Medio ciclo LH: incrementa cuatro a seis veces FSH: dos a tres veces Fase lútea LH y FSH: mismo valor que fase folicular

30 Niveles sanguíneos de LH y FSH en la mujer
Pacientes pediátricos Niveles menores Tasa LH:FSH <1 (mas secreción FSH) Uso de IRMA o ICMA de 3era generación Pediátricos Pubertad precoz (LH: > 0.6 mUI/ml) Hipogonadismo Hipogonadotripico

31 Niveles sanguíneos de LH y FSH en la mujer
Perimenopausia FSH LH Postmenopausia FSH y LH Senectud LH =

32 Niveles sanguineos de LH y FSH en la mujer
LH y relación FSH:LH LH y FSH SOP Falla ovárica prematura

33 Pruebas dinámicas para la evaluación de gonadotropinas
Prueba de hormona estimulante de gonadotropinas GnRH sintética para estimular FSH y LH Diferenciar entre causas hipotalámicas o hipofisiarias de deficiencia de gonadotropinas

34 Prueba de GnRH Usada para probar la maduración del eje H-H-O
100 ug IM diario de GnRH por una semana Baja respuesta = Problema Hipotalámico Usada para probar la maduración del eje H-H-O 2 muestras basales separadas por 15 minutos 25 o 100 ug IV GnRH Muestras 20,30, 60, 90 y 120 min

35 RIA GDPP ICMA IFMA Prueba de GnRH 100 ug GnRH, pico de LH
Niñas: > 15 mIU/ml Niños: > 25 mIU/ml RIA 100 ug GnRH, pico de LH > 8 mIU/ml ICMA GDPP 100 ug GnRH, pico de LH Niñas: > 6.9 mIU/ml Niños: > 9.6 mIU/ml IFMA

36 | Prueba de GnRH Único método valido Fines de investigación
Pulsatibilidad espontanea de GnRH Fines de investigación |

37 Prueba con citrato de clomifeno
FSH y estradiol día 3 100 mg clomifeno días 5 - 9 + = cualquier valor arriba del umbral que marque el laboratorio como positiva (10 – 12 mIU/ml) FSH día 10 Para medir reserva ovárica

38 Medición de Prolactina
Medida por RIA o IRMA Hombre: 15 – 20 ng/mL Mujer: 20 – 25 ng/mL Influenciada por Estrógenos Medicamentos Fenotiazinas Metoclopramida Estrés Comida Estimulación mamaria Punción de vena

39 Medición de Prolactina
Cambios diurnos Incremento después de las comidas Muestra: al media mañana Hiperprolactinemia 10% sin diagnóstico Enfermedades autoinmunes Precipitación con polietilen-glicol (elevación por PRL monomérica + PRL autoanticuerpo)

40 Medición de Prolactina
Situación Clinica Valor Prolactina Embarazo 6 semanas Inicia Incremento A termino 200 ng/mL Menopausia Disminuye Adenoma Hipofisiario > 200 ng/mL Adenomas no secretores de PRL 50 – 200 ng/mL Hipotiroidismo

41 Pruebas dinámicas de evaluación de PRL
Usadas antes de TAC o RM TRH Estimula la secreción de TSH Usada para medir secreción hipofisiaria de PRL Pacientes con prolactinoma, no presentan incremento en PRL después de la estimulación con TRH

42 Pruebas dinámicas de elevación de PRL
Prueba con TSH: para definir entre Formas funcionales de hiperprolactinemia Adenoma Hiofisiario secretor de PRL TSH 200ug IV Muestras: 30, 60 y 90 minutos PRL = incremento 100% Metoclopramida 10 mg IV Muestras: 30, 60, 90 y 120 minutos PRL = 100 ng/mL, 60 y 120

43 Medición de estradiol y otros estrógenos
RIA Bajos Niveles Se extraen con solventes orgánicos y se separan por cromatografía. Estriol RIA en suero Métodos espectofotometricos RIA en orina

44 Medición de estradiol y otros estrógenos
Situación Clínica Valor Fase mediafolicular 20 – 80 pg/mL Pico Ovulatorio 200 – 500 pg/mL Fase lútea 60 – 200 pg/mL Antes de pubertad < 20 pg/mL Después menopausia pg/mL Oferectomía < 10 pg/mL Hombres < 40 pg/mL Hombres estrona < 60 pg/mL En hombres: Evaluación estradiol: Hipogonadismo y ginecomastia Obesidad: Aumento de estrógenos

45 Medición de Progesterona
Progesterona medida por una variedad de inmunoensayos Especificidad alta y depende de la reacción cruzada con la 17 α OHP

46 Niveles sanguíneos de progesterona y evaluación de la ovulación
Fase folicular: < 1.5 ng/mL Incremento posterior a pico LH y tiene pico maximo 6 – 8 días después de ovulación. Postmenopausia: < 0.5 ng/mL Para evaluación ovulación Fase media – lutea (21 – 22 ciclo) > 7 ng/mL. En embarazo: 40 ng/mL A término: 150 ng/mL 6 – 8 semanas: < 10 ng/mL = Ectópico

47 Medición de andrógenos
Andrógenos en la mujer Ovarios Glandula suprarrenal Compartimiento periferico Se miden varios andrógenos Testosterona sérica Ovario ,2/3 de conversión periférica androstenediona Sulfato de DHEA Suprarrenal

48 Medición de Andrógenos
Testosterona sérica RIA o ICMA Costoso Baja especificiad Sobreestimación de los valores Testosterona no fija = testosterona libre Se calcula el pocentaje libre de SHBG 75% testosterona fiaja a SHBG Fija a albúmina LIbre

49 Medición de Andrógenos
Testosterona libre Se mide relación entre testosterona y SHBG TL = (T (ng/ml) x 3.467) SHBG X 100

50 Medición de andrógenos
Otros andrógenos útiles 11 b- hidroxyandrostenediona Porducción suprarrenal de androstenediona Productos de 5 a-reductasa 3 a- glucoronil - androstenediol Refleja el metabolismo periferico de T en hirsurtismo

51 Niveles sanguíneos de androgenos
Situación clinica Valor de Testosterona Mujer edad reproductiva 20 – 50 ng/mL Neoplasia ovarica > 200 ng/mL SOP < 100 ng/mL Situación clínica Valor de DHEAS Mujer edad reproductiva 0.8 – 2.8 ug/mL Neoplasia suprarrenal > 8 ug/mL N suprarrenal productora de T 3 – 4 ug/ml

52 Niveles sanguíneos de andrógenos
Androstenediona sérica 1 – 2.5 ng/mL Testosterona libre 1 – 8.5 pg/mL SHBG 30 – 90 nmol/L

53 Medición de percursores de andrógenos circulantes en la mujer
Medición de intermediarios del metablismo de los esteroides es útil para el diganóstico de deficiencias suprarrenales enzimáticas.

54 Medición de percursores de andrógenos circulantes en la mujer
17 a-OHP Deficiencia de 21 hidroxilasa forma neonatal: 50 – 200 ng/mL. No clasica: 10 – 20 ng/mL. Mujer Sana: < 1ng/mL Hiperandrogenismo: Niveles elevados

55 Medición de percusores de andrógenos circulantes en la mujer
Deficiencia de 11 b-Hidroxilasa 11 deoxycortisol Deficiencia de 3 b – Hydroxyesteroide Razón 17 OHP y 17 a-hydroxipregnenolona

56 Pruebas para establecer el tipo de androgenismo
Evaluan secreción suprarrenal de andrógenos Prueba con supresión con dexamentasona Prueba con estmulación con ACTH Evalúan secreción ovárica de andrógenos Prueba con agonista de la GnRH

57 Prueba de supresión con dexametasona
Dexametasona 0.5 mg VO cada 6 hrs Evaluación de T y T libre 3 días Evaluación de DHEAS 7 días Solo en tumor suprarrenal o DHEAS > 8ug/mL Disminución en 60% de los valores basales de T y T libre HIPERANDROGENISMO SUPRARRENAL

58 Prueba de estimulación con ACTH
Deficiencia de cortisol Deficiencias enzimaticas suprarrenales Distinguir entre hiperandrogenismo ovarico y suprarrenal Baja especificidad

59 Prueba con agonistas de GnRH
Causa regulación a la baja de la secreción de gonadotropinas hipofisiarias e inhiben la secreción de esterodies ováricos Uso para SOP Mejor Clínica y resultado de laboratorio basales.

60 Prueba con agonista de GnRH
Nafarelin, Buserelin y leuprolide Leuprolide 500 o 1000 ug SC eb mañana 5 – 8 ciclo. Muestras 0, 8 y 24 hrs. 17 a- hidroxyprogesterona mayor de 2.6 ng/mL PCOS

61 Evaluación Hormonal del Hirsurtismo
Exceso de crecimiento de cabello en la mujer, con distribución central T, DHEAS y SHBG

62 Niveles de andrógenos en el varón
Solo se miden testosterona total y testosterona libre Testosterona 300 – 1000 ng/dL Biodisponible: 66 – 417 ng/dL Testosterona libre 50 – 210 pg/mL DHT 30 – 85 ng/dL Útil para evaluar deficiencia de 5 a-reductasa

63 Medición de Inhibinas Inhibina A y B RIA, ELISA
Secreción de varias poblaciones de células de la granulosa. Valores sericos varian en el ciclo mesntrual Inhibina A: baja en fase folicular y tiene pico en fase mediolutea Inhibina B: contrario

64 Medición de Inhibinas En el embarazo Menopausia
Inhibina A disminuye en segundo trimestre Inhibina B pico en tercer trimestre. Menopausia Ambas disminuyen marcadamente

65 Medición de Inhibinas Utilidades Tumores de células de la granulosa
Monitoreo postoperatorio de tumores de células de la granulosa Complicaciones del embarazo Evaluación de folículos presentes en el ovario en fase folicular temprana. Envejecimiento reproductivo

66 Medición de Inhibinas En hombres Producida por células de Sertoli
Marcador de espermatogenesis Diagnostico diferencial Criptorquídea Anorquía

67 Medición de AMH y valoración de la reserva ovárica
Valoración de reserva ovárica Envejecimiento ovárico Acelerado después de 35 años Mujeres jóvenes Tratamiento de cáncer Metodos de evaluación FSH y E2 día 3 Prueba citrato de clomifeno AFC Inhibina B AMH

68 Medición de AMH y valoración de la reserva ovárica
AMH es dependiente del ciclo y no fluctua como FSH Valor debajo de 0.35 ng/ml pobre pronostico

69 Medición de b hCG Placenta en grandes cantidades Hipófisis

70 Medición de b hCG Util Confirmar embarazo
Monitor de función trofoblástica Complicaciones del embarazo Embarazo ectópico Aborto espontáneo Screening de trisomias Enfermedad trofoblástica Monitorización de recurrencia de tumoración

71 Medición de resistencia a la Insulina
Probema importancia en salúd publica Fisioptatología de SOP Métodos de medición Glycemic clamps = Investigación Modelo de Bergman FSIGT (tolerancia a la glucosa intravenosa son muestras frecuentes) es el test gold estándar Prueba de tolerancia a la insulina Tolerancia oral a la glucosa

72 Prueba de glucosa IV con muestras frecuentes
Se colocan dos cateteres en vena antecubital Glucosa e Insulina Glucosa 0.3 g/kg por un minuto IV 20 minutos despues Insulina 0.03 U/Kg) Muestra de sangre 5, 10 y 15 minutos 1 minuto después de la toma de glucosa y después cada minuto por 10 minutos y después 12, 14, 16, 20, 22, 23, 24, 25, 27, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120 y 180 (33)

73 Prueba de glucosa IV con muestras frecuentes
Se modifico a solo 12 muestras 5 minutos antes de la toma de glucosa Y luego 2,4,8,20,22,30, 40,50, 70, 100 y 180 minutos. Insulina Glucosa Sesibilidad a la insulina Inversamente proporcional a resistencia a la insulina Se calcula usando el metodo modelo mínimo usando un algoritmo computarizado

74 Prueba de tolerancia a la Insulina
Se usa para tener acceso a la resistencia a la insulina y tiene buena correlación con la FSIGT y clamp studies. Noche anterior infusión IV de insulina regular (0.1 U/kg) por un minuto Glucosa 0,2,5,8,10 y 15 minutos después de infusión de insulina,

75 Prueba de tolerancia a la insulina
Noche anterior infusión IV de insulina regular (0.1 U/kg) por un minuto Glucosa 0,2,5,8,10 y 15 minutos después de infusión de insulina Hipoglicemia 15 minutos Dextrosa 50% en agua se inyecta para bolquear hipoglicemia. Afectada por GH Cortisol Catecolaminas

76 Prueba de Tolerancia a la Insulina

77 Prueba de tolerancia oral a la glucosa
Usada para evaluar la tolerancia a la glucosa Área bajo la curva de glucosa / área bajo la curva de insulina Área bajo la curva de glucosa x área bajo la curva de insulina SI horas despues de OGTT (calcular 108/glucosa a las 2 horas x insulina a las 2 horas x 150 x kg) Ecuación de Cederholm (calculacon que considera el total y la media de los niveles de glucosa e insulina

78 Cálculos de insulina y glucosa en ayuno
Evaluación de resistencia a la insulina usando cálculos matemáticos Tasa glucosa – insulina Índice de resistencia a la insulina en ayuno = (glucosa x insulina)/25 Evaluación del modelo de homeostasis de resistencia a la insulina (HOMA-IR) = (glucosa x insulina)/22.5 Logartimo de HOMA –IR Indíce de sensibilidad cuantitativo de insulina (QUIKI) = 1/(log glucosa + log insulina) RI = .335

79 Medición de Hormonas adiposas
Leptina Proteína aminoácido Factor de señalización de tejido adiposo a SNC Indicador de energía 10 – 30 pg/mL Aumento Obesidad PCOS Bajo Niños

80 Medición de Hormonas adiposas
Adiponectina Proteína compuesta de 244 aminoacidos Prevenir el desarrollo de resistencia a la insulina provocado por la dieta Previene daño celular endotelial RIA o ELISA 8 – 18 ug/mL Disminuye en Obesidad Uso Puede ser predictor de riesgo de aterosclerosis

81 Evaluación de la cantidad y distribución de grasa
Indice de masa corporal Peso/altura2 >30 = obesidad >40 = Obesidad severa 25 – 30 = sobrepeso 19 – 25 = Normal DEXA (cuantificación de grasa directamente por absometria por rayos x de cuerpo completo Medición de cintura Mujer >88 cm= Incremento riesgo CV

82 Evaluación de la cantidad y distribución de la grasa corporal

83 Síndrome Metabolico

84 Medición de GH y factores de crecimiento
RIA o IRMA Nivel basal muy bajo y secreción pulsatil la medición puede ser subestimada. Medición de la GH en orina Baja y a veces no detectable

85 Medición de GH y factores de crecimiento
IGF-1 Inmunoensayos específicos Reflejan las concentraciones integradas de GH en 24 horas Screening de deficiencia de GH Niveles bajos Prepuberes Desnutrición Hipotiroidismo Falla renal DM Útil en hipersecreción de GH ´Tratamiento de acromegalia

86 Medición de GH y factores de crecimeinto
IGF-2 IRMA Hipoglicemia por tumor de células de islotes pancreáticos.

87 Medición de GH y factores de crecimiento
Hay 6 proteinas fijadoras de IGF IGFBP 1, 2 y 3 con los que se evaluan para propositos clínicos IGFBP – 3 para alteraciones en GH IFGBP – 1 Influenciados por hiperinsulinemia IGFBP – 2 se relaciona inversamente con la GH Junto con la relacion IGFBP 3/1 es un marcador de la acción de la GH Incrementa en tumores como gliomas y cacer de prostata

88 Pruebas dinámicas para la evaluación de la secreción de GH
Se usan pruebas provocativas o de inhibición Disminución en respuestas en al menos dos pruebas provocativas es diagnostico. Punto de cohorte de un pico normal de GH en pruebas provocativas es : 10 ng/ml = ensayo policlonal 2.5 – 3.5 ng/ml = ensayo monoclonal

89 Prueba de tolerancia a la insulina
Primera opción en diagnostico Muestras de sangre a los 0,15,30, 60 y 90 minutos. Medición de GH Mas de 10 ng/mL excluye diagnostico Menos de 3 ng/mL Deficiencia severa de GH Glucosa Hipoglicemia ( <40 mg/dL)

90 Prueba de GHRH y arginina
Prueba alternativa Realizada en caso de contraindicación de hipoglucemia GHRH 1ug/kg Arginina 0.5 g/kg

91 Prueba de tolerancia oral a la glucosa
Prueba primaria para hipersecreción de GH Administración durante la noche de 75 a 100 gr de glucosa para causar supresión de GH sérica Muestras cada 30 minutos por 2 horas RIA policlonal Disminución de GH a 2ng/mL

92 Medición de hormonas que regulan el calcio y de marcadores de hueso
Hormonas reguladoras de calcio PTH 1,25 dihidroxivitamina D Metabolismo complejo Multiples formas moleculares en circulación Forma bioactiva circula en pequeñas cantidades.

93 Medición de hormonas que regulan el calcio y marcadores de hueso
PTH Inmunoensayos que detectan anticuerpos Reconocen la región media o carboxiterminal Hiperparatiroidismo primario Los ensayos que detectan anticuerpos contra las moleculas intactas o el fragmento aminoterminal Falla renal Cambios fisiológicos asociados con la función de PTH

94 Medición de hormonas que regulan el calcio y marcadores de hueso
PTH Valor Normal: 10 – 65 pg/mL. Se debe correlacionar con calcio HIPERPARATIROIDISMO PTH CA DEFICIENCIA VIT D PTH = CA

95 Medición de hormonas que regulan el calcio y marcadores de hueso
Vitamina D Menos 10 ug/L Deficiencia severa de vitamina D 10 – 20 ug/L Deficiencia parcial de vitamina D

96 Métodos para medición de densidad mineral ósea
Esencial para diagnostico de osteopenia y osteoporosis Evaluación por US de calcáneo DEXA Columna lumbar, cadera, femúr y cuello T score Numero de SD Osteopenia: SD : -1, -2.5 Osteoporosis SD: menor de -2.5

97 Medición y Niveles sanguíneos de hormonas tiroideas
TSH Ensayos inmunometricos Enzimas Componentes luminisentes I 125 Situación Clínica Valor Normal 0.5 – 4 ug/mL Hipotirodismo subclinico < 2.5 ug/mL Hipertiroidismo subclinico > 4 ug/mL

98 Prueba de estimulación con TRH
Evaluación de hipotiroidismo central Hipertiroidismo dependiente de TSH Tumores hipofisiarios 200 ug de TRH IV. TSH y 60 minutos

99 Evaluación de glucocorticoides y función adrenal
Cortisol Mineralocorticoide Suprarrenal Inmunoensayo Reacción cruzada con prednisona, prednisolona y cortisona Variación circadiana Nivel más alto: mañana Nivel más bajo: tarde 50nm/L (1.8 ug/mL) excluye Cushing

100 Evaluación de glucocorticoides y función adrenal
Cortisol urinario libre en 24 horas 50 – 60 ug/día (100 – 130 ug/día) Cromatografía y RIA Ensayo doble ciego competitivo 3 o 4 colecciones normales excluyen diagnóstico

101 Evaluación de glucocorticoides y función adrenal
ACTH Ayuda a interpretar los resultados del cortisol IRMA 100 pg/mL cortisol = Adisson ACTH 20 pg/ml 9 AM = Cushing dependiente de ACTH ACTH 10pg/mL Causa suprarrenal de Cushing

102 Prueba de supresión con dexametasona
1mg dexametasona a las 11PM Medición de cortisol en la mañana Cortisol > < 5ug/dl =respuesta normal 0.5 mg dexametasona cada 6 horas por 2 días Cortisol > 1.8 ug/dl = indicador de CUshing

103 Prueba de estimulación con CRH
Estimula la secreción de ACTH 1ug/kg CRH IV ACT y cortisol 0,15,30 y 60 min ACTH: incrementa 100% Cortisol: 50% Para diferenciar Cushing hipofisiario o ectopico.

104 Prueba de Dexametasona -CRH
Para una mayor exactitud en el diagnóstico de hipercortisolismo. Supresión con dexametasona (inicia en la tarde de día 1, con la ultima dosis a las 6 am del 3 er día) CRH (1ug/kg IV) a las 8 am. Cortisol: mas de 1.4 ug/dl 15 min despues de administración de CRH sugiere síndrome de Cushing.

105 Estudios de Imagen en Sindrome de Cushing
40% microadenomas no se observan Realizar RMN con gadolineo Para tumor suprarrenal TAC Tumor mayor de 6 cm es maligno Realizar TAC de tórax para identificar causa ectópica de secreción de ACTH

106 Procedimiento diagnóstico en sospecha de síndrome de Cushing

107 Pruebas para Insuficiencia Suprarrenal
Pruebas de ACTH Estimulación con 250 ug ACTH IV Medición cortisol 0, 30, 60 min Cortisol Menor de 13 ug/dL: Insuficiencia suprarrenal Cortisol ug/dL: Requiere evaluación adicional Cortisol arriba de 18ug/dL: excluye el diagnóstico

108 Pruebas para Insuficiencia suprarrenal
Prueba de Tolerancia a la insulina Ayuno nocturno Insulina 0.1U/kg IV 1min Glucosa y Cortisol 0,15,30,45,60,75 y 90 minutos Excluye el diagnóstico Hipoglucemia (gluc menor de 40 y cortisol mas de 18 g/dL)

109 Pruebas para Insuficiencia Suprarrenal
Prueba Metyrapona Bloquea 11 b-hidroxilación Usada para probar la respuesta suprarrenal a ACTH endógena Reduce cortisol y induce a insuficiencia suprarrenal Usada en CI de IIT

110 Procedimiento diagnóstico en sospecha de tumores hipofisiarios
Dolor de cabeza Diabetes insipida Alteraciones visuales Sx RMN Acromegalia Síndrome de Cushing Amenorrea Galactorrea HOR +

111 Procedimientos diagnostico en sospecha de tumores hipofisiarios

112 Procedimientos diagnosticos en sospecha de tumores hipofisiarios

113 Evaluación pélvica Importante para la evaluación reproductiva
Función ovárica Desarrollo endometrial

114 Evaluación pélvica SOP Anomalías Müllerianas Miomatosis Uterina
Ovarios poliquisticos Criterio diagnóstico de Rotterdam Anomalías Müllerianas Ultrasonido 3D Miomatosis Uterina


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