DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO Q.F.B. Ma. del Socorro Morales Mtz. Mc. MVZ David Espinosa

DIAGNOSTICO DE INFECCIONES PARASITARIAS En las parasitosis intestinales sanguíneas, vaginales, abscesos y de piel el diagnostico se realiza con la identificación de el parásito En parasitosis tisulares el diagnostico generalmente se realiza por pruebas inmunológicas

Diagnostico Lo más importante para un buen diagnostico es saber como trabajar una muestra.

PROTOCOLOS PARA ORIENTAR AL PACIENTE Y ALGUNAS VECES A LOS MÉDICOS DE CÓMO SE DEBE COLECTAR Y PEDIR UNA MUESTRA

El proceso de los productos biológicos es donde va a radicar el éxito o el fracaso de un diagnóstico en enfermedades parasitarias Las muestras mal colectadas, inadecuadamente conservadas y muy viejas solo conducirán a resultados erróneos o falsos

MANEJO DEMUESTRAS

MUESTRA La toma de muestra depende de lo que se sospeche 1.- Heces (por expulsión natural) 2.- Heces por purgantes 3.- Cucharilla rectal (lactantes y niños) 4.- Material de duodeno (Diagnóstico de Giardia, Stongyloidosis y parásitos en tracto biliar)

5.-Material obtenido por sigmoidoscopia (Diagnostico de Amibas, Esquistosomiasis y Cryptosporidiosis) 6.- Abscesos (Identificación de Entamoeba histolytica) 7.- Parásitos sanguíneos y tisulares (Tripanosomiasis, Leishmaniasis, malaria etc.) 8.- Biopsias de piel 9.- Fluidos corporales (semen) 10.- Biopsias de tejidos 11.- Suero (Determinación de Antígenos y de anticuerpos) 12.- Esputo

MANEJO DE HECES Deben ser colectados en frascos de boca ancha (para mayor seguridad que sean de plástico) No deben de ser contaminadas con tierra, agua y orina (lo que sucede de manera frecuente). No colectar y manejarlas con hisopos ya que absorben trofozoítos.

Contenedores

CONSERVACIÓN

FÍSICOS Temperaturas bajas (10 C). Se utiliza en heces formadas y pueden ser revisadas hasta en 48 hrs. de ser evacuadas. Temperatura ambiente en el caso de heces diarreicas ; revisarlas en un plazo no mayor a una hora.

QUIMICOS Permite la conservación de estructuras parasitarias por mas tiempo. Los mas utilizados son el formaldehído comercial al 10 % (huevos de helmintos) y al 5 % (para observar quistes de protozoarios o cuando se desconoce que se va a encontrar) Se mezcla una parte de heces por tres de solución.

Otras soluciones utilizadas son: MIF (Sol. Preservadora-colorante de mertioláte-yodo-formaldehído) PAF (Fijador de fenol-alcohol-formol) Las amibas se conservan no como quiste sino que conservan sus pseudopodos. Gliserína al 50% Fijador de Schaudin (contiene mercurio) es excelente para preservar trofozoítos, quistes, huevos y larvas. PVA (fijador de alcohol polivinílico)

EXAMENES COPROPARASITOSCOPICOS Es el estudio de la materia fecal para la búsqueda e identificación de parásitos

ANALISIS DE HECES Coprológico general (características microscópicas, químicas y restos alimenticios). Coproparasitoscópico (determina presencia o ausencia de parásitos). Coprocultivo (determinación de bacterias y hongos).

COPROLÓGICO GENERAL CARACTERISTICAS MACROSCÓPICAS 1.- Cantidad (Normalmente se elimina de 100 a 200 g) 2.- Consistencia (sólida y bien formada) 3.- Color (castaño oscuro o claro). 4.- Olor 5.- Moco (anormal)

CARACTERISTICAS QUIMICAS 1.- Ph: Neutras 2.- Bilirrubina: Negativo 3.- Urobilinógeno: 75- 350 mg/ 100g de heces. 4.- Sangre oculta: Negativa 5.- Grasa

METODOS COPROPARASITOSCÓPICOS CUALITATIVOS Nos sirven para determinar que formas parasitarias existen CUANTITATIVOS Útiles para determinar en que cantidad se encuentran (generalmente en helmintiasis)

EXAMENES CUALITATIVOS EXAMEN DIRECTO: Es el más antiguo, más sencillo y rápido además de económico. Utilidad: Para búsqueda de trofozoítos Limitaciones: La muestra utilizada es tan pequeña que muchas veces no es representativa Material: Heces, Sol. Salina y Lugol parasitológico

EQUIPO Portaobjetos Cubreobjetos Aplicadores de madera Microscopio compuesto (10X y 40X) Precauciones: La materia fecal es potencialmente infectante

TECNICAS CUALITATIVAS DE FLOTACION Con solución azucarada (sacarosa) Utilidad: En casos de emergencia (trabajo de campo) Limitaciones: Atrae moscas y hormigas Reactivos: Azúcar común y agua de la llave (densidad de 1.180)

Método de Willis Utilidad: Muy sencillo. Se utiliza para huevos, quistes y larvas. Limitaciones: La sol. Puede provocar deshidratación y deformación rápida de las estructuras parasitarias. Reactivos: Cloruro de sodio y agua corriente

Método de Faust: Originalmente es un método de concentración por centrifugación flotación. Utilidad: Hace una buena concentración de quistes, huevos y larvas. Es la técnica mas utilizada en los laboratorios. Limitaciones: En algunas ocasiones los huevos muy pesados no flotan adecuadamente

Modificación de la técnica de Faust Sol. de Faust Densidad 1.18 Sulfato de zinc 350g Agua corriente 1000 ml Se añade directamente la sol. de Faust a las heces y se coloca en un tubo de gran capacidad (20- 25 ml) Se le coloca el cubreobjetos (18 X 18) al tubo

Se deja reposar por 10 min. El cubreobjetos se coloca en el portaobjetos y se lee en el micro (puede utilizarse lugol)

MUESTRA DE ESPUTO Se realiza cuando se quiere determinar Paragonimus mexicanus La muestra se debe procesar lo antes posible en caso de no ser así se conserva en formaldehído al 10 %

ORINA Y EXUDADOS VAGINAL Y URETRAL Generalmente se utiliza para determinar Tricomonas vaginalis, Esquistosoma haematobium y ocasionalmente larvas de Strongylus stercoralis. En el caso de exudados vaginales y uretrales a la muestra se le añade un poco de sol. Salina para conservarla y evitar que se seque. Debe de realizarse el estudio de inmediato

E. histolytica Observación en sol. salina

Lugol Vacuola característica de glicógeno (Café)

Pruebas Inmunológicas Determinación de Anticuerpos Reacciones en piel Serología Determinación de Antígenos

Determinaciones específicas Por afinidad de los parásitos Tejidos Líquidos (orinas, LCR, Sangre) Cultivos invitro o en vivo.