REINO FUNGI

Los Hongos Imperfectos o Deuteromycota productores de Micotoxinas Aspergillus Fusarium Alternaria Penicillium

Son CONTAMINANTES INEVITABLES de cereales y oleaginosas MICOTOXINAS Son metabolitos secundarios de origen fúngico, que causan efectos tóxicos en animales y el hombre cuando son incorporados por una vía natural Son CONTAMINANTES INEVITABLES de cereales y oleaginosas

 Estructuras muy complejas de PM < 700  Gran estabilidad frente a agentes físicos y químicos  Mismo hongo puede producir varias micotoxinas Zearalenona Tricotecenos Fusarium graminearum Acido tenuazónico Alternariol AAL toxinas Alternaria alternata  Misma micotoxina puede ser producida por distintos géneros/especies fúngicos Ocratoxinas Aspergillus y Penicillium Fumonisinas Fusarium proliferatum y F. verticillioides

TENIENDO EN CUENTA:  La gran estabilidad de estos metabolitos  No todas las cepas de una especie reportada toxicogénica lo son  Su síntesis esta condicionada a varios parámetros: pH, Tº, aw, O2 , CO2 , luz/oscuridad LA PRESENCIA DE MOHOS EN UN ALIMENTO NO IMPLICA LA PRESENCIA DE MICOTOXINAS Y VICEVERSA

Infección fúngica Formación de Micotoxinas Producto agrícola Infección fúngica Formación de Micotoxinas Consumo por animales Almacenamiento Procesamiento Residuos en tejido Residuos en leche Consumo por el hombre Producto cárnico Producto lácteo MICOTOXICOSIS PRIMARIA Consumo por el hombre MICOTOXICOSIS SECUNDARIA

Efectos Tóxicos Dosis Altas : daño hepático daño renal daño neurológico daño hematológico daño gastrointestinal LETALIDAD Dosis Bajas: daño inmunológico mala absorción de nutrientes trastornos reproductivos baja producción (de leche, huevos) tumores malignos INFECCIONES PRODUCCION DEFICIENTE GRAVE RIESGO EN SALUD HUMANA

Aflatoxinas Ocratoxinas Zearalenona Tricotecenos Fumonisinas Patulina Aspergillus Aspergillus y Penicillium Ocratoxinas Zearalenona Tricotecenos Fumonisinas Fusarium Patulina Aspergillus y Penicillium

Toxinas producidas por las especies del Género Aspergillus Aflatoxinas Derivadas del núcleo Furano-Cumarina Son contaminantes de: Maiz Maní Leche • A.. flavus • A.. parasiticus • A.. nomius

Actuan como mutágenos al unirse a la guanina y generar un sitio apurínico (transversión a adenina) Son hepatotóxicas y cancerígenas Alrededor del 1% de la aflatoxina B1 consumida con el forraje es excretada en leche como M 1 Tienen acción sinérgica con el virus de la hepatitis B, por lo que la reducción de la ingesta de estas toxinas disminuye la tasa de cáncer de hígado en individuos portadores del virus

Actuales límites sobre micotoxinas en Argentina Aflatoxinas  Codigo Alimentario Argentino Harina de soja B1+B2+G1+G2 30 µg/Kg Maní y sus proctos B1 20 µg/Kg 5 µg/Kg Maíz y sus productos Leche fluída Leche en polvo M1 0.5 µg/Kg Alimento para bebes  Mercosur Leche fluída Leche en polvo M1 0.5 µg/Kg 5 µg/Kg Maíz en grano harina de maíz o sémola B1+B2+G1+G2 20 µg/Kg Maní Pasta o manteca de maní

Toxinas producidas por las especies del Género Penicillium y Aspergillus Ocratoxinas Derivadas de Isocumarina y L-Fenilalanina Alimentos contaminados: café vino

Ocratoxina A *) Producida principalmente por P. verrucosum y P. carbonarius (uvas) y A. ochraceus, A. niger. *) Nefrotóxicas y Hepatotóxicas, Enterotóxicas y Teratógenas para animales. *) Se ha clasificado como posible carcinógeno para humanos. *) Mostos de uva y Vinos (principalmente tintos). *) Codex Alimentarius propone que el vino es la segunda fuente de exposición a las OTA después de los cereales.

Patulina Efectos congestivos (pulmones, riñon y bazo) Degeneración neuronas Alimentos contaminados: manzanas jugos El Codex alimentarius estableces como límite: 50 μg/kg de patulina en el zumo de manzana,

Toxinas producidas por especies del género Fusarium Zearalenona Tricotecenos Fumonisinas Presentes en cereales pre y pos cosecha: maiz En frutas durante la refrigeración: manzanas F. graminearum F. culmorum

Inhiben la síntesis de proteínas Tricotecenos Inmunosupresores Inhiben la síntesis de proteínas Existen 45 compuestos de origen natural  DON y NIV son los más importantes Alimentos contaminados: trigo maíz

Fumonisinas Toxicidad variable según la especie Ocurrencia natural: FB1- FB2 - FB3 interfieren en el metabolismo de los esfingolípidos, asociadas al cáncer esofágico humano y la leucoencefalomalacia equina y el edema pulmonar porcino. Alimentos contaminados: maíz (a nivel mundial)

Zearalenona Estrogénica Alimentos contaminados: trigo maíz Lactona del Acido Resorcílico produce hiperestrogenismo y problemas reproductivos en el ganado y animales de experimentación. Alimentos contaminados: trigo maíz

Problematica en Argentina Trigo y sus productos: Tricotecenos (DON), Zearalenona Maiz y sus productos: Aflatoxinas, Fumonisinas, Tricotecenos, Zearalenona Mani y sus productos: Aflatoxinas Leche: Aflatoxina M1 Jugo de manzana: Patulina Vino: Ocratoxina Basilico J.C., CASLAN, 2004

Análisis de Micotoxinas  Obtención de una muestra representativa del lote Muestreo  Separar la micotoxina de compuestos insolubles en la sc. de extracción EXTRACCION  Separar la micotoxina de compuestos acompañantes en el extracto CLEAN-UP Extracción líquido- líquido Columnas pre-empacadas con silica gel, Florisil, intrecambio iónico (SPE) Columnas de Inmunoafinidad

 Concentrar la micotoxina que está en bajas concentraciones SEPARACION DETECCION Y DETERMINACION  Separar los componentes remanentes del extracto. Detección y medida de la respuesta (TLC, HPLC, CG). TLC HPLC

ESTADO ACTUAL DE LA METODOLOGÍA DE ANALISIS TLC: TECNICA DE PREFERENCIA EN PAISES EN DESARROLLO ECONÓMICAS, RÁPIDAS Y PRÁCTICAS PERMITE LA MULTIDETECCION NO PERMITE LIMITES DE DETECCION MUY BAJOS HPLC NO SON RAPIDAS Y SON CARAS EN POCOS CASOS PERMITEN LA MULTIDETECCION MUY BUENAS PURIFICACIONES MUY BAJOS LIMITES DE DETECCION ELISA directo e indirecto: existen kits de detección especialmente usados para aflatoxinas y M1 en leche Columnas de inmuno-afinidad: por unión a anticuerpos específicos