Bacterias Ramificadas Gram Positivas TM, Dr Luis Zaror U Mayor, sede Temuco 2011

ORDEN ACTINOMYCETALES ACTINOMICETOS AEROBIOS: MICOBACTERIAS GÉNERO NOCARDIA GÉNERO CORYNEBACTERIUM…. ACTINOMICETOS ANAEROBIOS FAMILIA ACTINOMYCETACEAE: GÉNERO ACTINOMYCES ACTINO = RAYO/FILAMENTO MYCETO = HONGO

Actynomyces sp. Bacilos Gram +,ramificados Capnófilos No capsulados Inmóviles Proteolíticos Microaerófilas/Anaeróbicas facultativas Factor de virulencia Fimbrias y adhesinas

Actinomyces  anaerobio estricto o facultativo  forma filamentos delgados  crece lentamente  infección crónica y lenta  coloniza TRS, TGI, genital femenino  Actinomicosis cervicofacial infeccion granulomatosa crónica, forma abscesos que fistulizan  Forma gránulos de azufre masas de filamentos de la bacteria + fosfato de calcio

RECOLECCION DE LA MUESTRA RECOLECCION DE LA MUESTRA Adecuada asepsia Adecuada asepsia Elegir la forma de recolección Elegir la forma de recolección  Aspirado  Biopsia de Tejido 65 % mal recolectadas 15% de sitios colonizados Behra-Miellet J. Anaerobe 2003;9:105

Género Actinomyces Flora normal boca y tracto digestivo Anaerobio- microaerófilo Incubación 4-10 días Necesitan medios ricos para crecer Bacilos Gram positivos ramificados en ángulos agudos

Actinomyces. Colonia

Género Actinomyces Colonias en forma de muela “gránulos de azufre” Filamentos de actinomyces rodeados de arginina y depósitos de fosfato cálcico

Actinomyces

Especies de Actinomyces A. israelii A. georgiae A. gerencseriae A. meyeri A. viscosus (animales y hombre) A. naeslundii A. odontolyticus….. Hasta 20 o más especies A. bovis(animales)

Gram Stain and Macroscopic Colonies of Actinomyces NOTE: Molar tooth appearance of colonies on agar can help remind us that the oral cavity is a common niche for Actinomyces.

Actinomyces Infections

Micetomas Constituem o grupo das infecções granulares que, além do aspecto clínico, tem, como denominador comum, a presença de grãos ou grânulos na secreção que flui das lesões fistulosas ou ulceradas.

MICETOMAS São classificados em dois grupos, conforme a etiologia: -Actinomicetomas causadas por bactérias (actino-micetomas) - Eumicetomas, maduromicose ou hifomicetomas, causadas por fungos (eumicetomas). * Botriomicose causada por outros gêneros de bactérias

Actinomicetomas Actinomicetoma endógeno - actinomicetos anaeróbios – Actinomyces israelii, A.viscosus, A.odontolyticus, Arachnia propionica Actinomicetomas exógena (Nocardiose) - actinomicetos aeróbios dos gêneros – Actinomadura madurae, A.pelletieri, Nocardia brasiliensis (80-90%), N.asteroides, N.caviae, Streptomyces somaliensis

Epidemiologia - micetomas Buot et al.(1987) no México, estudaram 502 casos de micetomas. – Maioria em homens de zona rural – actinomicetomas em 97,2% dos casos Nocardia brasiliensis, Actinomadura madural Streptomyces somaliensis e A. pelletieri – eumicetomas Madurella grisea, Acremoniun sp., Fusarium sp., Pseudallescheria boydii e Madurella mycetomatis

Patogenia de la actinomicosis Flora normal Alteración de la barrera mucosa Supuración crónica Fistulización Diseminación por contigüidad Diseminación hematógena Criptas amigdalinas, encías, caries Tracto gastrointestinal, tracto genital femenino Infección de la boca, extracción dental, mala higiene, trauma Abundantes PMN y escasos gránulos de azufre

Actinomicetoma cérvico-facial Germes penetram pela mucosa, após extração ou traumas dentários, fraturas de mandíbulas. Quando na mandíbula pode haver trismo Não há adenomegalia. Diagn. dif. Com paracococcidioidomicose, TBC. Pode ocorrer acometimento ósseo.

Actinomicosis: Formas clínicas 1. Cervico-facial Hombre adulto Periodo de incubación largo Origen dental unilateral Caries profunda Nódulo de crecimiento lento poco doloroso en ángulo submandibular Múltiples fístulas Osteomielitis del hueso maxilar Gránulo de azufre

Actinomicosis temporo-facial

Ex directo, pus absceso temporo-facial

Gránulo por Actinomyces

Forma torácica A infecção pulmonar pode-se originar de foco cervical, aspiracão oral (alcolatras) Quadro inicial com febre, tosse, expectoração e dispnéia. Induração na parede torácica, derrame pleural e drenagem através das fístulas com secreção purulenta e grãos típicos

Epidemiology of Actinomycosis REVIEW

Actinomicosis: Formas clínicas 2. Torácica: por aspiración. Forma abscesos pulmonares 3. Abdominal: por cirugía o trauma intestinal (Perforaciones, apendicitis) 4. Genital: portadoras de DIU 5. Diseminada: immunodeprimidos 6. Por mordedura humana (muy rara) Actinomyces viscosus/naeslundi - Caries - Inf. endodónticas - Periimplantitis Patología oral

Actinomicosis: diagnóstico Difícil Examen directo Exudado purulento: localizar el grano de azufre-> tinción de gram Biopsia: tinción de HE o Gram Cultivo Medios ricos, incubación en anaerobiosis > 7 días (muestra ideal granos de azufre)

Actinomicosis: tratamiento Drenaje quirúrgico del exudado purulento Tratamiento antibiótico durante varios meses (penicilina G a dosis altas/TTC) Curación: 90% de las formas cervicofaciales

Tratamento da Actinomicose Penicilina G, milhões de Unidades, via parenteral por 1-2 meses. Outros com tetraciclina, eritromicina, minociclina, clindamicina, rifampicina e cefalosporinas.

Género Nocardia Hábitat ambiental (Suelos), no es flora normal Aerobios estrictos Bacilos Gram positivos ramificados (se tiñen poco), con tendencia a fragmentarse Ácido resistentes (tinción de Kinyoun)

Especies de Nocardia Nocardia asteroides complex *** Nocardia brasiliensis Nocardia nova Nocardia farcinica……… Otras

Nocardia brasiliensis Aspecto macroscópico (40 dias) Anverso: elevado, progueado, seco e duro, amarelo tijolo, cheiro de terra molhada. Reverso: alaranjado

Hidrolisis de caseina

Patogenia de la nocardiosis Forma pulmonar Por inhalación de suelo o materia orgánica Immunodepresión de base (leucemia, transplantes, VIH, EPOC, diabetes...) Inflamación aguda múltiples abscesos diseminación cerebral Forma cutánea Inoculación directa por pinchazo con espina o astilla pústula micetoma con fístulas

Actinomicose exógena ou Nocardiose Bactérias que vivem no solo e vegetais. Inicia com pápula e nódulo que fistuliza e amolece. tumoração com inflamação que deforma a região anatômica. MMII, ainda menos frequentemente nos MMSS, tórax e abdome. Pode comprometer os ossos, músculos e tendões.

Nocardia brasiliensis

Micetoma por Nocardia asteroides. Muestra: Pus de fistulas o granos parasitarios. Gram, KOH, HE; PAS; Gomori Gram

Nocardiosis: formas clínicas Nocardiosis cutánea. Abscesos con trayectos fistulosos Micetoma. Absceso crónico que destruye tejidos blandos y hueso

Nocardiosis: formas clínicas Nocardiosis pulmonar. Se puede extender a pleura Múltiples abscesos Absceso cerebral. Metástasis de la forma pulmonar TAC Rx

Nocardiosis: diagnóstico Fácil. Abundantes bacilos Gram + ramificados o fragmentados en la lesión. Muestras: esputo, aspirado de pus Examen directo: Tinción de gram Tinción de ZN modificada o Kinyoun Cultivo. Crece en aerobiosis, en 2-5 días colonias arrugadas y pigmentadas

Nocardiosis: tratamiento Drenaje quirúrgico de las lesiones. Tratamiento antibiótico (sulfamidas) durante meses. Mortalidad alta: 10% en general y 80% en los abscesos cerebrales.

Tratamento da Nocardiose Diaminodiphenylsulfone (DDS) mg/dia, 6-24 meses SMT-TMP 2 x/dia Rifampicina 600mg/dia Minociclina 200mg/dia 1-2 anos Amoxiclina 500mg + Ac.clavulâmico 125mg, 3x ao dia, 6 meses

Gránulos y micetomas bacterianos

Micetomas y color de granos

Diferenças entre maduromicose e actinomicetoma A madurmicose tem tendênica à fibrose e pouca secreção, ao contrário da actinomicetoma, que é mais inflamatória e supurativa. Comprometem os ossos com osteosclerose e focos de osteólise

Nocardia. Identificación

Criterios de clasificación de las micobacterias Ritmo de crecimiento Producción de pigmentos en presencia/ ausencia de luz Tipo de parasitismo celular que determinan Principales cuadros clínicos que producen

Parásitos intracelulares estrictos M.leprae Lepra Parásitos intracelulares facultativos M.tuberculosis M.atípicas Lesiones cutáneas o afectaciones tuberculoides Saprofitos De vida libre en agua, suelo, piel, tracto GU. Clasificación Micobacterias por tipo de parasitismo

Características micobacterias ACIDO-ALCOHOL RESISTENCIA CONTENIDO LIPIDICO PARED AEROBIOS ESTRICTOS LENTA MULTIPLICACION INDUCCION GRANULOMAS RESISTENCIA ACIDOS/ALCALIS PIGMENTACION

Estructura pared celular micobacterias

Principales mecanismos destrucción micobacterias

Patogénesis de la tuberculosis

Patogénesis de la TBC Ac micólicos Sulfolípidos Proteínas pared Lipoarabinomanano Fijación a la superficie de los macrófagos alveolares Inhibición presentación de Ag por LT Modulación producción de citoquinas por LT Interferencia en las interacciones fagosoma- lisosoma en macrófago Resistencia a los mec. dependientes del O 2 ????????

3.Infección secundaria 2.Tuberculina +/Activación macrófagos 1.Infección primaria NeumoníaLinfáticos regionales Fibrosis/Calcificación Sangre Otras localizaciones Endógena: reactivaciónExógena: reinfección Necrosis y cavitación

Métodos diagnósticos Tinciones: 5x bacterias/ml (50- 70%) Cultivo: bacterias T. Amplificación: 1-10 bacterias Detección antígenos o componentes Detección respuesta inmune: R.I. celular (Mantoux o prueba de la tuberculina)

Tinción de Ziehl-Neelsen

T. Fluorescente Auramina-Rodamina

Mycobacterium tuberculosis

Tratamiento de la TBC: Asociación de fármacos Actividad diferente en las distintas poblaciones bacilares Bacteriostáticos - Bactericidas Desarrollo resistencias a un solo escalón/Prevenir resistencias Antibiograma

Epidemiología TBC Gran componente sociológico Reservorio: Hombre enfermo/Vacas (M. bovis)/Animales domésticos Transmisión: Inhalación núcleos goticulares contaminados Ingestión leche de vacas tuberculosas (M. bovis) Inoculación accidental (lecheros, personal laboratorio) Se suelen requerir contactos repetidos y estrechos

Profilaxis TBC Reservorio: Diagnóstico precoz de personas enfermas/ aislamiento y tratamiento Diagnóstico y sacrificio de ganado infectado Población susceptible: Quimioprofilaxis con isoniacida Vacunación con BCG

Grano oscuro de Madurella

Micetomas. Color de los granos