Función renal Docente Dra Telma Brich INSTITUTO UNIVERSITARIO DE CIENCIAS DE LA SALUD FUNDACIÓN HÉCTOR A. BARCELÓ CARRERA DE TÉCNICOS EN ANÁLISIS CLÍNICOS ASIGNATURA: ANÁLISIS CLÍNICOS II Función renal Docente Dra Telma Brich

Objetivos Conocer el funcionamiento renal. Importancia en la regulación del equilibrio hídrico, electrolítico y acido base. Alteraciones de la función renal. Determinaciones para evaluar la función renal. Metodología.

Función renal Remueve los productos de desecho.(Compuestos nitrogenados y ácidos)→Formación de orina Regula el equilibrio hidromineral (concentración y dilución de la orina). Regula el balance ácido (excreción de H+, conservación de HCO3-). Retención de nutrientes (Glucosa, Electrolitos, proteínas y agua)

Función renal Función humoral: Eritropoyetina.- Esta sustancia que actúa sobre células precursoras de la serie roja en la médula ósea, favoreciendo su multiplicación y diferenciación. Producción de eritrocitos Renina: Síntesis renina. Sistema renina-angiotensina →Respuesta a la hipoperfusión provocando vasoconstricción y reabsorción de sodio. Control de volumen intravascular y presión. Metabolismo de la vitamina D :Metabolito activo de la vitamina D, denominado 1,25 (OH)2 colecalciferol. Regulación del metabolismo del calcio. La regulación de la producción de Eritropoyetina (EPO) se realiza en base a los cambios que las variaciones del oxígeno producen en el llamado Factor Inducible por la Hipoxia (HIF).

Nefrón: Unidad funcional

Glomérulo Función: Ultrafiltración del plasma que pasa por los capilares glomerulares. Proceso pasivo: Se produce por diferencia de presión entre la presión oncótica (proteínas plasmáticas) y presión hidrostática.

Túbulos renales Túbulo Proximal: Reabsorción pasiva de H2O y solutos. Túbulo Distal: Reabsorción activa de Na+ que arrastra pasivamente H2O,interviene la Hormona Antidiurética (ADH o Vasopresina). Reabsorción activa de Na+ (y Cl-) y excreción K+ por activación bomba Na+/K+ (Aldosterona) Reabsorción de CO3H-, eliminación de NH4+ Reabsorción de Ca ( PTH) ADH HORMONA ANTIDIURETICA ORIGEN NEUROHIPOFISIS. ACTÚA SOBRE LOS CANALES DE ACUOPORINA ALDOSTERONA ORIGEN SUPRARENAL ACTUA SOBRE LA BOMBA NA/K REABSORBIENDO NA y (CL) Y ELIMINANDO K

Reabsorción H2O,calcio,fosforo, aminoácidos, glucosa, urea, K+ Filtración pasiva H2O Reabsorción activa de agua y Na+ (ADH) Reabsorción activa de Na+ y Cl- y excreción K+ (Aldosterona) Excreción de H+ (Acidificación) Reabsorción de CO3H- Reabsorción calcio (PTH))

Un repaso de metodologías fotométricas de análisis…

ESPECTROFOTOMETRIA Io It

390-435 435-490 490-580 580-595 595-650 650-780 Longitud de onda Color de luz que absorbe Color de luz que refleja 390-435 Violeta Amarillo verdoso 435-490 Azul Amarillo 490-580 Verde Rojo 580-595 595-650 naranja Azul verdoso 650-780 Verde azulado

A PUNTO FINAL B A CINETICA B A B ENZIMATICA A B A ACOPLADA XX B

PUNTO FINAL

CINETICA

Determinaciones de compuestos nitrogenados no proteicos

Creatinina CREATINA : compuesto nitrogenado no proteico importante para el metabolismo muscular: →almacenamiento como fosfato de alta energía :fosfocreatina. CREATININA : Producto final del metabolismo muscular. Anhídrido de la creatina que se forma mediante una reacción espontanea e irreversible. Su formación tiene una relación directa con la masa muscular. No se utiliza en el metabolismo del cuerpo, y funciona únicamente como producto de excreción de la creatina. La concentración de creatinina suele ser constante a diferencia de la urea que se ve influida por factores como el estado nutricional, hidratación y metabolismo proteico.

Métodología: Determinación de creatinina Método de Jaffé. CREATININA + ACIDO PICRICO COMPLEJO AMARILLO ROJIZO PH OH REACCIÓN COLORIMÉTRICA- PUNTO FINAL MEDICION FOTOMÉTRICA 510-520 nm Interferencia por proteínas: Desproteinización previa. CINETICA (Reacción rápida que elimina la interferencia de los acetoacetatos ) Se mide velocidad de formación de color: Directamente proporcional a la concentración de creatinina en la muestra. MEDICION FOTOMÉTRICA 510-520 nm

Curva de calibración de creatinina Variación Absorbancia/ Tiempo Concentración Mg/dl 0,3 0,5 1,0 1,5 2,0

Clearance de creatinina o Depuración de creatinina Método para evaluar la filtración glomerular. Mililitros /minuto filtrados. Muestra: Suero y orina de 24 hs. Determinaciones: Creatininemia y Creatininuria . Método : Jaffé Clearance de creatinina: Cr(o) x Volumen de 24hs Cr(s) x 1440 min/24 hs

Creatinina (suero): 1,4 mg/dl Creatinina (orina): 80 mg/dl Ejemplo: Creatinina (suero): 1,4 mg/dl Creatinina (orina): 80 mg/dl Volumen remitido: 2,130 l/24 hs Cl cre: 80 mg/dl x 2130 ml /24 hs 1,4 mg/dl x 1440 min/24 hs Cl creatinina: 85 ml/min Para un volumen de 1000 ml: Clcreat :40 ml/min

FILTRACION GLOMERULAR (ml/min)1,73m2 DESCRIPCION ESTADIO FILTRACION GLOMERULAR (ml/min)1,73m2 DESCRIPCION 1 >90 NORMAL 2 60-89 DESCENSO LEVE FG 3 30-59 DESCENSO MODERADO FG: IRC 4 15-29 DESCENSO SEVERO FG:IRC 5 <15 IRA FALLA RENAL DIALISIS

Estimación de la filtración glomerular Estimación usando la fórmula Cockcroft-Gault La fórmula Cockcroft-Gault puede emplearse para estimar el aclaramiento de creatinina, que a su vez estima el IFG:

Valores de referencia: Interferencias En el suero: Hemólisis , ictericia , lipemia. En orina: Acido ascórbico./Inadecuada recolección orina de 24 hs. Importante: Corrección por superficie corporal. Clcre(corregido): Clcre(calc)x1,73/0,007184 xPeso0,425 xAltura0,725 Mujer Hombre Suero 0,5-0,9 mg/dl 0,6-1,1 mg/dl Orina 740--1570 mg/24 hs 1040—2300 mg/24 hs Clearance de creatinina ( referido a superficie corporal 1,73 m2) 80-130 ml/min 95-137 ml/min

Urea Producto final del metabolismo de las proteínas. Se sintetiza en el hígado a partir del amoníaco derivado de la desaminación de aminoácidos. Prueba más utilizada para la evaluación de la función renal, combinada con la determinación de creatinina en diagnóstico diferencial entre enfermedad pre renal, renal y pos renal. RELACIONADA CON INSUFICIENCIA EN LA ELIMINACION: INDICADOR DE INSUFICIENCIA RENAL. Dependiente de la dieta

UREA PLASMATICA AUMENTADA UREA PLASMATICA DISMINUIDA DIETA HIPERPROTEICA DISMINUCION DE SINTESIS PROTEICA PERFUSIÓN RENAL INADECUADA NEFRITIS HIPOVOLEMIA GLOMERULONEFRITIS OBSTRUCCION DE VIAS URINARIAS ENFERMEDAD HEPATICA DESNUTRICION EMBARAZO ENFERMEDAD CELIACA

Metodologías determinación urea Reacción : 1° Paso: Enzimática con ureasa para convertir urea en NH4+ y CO2 . 2° Paso: a) Fenol/Hipoclorito→Azúl Colorimétrica. Medición fotométrica. Desarrollo de color directamente proporcional a la concentración de urea b) Oxoglutarato/NaDH(GLDH)→glutamato y NAD+ Velocidad con que disminuye el NADH es directamente proporcional a la concentración de urea. NADH COENZIMA PARA INTERCAMBIO DE ELECTRONES EN EL PROCESO REDOX

Ejemplo: UREA + 2H2O 2 NH4+ + CO32+ NH4 + OXOGLUTARATO + NADH L-GLUTAMATO+NAD + +H2O La velocidad con que disminuye NADH es directamente proporcional a la concentración de urea. REACCIÓN ENZIMÁTICA ACOPLADA-CINÉTICA MEDICIÓN FOTOMÉTRICA UV: 340nm UREASA GLDH DIF ABS VELOCIDAD concentración

DESARROLLO DE LA REACCION 3 2 1 TIEMPO

Acido Úrico Producto final del metabolismo de las purinas ( adenina, guanina e hipoxantina) procedentes del catabolismo de los ácidos nucleicos (ADN, ARN) por la enzima xantinooxidasa Las purinas proceden de: exógena => el consumo de proteínas de origen animal. endógenas => con la renovación celular. Diagnóstico y tratamiento de disturbios renales y metabólicos

Metodologías determinación acido úrico Los métodos se basan en la oxidación del ácido úrico. 1. Reducción de ácido fosfotungstico/medio alcalino a azul de tugsteno→Medición fotométrica. Interferencias por fármacos 2.Utilización de enzima uricasa para oxidar al ácido úrico: Medición del consumo de Ac úrico .Medición UV Combinación con otras enzimas. Desarrollo de color. Medición fotométrica

Ejemplo: Test enzimático colorimétrico ACIDO URICO + 2H2O +O2 ALANTOÍNA + CO2+H2O2 2H2O2 + 4 AMINO FENAZONA QUINONA DIIMINA+4H2O REACCIÓN ENZIMÁTICA-ACOPLADA-PUNTO FINAL Medición fotométrica: 546 nm Calibración lineal. URICASA PEROXIDASA ABS CONCENTRACION

Valores de referencia: Acido Urico Suero Hombre: 2,5-6,0 mg/dl Mujer: 2,0-5,0 mg/dl Orina 250-750 mg/dl VALORES AUMENTADOS SUERO VALORES DISMINUIDOS SUERO GOTA (DEPOSITO ARTICULACIONES) LEUCEMIAS (LISIS CELULAR) POLICITEMIA MIELOMA NEOPLASIAS ENF RENAL (ORINA ↓) HIPERTIROIDISMO AUMENTO DEL FILTRADO GLOMERULAR HEMODILUCIÓN ENFERMEDADES CONGÉNITAS(DEFICIENCIA DE XANTINOXIDASAS): SUERO Y ORINA FALLO REABSORCION TUBULAR : BAJO EN SUERO Y AUMENTO EN ORINA. HIPERURICEMIA: AUMENTO CONSUMO PURINAS, LISIS CELULAR LEUCEMIAS

Calcio y fosforo El calcio es el catión más abundante en el organismo y se almacena en el hueso como hidroxiapatita. Forma complejos con el fosfato. El calcio circula unido a proteínas transportadoras como la albúmina y se encuentra en forma soluble como calcio ionizado que es el metabolicamente activo( Aprox. 45 %) y se considera la medida real de la hipo e hipercalcemia. La hormona paratiroides (PTH),hipofisaria ,regula la reabsorción renal e intestinal. Los riñones desempeñan un rol fundamental en la homeostasis del calcio. En la IRC hay un trastorno en la excresión de fosfato produciendo hiperfosfatemia e hipocalcemia y disminución de la producción de vit D por el riñón ,disminuyendo el calcio absorbido.

Metodología Reacción colorimétrica punto final Ca2+ CRESOLFTALEINA COMPLEXONA COMPLEJO OCPC – CALCIO (ph alcalino) Reacción colorimétrica punto final Medición fotométrica longitud de onda 600 nm Determinación de calcio ionizado: Ion selectivo Valores de referencia: Suero 8,5-10,5 mg/dl Orina: 60-200 mg /24 hs HIPERCALCEMIA HIPOCALCEMIA NEOPLASIAS OSEAS HIPERPARATIROIDISMO HIPOPARATIROIDISMO DEFICIENCIA DE VIT D HIPOALBUMINEMIA SIND MALABSORCION INSUFICIENCIA RENAL

Pacientes con diuréticos, medicación con calcio, transfusiones. Interferencias Pre analíticas: Anticoagulantes que capturan calcio EDTA Heparina de calcio Extasis venoso Hemólisis En orina de 24 hs alcalinas (Acidificar antes de la determinacion para disolver sales) Otras variables: Pacientes con diuréticos, medicación con calcio, transfusiones.

Metodología Fosforo FOSFATO + MOLIBDATO DE AMONIO→FOSFOMOLIBDATO DE AMONIO (MEDIO ACIDO) REACCION COLORIMETRICA PUNTO FINAL MEDICION FOTOMETRICA LONGITUD DE ONDA 340 nm Valores de referencia: Suero: 3,0-4,5 ng/dl Orina : 0,3 1,0 g/24 hs AUMENTADO DISMINUIDO HIPOPARATIROIDISMO AUMENTO VIT D INSUFICIENCIA RENAL HIPERPARATIROIDISMO DEF REABSORCION RENAL DEFICIENCIA VIT D

Interés clínico INSUFICIENCIA RENAL AGUDA Aumento plasmático de productos nitrogenados: urea, creatinina y ácido úrico. Trastornos electrolíticos y acido base: sodio y magnesio, se produce acidosis metabólica y hiperpotasemia. Control de calcio y fosforo (hipocalcemia , hiperfosfatemia) En estos enfermos está indicado la diálisis para aumentar la tasa depuración renal y evitar la hiperpotasemia.   Prerenal: aumento de la perfusión renal Renal vasculitis, glomerulonefritis Post renal litiasis, prostatitis , adenama de vejiga.

Interés clínico INSUFICIENCIA RENAL CRONICA Es la disminución progresiva de la función renal. Las causa principales que la originan es la Diabetes mellitus y la hipertensión arterial también enfermedades sistémicas como lupus, vasculitis, mieloma. GLOMERULONEFRITIS En su forma típica se produce por infecciones streptococcicas. Se produce una estimulación multifactorial del sistema inmune que repercute en la membrana del glomérulo y el tejido renal →→inflamación. Determinaciones para seguimiento y control: Urianálisis, proteinuria, depuración de creatinina. Caracterización de la enfermedad: FAN-ADNA-Complemento.