DETERMINACIÓN DE BIOMARCADORES EN EL MELANOMA METASTÁSICO XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014.

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1 DETERMINACIÓN DE BIOMARCADORES EN EL MELANOMA METASTÁSICO XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014

2 XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014 Mutación genética consistente en la sustitución de una timina por adenina en la posición 600, que conlleva a la sustitución de valina por ácido glutámico, lo que da lugar a la activación permanente de las proteínas BRAF, las cuales actúan promoviendo la proliferación celular en ausencia de los factores de crecimiento que normalmente son requeridos para la proliferación. La mutación V600E, incrementan la actividad kinasa de BRAF entre 130 y 700 veces.

3 XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014 Vía de señalización intracelular MAPK (protein cinasa activada por mitógenos). Incluya cuatro cinasas: RAS, RAF, MEK y ERK. La más frecuente as la B-RAF que ocurre en el 50 % de los casos

4 XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014

5 Senescencia celular. Aumenta la expresión de inhibidores de la cinasa 4A ( INK4A ) Mutación adicional en los genes supresores: -PTEM. -CDKN2A Mutación B-RAF

6 XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014  Melanomas cutáneos sin daño solar crónico con exposición intermitente solar: es el grupo más frecuente.  Melanomas cutáneos con daño solar crónico.  Melanoma de mucosas.  Melanomas acrales. CLASIFICACIÓN MOLECULAR DEL MELANOMA

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9 XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014 9/II/2012 5/IX/2012

10 XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014 12/VI/2012 11/IX/2012

11 N Engl J Med 366;8. february 23, 2012

12 Lesiones escamoso-proliferativas Queratosis actínica y Carcinoma epidermoide XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014

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15 Los inhibidores del BRAF, no inician ni promueven la carcinogénesis, aunque sí aceleran el crecimiento de las lesiones escamosas en pacientes con mutaciones en HRAS, pudiendo detenerse este crecimiento utilizando inhibidores de MEK.

16 XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014

17 Rodríguez-Peralto JL, et al. Recomendaciones para la determinación de biomarcadores en el melanoma metastásico. Consenso Nacional de la Sociedad Española de Anatomía Patológica y de la Sociedad Española de Oncología Médica. Rev Esp Patol. 2013.

18 La hematoxilina-eosina, debe de ser represenativa de la lesión. Dado que la integridad de los ácidos nucleicos se pierde con el tiempo en los tejidos parafinados, conviene elegir la muestra más reciente. Escoger bloque con poco pigmento melánico, ya que la melanina es capaz de inhibir las enzimas ácido desoxirribobucleico ADN-polimerasas.

19 3 y 5 secciones de 5 micrómetros, en tubos o laminillas (37 ± 2 ºC toda la noche o 56 ± 2 ºC durante 30´). La extracción de los ácidos nucleicos, no debe demorarse más de 48 horas. ( conservar en nevera a 2-8 ºC ) Utilizar guantes desechables, cuchilla desechable nueva. Limpiar la superficie de trabajo y el microtomo con una disolución descontaminante de proteasas ( 10% lejía y 70 % de etanol ), después aplicar agua libre de nucleasas y secar con toalla de papel.

20 Macrodisección, para seleccionar la mayor parte de tumor viable. Desestimar tejido normal, zonas de necrosis y de hiperpigmentación melánica.

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22 XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014

23 -HETEROGENICIDAD. - PÉRDIDA DE EXPRESIÓN. - ADQUISICIÓN DE NUEVAS MUTACIONES ESTUDIO DE LA MUTACIÓN EN LAS METÁSTASIS.

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25 XLIV REUNIÓN DE LA ASOCIACIÓN TERRITORIAL DE LA REGIÓN DE MURCIA Cartagena 24 de octubre de 2014

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27 GSK Diagnóstico Molecular es la plataforma web de GSK para la gestión de muestras, determinación diagnóstica de la mutación BRAF V600E y V600K y obtención de resultados en breve espacio de tiempo. www.gsk-diagnostico-molecular.es

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33 -LA DETERMINACIÓN DE LA MUTACIÓN BRAF DEBE DE REALIZARSE A PETICIÓN DEL CLÍNICO, EN TODOS LOS MELANOMAS SUSCEPTIBLES DE SER TRATADOS CON INHIBIDORES DE BRAF: * MELANOMA METASTÁSICO. * MELANOMA METASTÁSICO. * MELANOMA AVANZADO. * MELANOMA AVANZADO. - LA DETERMINACIÓN DE LA MUTACIÓN DEBE DE REALIZARSE EN LABORATORIOS ACREDITADOS, BAJO LA SUPERVISIÓN DE UN PATÓLOGO.