Cocos Gram Negativo Neisseria spp

Presentación del tema: "Cocos Gram Negativo Neisseria spp"— Transcripción de la presentación:

1 Cocos Gram Negativo Neisseria spp
M. Paz Microbiología UMG-2014

2 Familia Neisseriaceae
Géneros Neisseria Patógenos humanos Kingella Eikenella Simonsiella Alysiella

3 Género Neisseria Único reservorio: ser humano Dos especies patógenas
N. gonorrhoeae Gonorrea N. meningitidis Meningitis epidémica/meningitis meningocóccica Muchas especies no patógenas habitantes del tracto respiratorio.

4 Género Neisseria Neisser (1879) Leistikow & Loeffler (1882)
Describió al agente causal de la gonorrea Leistikow & Loeffler (1882) Cultivo por primera vez Weichselbaum (1887) aisló a N. meningitidis de LCR de un paciente con meningitis purulenta endémica, epidémica y meningococcemia estado de portador

5 Género Neisseria: Morfología
Aerobios Cocos Gram Negativo No móviles Crecen en parejas No formadores de esporas Los cocos individuales son pequeños (0.8 x 0.6 µm) Tienen forma de riñón (lados planos adyacentes) Citoplasma y pared celular son similares entre las dos especies y similitud de ADN de 70%

6 Género Neisseria: Morfología
Pared celular: tiene una capa densa y una membrana externa Meningococos: tienen cápsula de polisacáridos y pocos plásmidos Gonococos: no cápsula y sí contienen plásmidos Ambas especies forman colonias convexas, brillantes y mucoides de 1-5 mm. Medios de crecimiento: agar chocolate y CO2 al 5%

7 Características de cultivo
Crecen mejor en condiciones aeróbicas. La mayoría oxidan carbohidratos, producen ácido pero no gas. Producen oxidasa. Susceptibles a ácidos grasos y a metales traza contenidos en la peptona y en el agar (se contrarresta con sangre, suero, almidón o carbón) El agar “chocolate” es más adecuado

8 Características de cultivo
Baja Resistencia a condiciones físicas y químicas Sufren autólisis Susceptibles a desecación Oxidasa (+) Oxidan rápidamente DPD o TPD (dimetil o tetrametil para fenilendiamina) Produce un color de rosado a negro en las colonias

9 Género Neisseria: Metabolismo
Organismo Crece en agar sin sangre Crece a 22°C Oxida Glucosa Oxida Maltosa Oxida Sacarosa N. meningitidis - + N. gonorrhoeae

10 Neisseria meningitidis

11 Neisseria meningitidis
Usualmente habita en la nasofaringe sin causar síntomas (microbiota transitoria) Desde la nasofaringe acceden a la sangre y causan meningococcemia Complicación: meningitis Meningococcemia grave: fulminante, fiebre elevada y exantema hemorrágico, CID y colapso circulatorio (Waterhouse-Friderichsen)

12 Patogenicidad y virulencia de
N. meningitidis Mediada por los pili Colonización específica de receptor de las células no ciliadas de la nasofaringe Cápsula antifagocítica de polisacárido que le permite diseminarse en ausencia de inmunidad específica. Efectos tóxicos mediados por hiperproducción de lipooligosacárido Serogrupos A, B, C, Y, W135 responsables de 90% de todas las infecciones

13 Patogenicidad y virulencia
Receptores para las fimbrias bacterianas (gangliósido GD1) sobre las células columnares epiteliales no-ciliadas en la nasofaringe del hospedero. Los m.o. son internalizados en vacuolas fagocíticas, evitando la muerte intracelular. Replicación intracelular y migración al espacio subepitelial donde libera fragmentos de membrana. Hiperproducción de endotoxina (lípido A) y se disemina al ambiente circundante (espacios subepiteliales, torrente sanguíneo): causa la mayoría de manifestaciones clínicas de daño vascular: daño endotelial, vasculitis, trombosis, CID.

14

15 Epidemiología Diseminación persona-persona vía aerosolización de secreciones respiratorias Más alta incidencia en niños menores de 5 años, personas institucionalizadas y pacientes inmunodeficientes Meningitis y meningococcemia: serogrupos B y C Neumonía: serogrupos Y y W135 Infecciones en países subdesarrollados: serogrupo A Mayor incidencia en las épocas frías y secas del año en todo el mundo (Se presenta en ondas)

16 Diagnóstico Muestras: LCR, sangre y aspirados petequiales
Frote de Gram: difícil cuando hay pocos m.o (centrifugar y obtener sedimento para la tinción) Cultivo: en agar chocolate o TM en jarra con candela a 37C Identificación: Oxidasa y pruebas de oxidación de carbohidratos

17

18 Cultivo Medio selectivo de Thayer Martin
Agar chocolate con Vancomicina (inhibe a Gram +), Colistina (inhibe a Gram -), Nistatina (inhibe hongos) y Trimetoprim (inhibe a Proteus spp que ocasiona swarming) Las colonias requieren horas para crecer. Medio alternativo: Agar Lewis Martin agar (similar al TM, pero usa anisomicina en lugar de nistatina, para inhibir mejor a Candida albicans).

19 Cultivo en jarra con candela

20 Cultivo de N. meningitidis

21 Enfermedades asociadas con Neisseria meningitidis
Después de la diseminación de organismos virulentos de la nasofaringe: Meningitis Septicemia (meningococcemia) con o sin meningitis Meningoencefalitis Neumonia Artritis Uretritis

22

23 Infecciones por MGC Síntomas: fiebre alta, escalofríos, dolor muscular y rash petequial (típico de infecciones por MGC) Enfermedad puede ser crónica, moderada o fulminante.   Tipo fulminante: Síndrome de W-F con CID, hemorragia dentro de la piel, glándulas adrenales y otros órganos. Muerte rápida por la toxemia generalizada y el shock.

24 Rash Petequial

25 Síndrome de Waterhouse-Friderichsen

26 Prevención y Tratamiento
Inmunidad pasiva por lactancia Droga de elección: penicilina Drogas alternativas: cloranfenicol, ceftriaxona y cefotaxima. Quimioprofilaxia para contactos: rifampicina o sulfadiazina Inmunoprofilaxia: vacuna (no efectiva para el serogrupo B)

27 Prevención y Tratamiento
Vacunas de polisacárido conjugado para niños menores de 2 años (18 meses). Serogrupos A, C, Y y W-135 No se muy inmunogénica ni confiere inmunidad prolongada Vacuna conjugada con el toxoide diftérico Autorizada para años

28

29 Neisseria gonorrhoeae

30 Neisseria gonorrhoeae
Único hospedero natural: humano Portador asintomático es el mayor reservorio. Edad más afectada: años Patogenia: gonorrea Uretritis Cervicitis

31 Generalidades de Neisseria gonorrhoeae
Fácilmente transmitido por contacto sexual Diplococos Gram-negativo achatados por el lado de unión. Fastidiosos, capnofílicos y susceptibles a temperaturas frías, a la desecación y a ácidos grasos. Requiere medios pre-calentados complejos El medio debe llevar almidón soluble para neutralizar la toxicidad de los ácidos grasos Crece mejor en atmósfera húmeda suplementada con CO2 Produce ácido de la oxicación de glucosa, pero no de otros azúcares.

32 Diagnóstico, tratamiento y prevención
Tinción de Gram es precisa en muestras masculinas. Cultivo: diagnóstico definitivo Biología molecular Tratamiento: Cefixima, Ceftriaxona, Ciprofloxacina y ofloxacina en casos no complicados. Penicilina debe evitarse porque ya se presenta mucha resistencia. Doxiciclina y Azitromicina en casos complicados con Chlamydia sp. Profilaxia de conjuntivitis neonatal: nitrato de plata 1% Prevención: educación (ETS) NO HAY VACUNA

33 Crecimiento de GC enMTM

34 Oxidasa positivo

35 Prueba de Oxidasa en placa

36 Prueba de Oxidasa en papel

37 Identificación Bioquímica
Para diferenciar entre las especies de Neisseria y B.  catarrhalis. Pruebas de utilización de carbohidratos. Oxidación de Carbohidratos Se usa un Agar Cistina-Triptosa (CTA) con azúcares. Requiere una inoculación grande e incubación sin CO2 y observación por horas. Resultados: GC: + para glucosa solamente

38 Azúcares en CTA

39 Epidemiología de la Gonorrea
Serio subregistro Diferencia epidemiológica entre hombres y mujeres Mayor reservorio: portador sintomático Transmisión sexual No hay inmunidad protectora para la reinfección (en parte por la diversidad antigénica de las cepas) Mayor riesgo de enfermedad diseminada en pacientes inmunocomprometidos.

40 Mujeres Hombres Riesgo post-exposición (1 contacto) es de 50%
Frecuentemente asintomática y sin dx Mayoría: sintomático (95%) Principal reservorio es la portadora asintomática Infección genital primariamente en el cervix, pero también son colonizados la vagina, la uretra y el recto. Infección genital restringida a la uretra con descarga purulenta y disuria Infecciones ascendentes en 10-20%: salpingitis, abscesos tubo-ováricos, enfermedad inflamatoria pélvica, infertilidad por infección crónica. Complicaciones raras: epididimitis, prostatitis y abscesos periuretrales. Infecciones diseminadas más comunes: septicemia, infección de la piel y articulaciones (1-3%) Infecciones diseminadas muy raras Puede infectar al infante durante el parto: conjuntivitis, oftalmia neonatorum Más común en hombres homosexuales/bisexuales que en la población heterosexual

41 Patogenia de Neisseria gonorrhoeae
Bacterias fimbriadas se adhieren al epitelio de la membrana mucosa intacta N. gonorrhoeae tiene capacidad de invadir membranas intactas o piel con abrasiones. Adherencia al epitelio mucoso Penetración y multiplicación antes de pasar a través de las células epiteliales de la mucosa Establecimiento de la infección en la capa subepitelial Sitios más comunes de inoculación: Cervix (cervicitis) o vagina en la mujer Uretra (uretritis) o pene en el hombre

42 Factores de virulencia asociados a Neisseria gonorrhoeae

43 Gonorrea

44 Ophthalmia neonatorum

45 Significancia clínica del GC
Infecciones complicadas Ocurren más frecuentemente en mujeres Diseminación del cérvix a las trompas de falopio Endometritis Salpingitis Peritonitis (EIP) Ocurre en 10-20% de mujeres infectadas Síntomas: dolor abdominal bajo, flujo cervical y vaginal anormal, útero blando. Puede resultar en infertilidad o en embarazo ectópico.

46 Salpingitis

47 GONOCOCCEMIA Presencia de N. gonorrhoeae en el torrente sanguíneo que puede llevar al desarrollo de una infección gonocóccica diseminada (IGD). Ocurre en aprox 0.5-3% de pacientes con gonorrea.

48 Manifestaciones clínicas
Cuadro bifásico: Fase temprana Tenosinovitis Artralgias Dermatitis Fase localizada Artritis séptica Complicaciones: osteomielitis, meningitis, endocarditis, síndrome de dificultad respiratoria y shock séptico fatal

49 Pacientes a riesgo Mujeres embarazadas o menstruando
Personas con inmunodeficiencias Deficiencia de complemento Enfermedad por VIH Lupus Eritematoso Sistémico

50 Fisiopatología Diseminación del gonococo desde un sitio primario como el endocérvix, la uretra, la faringe o el recto hacia la sangre y luego a un órgano final. Usualmente son infectados múltiples sitios Articulaciones y piel Depende de cambios fisiológicos del paciente y de factores de virulencia del GC

51 Cambios fisiológicos Cambios en el pH vaginal Edad con más incidencia:
Menstruación Embarazo Puerperio Edad con más incidencia: Hombres con años Mujeres de años

52 Factores de virulencia
Pili y fimbrias: adherencia a las superficies mucosas Evasión de la fagocitosis Proteínas de membrana externa (P1, P2 y P3) Lipooligosacárido (LOS): resistencia a la bacteriólisis Cepas productoras de Proteasas de IgA ayudan a la supervivencia del GC en las mucosas

53 Diagnóstico diferencial
Manifestaciones cutáneas de hepatitis Meningococcecia Artritis reactiva Artritis psoriática Sífilis Dermatitis (acanthosis nigricans)

54 Diagnóstico Recuento de leucocitos: Leucocitosis
VSE: medianamente elevada Cultivo positivo: usualmente de sitios de mucosas: faringe, uretra, cérvix o recto. Los hemocultivos son negativos en su mayoría (sólo 20-30% son +) Métodos moleculares (PCR)

55 Tratamiento Hospitalización para tratamiento inicial
Antibióticos intravenosos por horas Luego se cambia a terapia oral. Terapia empírica inicial: cefalosporinas de tercera generación –ceftriaxona- Cambio a Penicilina G o ampicilina si es susceptible.

56 Moraxella catarrhalis

57 Moraxella catarrhalis
Diplococo gram-negativo Aerobio y oxidasa positivo Ha sido objeto tanto de cambios en la nomenclatura y clasificación taxonómica como de su consideración de comensal o patógeno. Actualmente, es aceptado como el tercer patógeno más importante en el tracto respiratorio humano después de Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae. En los últimos 20 años, esta bacteria ha emergido como un importante patógeno causante de infecciones en el tracto respiratorio superior de niños y ancianos, e infecciones del tracto respiratorio inferior en adultos con enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC). Aproximadamente, el 90% de las cepas son productoras de ß-lactamasas.

58 Moraxella catarrhalis
Micrococcus catarrhalis Neisseria catarrhalis En 1970, basándose en la diferencia en el contenido de ácidos grasos y mediante estudios de hibridación de ADN se demostró la escasa homología que existía entre N. catarrhalis y las llamadas "verdaderas" especies de Neisseria, estando, más cercana al género Acinetobacter. Así pues, fue reclasificada y transferida al género Moraxella

59 Moraxella catarrhalis
Actualmente, el género Moraxella engloba cocos y bacilos cortos relacionados genéticamente Bovre propone su división en dos subgéneros: Branhamella, que englobaría los cocos y Moraxella para los bacilos cortos. Algunos autores prefieren el nombre de Branhamella catarrhalis Las otras especies de Moraxella son bacilos cortos, mientras que M. catarrhalis son diplococos M. catarrhalis es un importante patógeno del tracto respiratorio humano, mientras que las especies de Moraxella rara vez causan infección en humanos.

60 Patogenia de Moraxella catarrhalis
En niños: Otitis media Sinusitis Bacteremia Meningitis En adultos: exacerbaciones en pacientes con EPOC neumonía en ancianos infecciones nosocomiales.

61 Factores de virulencia de Moraxella catarrhalis
LOS (Lípido A) Peptidoglucano Proteínas de la membrana externa Fimbrias Cápsula Proteínas reguladores del hierro Resistencia al complemento

62 Diagnóstico de Moraxella catarrhalis
Muestras clínicas: Gram, Cultivo y pruebas bioquímicas Crece en medios comunes, como agar sangre y agar chocolate, Colonias redondas, opacas, convexas y de color gris. Los criterios más usados para su identificación son los siguientes: Ausencia de pigmentación en agar sangre (no hemolítica). Producción de oxidasa y catalasa. Producción de DNAasa. Hidrólisis de la tributirina. Ausencia de producción de ácido a partir de glucosa, maltosa, sacarosa y fructosa. Reducción de nitratos y nitritos.

63

64 Tratamiento de Moraxella catarrhalis
Las cepas de M. catarrhalis son uniformemente sensibles a las quinolonas, amoxicilina-clavulánico, cefalosporinas, ticarcilina, piperacilina, macrólidos, cloranfenicol y aminoglucósidos. Se han comunicado casos aislados de cepas resistentes a las tetraciclinas, eritromicina, fluoroquinolonas, macrólidos, piperacilina y a algunas cefalosporinas