Cocos Gram Negativo Neisseria spp & Moraxella sp

Presentación del tema: "Cocos Gram Negativo Neisseria spp & Moraxella sp"— Transcripción de la presentación:

1 Cocos Gram Negativo Neisseria spp & Moraxella sp
M. Paz Microbiología UMG-2011

2 Género Neisseria Único reservorio: ser humano Dos especies patógenas
N. gonorrhoeae Gonorrea N. meningitidis Meningitis epidémica/meningitis meningocóccica Muchas especies no patógenas habitantes del tracto respiratorio.

3 Género Neisseria Neisser (1879) Leistikow & Loeffler (1882)
Describió al agente causal de la gonorrea Leistikow & Loeffler (1882) Cultivo por primera vez Weichselbaum (1887) aisló a N. meningitidis de LCR de un paciente con meningitis purulenta endémica, epidémica y meningococcemia estado de portador

4 Género Neisseria: Morfología
Aerobios Cocos Gram Negativo No móviles Crecen en parejas Ocasionalmente en tétradas o racimos No formadores de esporas Los cocos individuales son pequeños (0.8 x 0.6 µm) Algunas veces: formas bizarras (autólisis) Citoplasma y pared celular son similares entre las dos especies.

5 Género Neisseria: Morfología
Pared celular: tiene una capa densa y una membrana externa Meningococos: tienen cápsula de polisacáridos Gonococos: no cápsula Formas coloniales: (gonococos) T1 y T2: colonias pequeñas y virulentas pili T3 y T4: colonias más grandes: avirulentas No pili

6 Género Neisseria: Metabolismo
Organismo Crece en agar sin sangre Crece a 22°C Oxida Glucosa Oxida Maltosa Oxida Sacarosa N. meningitidis - + N. gonorrhoeae

7 Características de cultivo
Difíciles de cultivar Son susceptibles a ácidos grasos tóxicos y a metales traza que están contenidos en la peptona y en el agar (se contrarresta con sangre, suero, almidón o carbón) El agar “chocolate” es más adecuado Ambas especies patógenas sufren rápida autólisis. Enzimas autolíticas se inactivan a 65°C por 30 min o agregando cianuro de potasio o formalina.

8 Características de cultivo
Resistencia a condiciones físicas y químicas es extremadamente baja Susceptibles a desecación Mueren a 55°C por 30 min Atmósfera de crecimiento 5-10% de CO2 (jarra con candela) Oxidasa (+) Oxidan rápidamente DPD o TPD (dimetil o tetrametil para fenilendiamina) Produce un color de rosado a negro en las colonias

9 Neisseria meningitidis

10 Neisseria meningitidis
Usualmente habita en la nasofaringe sin causar síntomas Segunda causa de meningitis epidémica (adquirida en la comunidad) en adultos previamente sanos. Cambio muy rápido de estado de sano a enfermo de gravedad Causa también meningococcemia

11 Características generales de N. meningitidis
Patogenicidad y virulencia Mediada por los pili Colonización específica de receptor de las células no ciliadas de la nasofaringe Cápsula antifagocítica de polisacárido que le permite diseminarse en ausencia de inmunidad específica. Efectos tóxicos mediados por hiperproducción de lipooligosacárido Serogrupos A, B, C, Y, W135 responsables de 90% de todas las infecciones

12 Epidemiología: Hospedero natural: humano Diseminación persona-persona vía aerosolización de secreciones respiratorias Más alta incidencia en niños menores de 5 años, personas institucionalizadas y pacientes inmunodeficientes Meningitis y meningococcemia: serogrupos B y C Neumonía: serogrupos Y y W135 Infecciones en países subdesarrollados: serogrupo A Mayor incidencia en las épocas frías y secas del año en todo el mundo

13 Diagnóstico y Tratamiento
Tinción de gram de LCR (difícil cuando hay pocos organismos) Dx definitivo: cultivo m.o. fastidioso y muere rápidamente en condiciones de frío y sequedad. Tx, prevención y Control: Inmunidad pasiva por lactancia Droga de elección: penicilina y alternativamente: cloranfenicol, ceftriaxona y cefotaxima. Quimioprofilaxia para contactos: rifampicina o sulfadiazina Inmunoprofilaxia: vacuna (no efectiva para el serogrupo B) Vacunas de polisacárido conjugado con proteínas transportadoras para niños menores de 2 años.

14 Cultivo Se usa un medio selectivo para recuperar al meningococo y al gonococo. Cuando está en un ambiente contaminado con otras bacterias de la microbiota normal. Medio selectivo de Thayer Martin Agar chocolate con Vancomicina (inhibe a Gram +), Colistina (inhibe a Gram -), Nistatina (inhibe hongos) y Trimetoprim (inhibe a Proteus spp que ocasiona swarming) Ocasionalmente hay cepas de GC sensibles a la vancomicina, por lo que siempre debe usarse el agar chocolate también. Las colonias requieren horas para crecer. Medio alternativo: Agar Lewis Martin agar (similar al TM, pero usa anisomicina en lugar de nistatina, para inhibir mejor a Candida albicans).

15 Cultivo en jarra con candela

16 Cultivo de N. meningitidis

17 Enfermedades asociadas con Neisseria meningitidis
Después de la diseminación de organismos virulentos de la nasofaringe: Meningitis Septicemia (meningococcemia) con o sin meningitis Meningoencefalitis Neumonia Artritis Uretritis

18 Infecciones por MGC Meningococcemia:
Síntomas: fiebre alta, escalofríos, dolor muscular y rash petequial (típico de infecciones por MGC) Enfermedad puede ser crónica, moderada o fulminante.   Tipo fulminante: Síndrome de Waterhouse-Friderichsen caracterizado por CID, hemorragia dentro de la piel, glándulas adrenales y otros órganos. Muerte rápida por la toxemia generalizada y el shock. La mayoría de los síntomas son debidos a la actividad de endotoxina.

19 Rash Petequial

20 Síndrome de Waterhouse-Friderichsen

21 Curso de la enfermedad meningocóccica
Receptores para las fimbrias bacterianas (gangliósido GD1) sobre las células columnares epiteliales no-ciliadas en la nasofaringe del hospedero. Los m.o. son internalizados en vacuolas fagocíticas, evitando la muerte intracelular. Replicación intracelular y migración al espacio subepitelial donde libera fragmentos de membrana. Hiperproducción de endotoxina (lípido A ) y se disemina al ambiente circundante (espacios subepiteliales, torrente sanguíneo): causa la mayoría de manifestaciones clínicas de daño vascular: daño endotelial, vasculitis, trombosis, CID.

22 Neisseria gonorrhoeae

23 Neisseria gonorrhoeae
Único hospedero natural: humano Portador asintomático es el mayor reservorio. Edad más afectada: años Patogenia: gonorrea Uretritis Cervicitis

24 Generalidades de Neisseria gonorrhoeae
Fácilmente transmitido por contacto sexual Diplococos Gram-negativo achatados por el lado de unión. Fastidiosos, capnofílicos y susceptibles a temperaturas frías, a la desecación y a ácidos grasos. Requiere medios pre-calentados complejos El medio debe llevar almidón soluble para neutralizar la toxicidad de los ácidos grasos Crece mejor en atmósfera húmeda suplementada con CO2 Produce ácido de la oxicación de glucosa, pero no de otros azúcares.

25 Diagnóstico, tratamiento y prevención
Tinción de Gram es precisa en muestras masculinas. Cultivo: diagnóstico definitivo Biología molecular Tratamiento: Cefixima, Ceftriaxona, Ciprofloxacina y ofloxacina en casos no complicados. Penicilina debe evitarse porque ya se presenta mucha resistencia. Doxiciclina y Azitromicina en casos complicados con Chlamydia sp. Profilaxia de conjuntivitis neonatal: nitrato de plata 1% Prevención: educación (ETS) NO HAY VACUNA

26 Crecimiento de GC enMTM

27 Oxidasa positivo

28 Prueba de Oxidasa en placa

29 Prueba de Oxidasa en papel

30 Identificación Bioquímica
Para diferenciar entre las especies de Neisseria y B.  catarrhalis. Pruebas de utilización de carbohidratos. Oxidación de Carbohidratos Se usa un Agar Cistina-Triptosa (CTA) con azúcares. Requiere una inoculación grande e incubación sin CO2 y observación por horas. Resultados: GC: + para glucosa solamente

31 Azúcares en CTA

32 Epidemiología de la Gonorrea
Serio subregistro Diferencia epidemiológica entre hombres y mujeres Mayor reservorio: portador sintomático Transmisión sexual No hay inmunidad protectora para la reinfección (en parte por la diversidad antigénica de las cepas) Mayor riesgo de enfermedad diseminada en pacientes inmunocomprometidos.

33 Mujeres Hombres Riesgo post-exposición (1 contacto) es de 50%
Frecuentemente asintomática y sin dx Mayoría: sintomático (95%) Principal reservorio es la portadora asintomática Infección genital primariamente en el cervix, pero también son colonizados la vagina, la uretra y el recto. Infección genital restringida a la uretra con descarga purulenta y disuria Infecciones ascendentes en 10-20%: salpingitis, abscesos tubo-ováricos, enfermedad inflamatoria pélvica, infertilidad por infección crónica. Complicaciones raras: epididimitis, prostatitis y abscesos periuretrales. Infecciones diseminadas más comunes: septicemia, infección de la piel y articulaciones (1-3%) Infecciones diseminadas muy raras Puede infectar al infante durante el parto: conjuntivitis, oftalmia neonatorum Más común en hombres homosexuales/bisexuales que en la población heterosexual

34 Patogenia de Neisseria gonorrhoeae
Bacterias fimbriadas se adhieren al epitelio de la membrana mucosa intacta N. gonorrhoeae tiene capacidad de invadir membranas intactas o piel con abrasiones. Adherencia al epitelio mucoso Penetración y multiplicación antes de pasar a través de las células epiteliales de la mucosa Establecimiento de la infección en la capa subepitelial Sitios más comunes de inoculación: Cervix (cervicitis) o vagina en la mujer Uretra (uretritis) o pene en el hombre

35 Factores de virulencia asociados a Neisseria gonorrhoeae

36 Gonorrea

37 Ophthalmia neonatorum

38 Significancia clínica del GC
Infecciones complicadas Ocurren más frecuentemente en mujeres Diseminación del cérvix a las trompas de falopio Endometritis Salpingitis Peritonitis (EIP) Ocurre en 10-20% de mujeres infectadas Síntomas: dolor abdominal bajo, flujo cervical y vaginal anormal, útero blando. Puede resultar en infertilidad o en embarazo ectópico.

39 Salpingitis

40 Moraxella catarrhalis

41 Moraxella catarrhalis
Diplococo gram-negativo Aerobio y oxidasa positivo Ha sido objeto tanto de cambios en la nomenclatura y clasificación taxonómica como de su consideración de comensal o patógeno. Actualmente, es aceptado como el tercer patógeno más importante en el tracto respiratorio humano después de Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae. En los últimos 20 años, esta bacteria ha emergido como un importante patógeno causante de infecciones en el tracto respiratorio superior de niños y ancianos, e infecciones del tracto respiratorio inferior en adultos con enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC). Aproximadamente, el 90% de las cepas son productoras de ß-lactamasas.

42 Moraxella catarrhalis
Micrococcus catarrhalis Neisseria catarrhalis En 1970, basándose en la diferencia en el contenido de ácidos grasos y mediante estudios de hibridación de ADN se demostró la escasa homología que existía entre N. catarrhalis y las llamadas "verdaderas" especies de Neisseria, estando, más cercana al género Acinetobacter. Así pues, fue reclasificada y transferida al género Moraxella

43 Moraxella catarrhalis
Actualmente, el género Moraxella engloba cocos y bacilos cortos relacionados genéticamente Bovre propone su división en dos subgéneros: Branhamella, que englobaría los cocos y Moraxella para los bacilos cortos. Algunos autores prefieren el nombre de Branhamella catarrhalis Las otras especies de Moraxella son bacilos cortos, mientras que M. catarrhalis son diplococos M. catarrhalis es un importante patógeno del tracto respiratorio humano, mientras que las especies de Moraxella rara vez causan infección en humanos.

44 Patogenia de Moraxella catarrhalis
En niños: Otitis media Sinusitis Bacteremia Meningitis En adultos: exacerbaciones en pacientes con EPOC neumonía en ancianos infecciones nosocomiales.

45 Factores de virulencia de Moraxella catarrhalis
LOS (Lípido A) Peptidoglucano Proteínas de la membrana externa Fimbrias Cápsula Proteínas reguladores del hierro Resistencia al complemento

46 Diagnóstico de Moraxella catarrhalis
Muestras clínicas: Gram, Cultivo y pruebas bioquímicas Crece en medios comunes, como agar sangre y agar chocolate, Colonias redondas, opacas, convexas y de color gris. Los criterios más usados para su identificación son los siguientes: Ausencia de pigmentación en agar sangre (no hemolítica). Producción de oxidasa y catalasa. Producción de DNAasa. Hidrólisis de la tributirina. Ausencia de producción de ácido a partir de glucosa, maltosa, sacarosa y fructosa. Reducción de nitratos y nitritos.

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48 Tratamiento de Moraxella catarrhalis
Las cepas de M. catarrhalis son uniformemente sensibles a las quinolonas, amoxicilina-clavulánico, cefalosporinas, ticarcilina, piperacilina, macrólidos, cloranfenicol y aminoglucósidos. Se han comunicado casos aislados de cepas resistentes a las tetraciclinas, eritromicina, fluoroquinolonas, macrólidos, piperacilina y a algunas cefalosporinas