Métodos de estudio de enfermedades óseas Algunas consideraciones sobre la Biopsia ósea Prof. Dr. Julio Carzoglio Cátedra de Anatomía Patológica

Biopsia ósea Examen macroscópico Piezas de resección ósea Sólo fragmentos aislados Es necesario informar el sitio de origen Cuando se toman de diferentes sitios el cirujano debe identificar procedencia de cada uno Piezas de resección ósea

Mixoma G.P.B., mujer, 27 años Dr. Kertesz

Biopsia ósea Piezas de resección ósea Documentación RX y fotográfica Corte con sierra a 3-5 mm Mapeado de la lesión Fijación en formol al 10 %, si es posible tamponado (buffer) Tiempo de fijación de 12 horas (adecuado para IHQ) Muestras pequeñas de hueso esponjoso: Líquido de Bouin (fija y decalcifica suavemente)

Mixoma M.A., mujer, 46 años Dra. S. Vázquez

Recidiva de QQO M.T.J., hombre, 25 años Dr. Acosta

Osteosarcoma JC 03-4635

Tumor de células gigantes

Biopsia ósea Decalcificación ósea Sol de ácido nítrico al 5 % Volumen de solución: 10-20 veces el volumen del tejido El ácido es neutralizado por el Ca++ por lo cual debe ser cambiado 2 veces al día Conviene utilizar agitador de tejidos

Biopsia ósea Para obtener buena coloración Lavar bien el ácido con agua corriente Con este método es imposible valorar la cantidad y cualidad de la mineralización ósea Para valorar la mineralización ósea se requiere inclusión en plástico (metil-metacrilato) Para M.E.: fijación en paraformaldehido o glutaraldehido Decalcificación con EDTA

Biopsia ósea Tinciones Colágeno: Proteoglicanos se demuestra con tricrómico (técnica de Van Gieson o Masson) Microscopía de luz polarizada Proteoglicanos Alcian blue Azul de toluidina PAS

Actividad osteoblástica

Actividad osteoclástica

Ameloblastoma uniquístico marsupializado

Sarcoma óseo

Displasia fibrosa

Biopsia ósea Tinciones Componentes minerales Micro-radiografía de tejido Solo en material no desmineralizado Rojo alizarin (tiñe de rojo el Ca++ de la hidroxiapatita) Von Kossa: negro el fosfato de Ca++ y otras sales de Ca++ (carbonato, oxalato)

Von Kossa Goldner

Biopsia ósea Estudios histoenzimáticos de osteoblastos y osteoclastos fosfatasa alcalina fosfatasa ácida tartrato-resistente en tejidos “no fijados” IHQ: para estudios de diferentes tipos de colágeno y para identificación de tumores El material desmineralizado es adecuado

Tumor fusocelular

Tumor de células fantasmas calcificante (Gorlin sólido)

Tricrómico de Masson Citoqueratina AE1/3

Biopsia ósea Marcación fluorescente con tetraciclina Los niveles marcados reflejan la interfase de hueso mineralizado-osteoide

Biopsia ósea Biopsia intraoperatoria Dos razones: Diagnóstico preliminar Evaluar adecuación del especimen para estudio ulterior Limitación: tejido calcificado Utilidad en valoración de márgenes de tejidos blandos Determinación entre metástasis, inflamación o necrosis (en lesiones líticas, blandas)

Biopsia ósea Si se plantean estudios moleculares Hibridización in situ Reacción en cadena de polimerasa (PCR) No se puede desmineralizar el material Los AANN son degradados por la decalcificación