ANEMIA Y METODOS DIAGNOSTICOS MED. PAT. CLIN. GLORIA YALE CAJAHUANCA DIRECTORA DE DIRECCIÓN DE LABORATORIOS DE SALUD PÚBLICA DISA II LIMA SUR

Anemia: Definición (OMS) “… Disminución de nivel de Hb en sangre “  Nivel de Hb “normal” definido en función de edad, sexo, raza, a.s.n.m… Hb (g/dl) Hto (%) VCM (fl) HCM(pg) # Eritros RN (término) 14 54 107 34+5 5.6x10*12 Niños de 3m 95 38 92+6 30+4 4x10*12 Niños 1año 11 40 78+8 26+4 4.4x10*12 Niños 1-12a 12 85+8 27+3 4.8x10*12

Anemia: VALORES REFERENCIALES NORMALES Mujeres Hb (g/dl) Hto (%) 12-14.9 11.8 35.5 15-17.9 12 36 >18años Hombres 12.3 37 12.6 38 13.6 41

Hemoglobina La hemoglobina es una proteína que contiene hierro y que le otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada del transporte de oxígeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. La hemoglobina también transporta el dióxido de carbono, que es el producto de desecho del proceso de producción de energía, lo lleva a los pulmones desde donde es exhalado al aire.

Anemia: Causas mas comunes por rango de edad Niños Ferropenia Talasemias Drepanocitosis Esferocitosis Hereditaria Enzimopatías (G6PD) Leucemia Aplasia pura de SR congénita Eritroblastopenia transitoria del niño Adultos Ferropenia Enfermedad crónica IRC Deficiencia de folatos o Vit-B12 Esferocitosis Hereditaria SMD Mieloptisis Aplasia Hoffman; Hematology: Basic Principles and Practice; 4ª ed.,Elservier: Parte IV

DEFECTO EN LA SINTESIS DE MEMBRANAS DEL ERITROCITO: Eliptocitosis Congénita

CAUSAS DE ANEMIA Disminución en la producción de eritrocitos Déficit de hierro, folatos y/o vitamina B12 (desnutrición) Defectos en el estimulador primario: Eritropoyetina Aplasia medula ósea y padecimientos malignos Por destrucción acelerada Hemolisis autoinmune Hemólisis mecánica Hemolisis por deficiencia en su estructura y composición (membrana, Hb o enzimas del eritrocito) Por pérdida o hemodilución Sangrado traumático, quirúrgico, patológico Embarazo, deshidratación, etc.

Los hemoglobinómetros son equipos usados para la práctica de la hemoglobinometría, consisten en un fotómetro pre calibrado portátil, Funciona con pilas y/o corriente alterna. Utilizan microcubetas compatibles con cada equipo dependiendo de la marca y modelo, Determinan la hemoglobina fundamentándose en el método de la azidametahemoglobina.

METODOS DE DIAGNOSTICO POR LABORATORIO: HEMOGLOBINOMETROS PORTATILES Es un equipo que tiene un filtro incorporado y una escala calibrada para realizar lecturas directas de la hemoglobina en g/dL .Se basan por lo general en el método planteado por Vanzetti (1966) o de la azidametahemoglobina.

Requerimientos Básicos: Materiales Microcubeta compatible con el hemoglobinómetro Cubeta control, si corresponde Lanceta retráctil o dispositivos de punción o incisión Alcohol etílico (etanol) 70º Guantes de látex no estériles Una cubierta para el área de trabajo Torundas de algodón Venditas autoadhesivas Papel absorbente recortado en rectángulos de 5 cm x 6 cm aproximadamente Bolsas rojas de bioseguridad para residuos sólidos biocontaminados Recipiente rígido de plástico o polipropileno

Método de la azidametahemoglobina Nitrito de sodio convierte el hierro de la hemoglobina del estado ferroso al estado férrico para formar metahemoglobina. Membrana de los eritrocitos son desintegradas por el desoxicolato de sodio, liberando a la hemoglobina. se combina con la azida de sodio para formar la azidametahemoglobina Luego la microcubeta es leída en hemoglobinómetro. Absorvancia de 565 y 880 nm

Ejemplos de Hemoglobinometros Portatiles

NUEVO METODO NO INVASIVO

Métodos Colorimétricos con Espectrofotómetros En primer lugar el Fe2+ de la hemoglobina, en presencia de ferricianuro potásico, se oxida a Fe3+, dando lugar a la metahemoglobina. en presencia de cianuro potásico, la metahemoglobina pasa a cianmetahemoglobina. Éste es un compuesto estable, de color rojo Membrana de los eritrocitos son desintegradas por el desoxicolato de sodio, liberando a la hemoglobina. Luego es leída en hemoglobinómetro. Absorvancia de 540 nm

Métodos Colorimétricos con Espectrofotómetros

Equipos automatizado para medición de hemoglobina •Gran Demanda de pacientes para estas pruebas en el EESS • Poca disponibilidad de personal para el laboratorio clínico • Incremento de la carga laboral • Necesidad de un mejor tiempo de respuesta. • Necesidad de mayor confiabilidad Ventajas Debido a que las determinaciones de hemoglobina se realizan a partir de una dilución y en una cámara de reacción separada, no existe ninguna interferencia por conteos altos de leucocitos, lipemia o proteínas anormales. Además los equipos automatizados pueden medir diferentes pruebas adicionales como, hematocrito, conteo de leucocitos, plaquetas, etc

Serie Roja: LA HERRAMIENTA MAS POTENTE Y MAS USADA: CITOMETRIA HEMATICA CON HISTOGRAMA Serie Roja: Parámetros medidos: Eritrocitos, Millones/mm3 Hemoglobina (g/dL) Hematocrito (%) Volumen Corpuscular Medio VCM (fL) Parámetros calculados: HCM (pg): Hb / G.R. CMHC (g/dL): Hb / Hto.

MEDICION DEL NUMERO Y VOLUMEN DE ERITROCITOS POR LUZ LASER Separación y análisis célula por célula mediante luz laser Generación de “sombra” y cálculo de tamaño Desviación de luz laser por complejidad (rugosidad) de la superficie de la célula, característico de cada eritrocito y leucocito Generación de histograma tridimencional (scatergrama) 10o 0o

Citometría Hemática normal Hb, Hto, G.R. Vol Globular Medio Normales. Indices eritrocíticos normales (HCM, MCHC y RDW)

OTROS EXAMENES ANORMALIDADES LAS ANEMIAS Clínica: General de las anemias. Por hemolisis hay esplenomegalia e ictericia Estudio de M.O.: Hiperplasia medular Laboratorio: En sangre periférica: Bitometría Hemática Reticulocitosis Hierro, Transferrina Ferritina Electroforesis de Hb Prueba de la fragilidad osmótica Prueba de Coombs Estudio de enzimas eritrociticas G6PD y PK

Medición de la Eritropoyesis: Reticulocitos Vida media del eritrocito aprox 100 días. Cada día se destruye el 1 % de nuestra sangre, por lo tanto, la tasa de reposición es del 1 % (0.5 a 1.5 %). - Los eritrocitos son nucleados en etapa inmadura (M.O.). Al salir a sangre periférica, pierden el núcleo por extrusión. - Durante su maduración en la médula ósea tienen actividad de síntesis de proteínas (Hb) y por lo tanto, tienen RNA en su citoplasma. - Al perder el núcleo cuando salen de la M.O., no pierden el RNA que se tiñe con azul de cresilo y evidencia a los reticulocitos, que son una expresión porcentual de la actividad de M.O..

Causas de Hemólisis por Hb agregantes: Anemia Drepanocítica (Hb S) La Hemoglobina tiene la propiedad de conferir al eritrocito, una plasticidad y capacidad de deformación. - Las Hemoglobinas diferentes a la normal, confieren una menor plasticidad celular, y al pasar por el sistema micro-angiopático, HEMOLISARAN (hemolisis intravascular microangiopática) - Algunas otras hemoglobinas anormales, se precipitan bajo niveles disminuidos de oxígeno o temperatura, induciendo la hemólisis.

Electroforesis Normal Hemoglobina AA Clasificación de las Hemoglobinas Anormales por su movilidad electroforética Electroforesis Normal Hemoglobina AA Electroforesis Anormal Hemoglobina AFS