AVANCES EN EL DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO DE SEPSIS Dr. Marcelo Grijalva, M.D., Ph.D. 20132012 _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

MORBILIDAD Y MORTALIDAD En EEUU hospitalizaciones por sepsis/septicemia (por 100.000 habitantes): 221 (2001), 377 (2008) Riesgo de mortalidad a 5 años mayor al doble que controles en hospitalización Mortalidad por sepsis severa (sepsis + disfunción orgánica) aprox. 30% Ecuador (2011), 1375 reportes, mortalidad 35.4% _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

Overview _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

Microbiology _______________________________________________________ www.biosciences.bham.ac.uk _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

_______________________________________________________ www.biografix.de _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

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ESTRATEGIAS DIAGNOSTICAS MARCADORES BIOLOGICOS PCT, CRP, IL-1β, IL-6, LPS-LBP, TREM-1 TECNICAS MICROBIOLOGICAS HEMOCULTIVO GOLD STANDARD LIMITACIONES _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

MARCADORES BIOLOGICOS PCT: Varios años en uso, aprobado por FDA para riesgo en admisión en UCI, perfil cinético favorable. CRP: De uso común para screening de sepsis neonatal , baja especificidad para sepsis en adultos. _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

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Metaanálisis HC vs multiplex PCR (23 estudios hasta el año 2013) _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

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DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - HCAM PCR en Tiempo Real multiplex multisonda + análisis Tm, capacidad cuantitativa para discriminación de posibles contaminantes. 25 patógenos en panel, cobertura 90% de patógenos causantes de bacteremia/fungemia. Laboratorio BSL -2 Norma de bioseguridad WHO 2010 Cabinas de bioseguridad Clase II, extracción robotizada de ácidos nucleicos _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - HCAM SeptiFast MGRADE (Roche) en pacientes con sospecha de sepsis (2012-2013) 424 pacientes, procedencia cuidados intensivos Positividad global: SF 38%, HC: 20% Positividad GS compuesto: 45% Concordancia (+/- y especie): 70.4% _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - HCAM _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - PERSPECTIVAS Aumento de sensibilidad analítica de ensayos moleculares – DNA genómico humano? CXXC finger protein 1 en cromatografía. Significado biológico de DNAemia Cinética de DNAemia Marcadores moleculares de resistencia antimicrobiana? _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - PERSPECTIVAS . “Omics”: PCR+ LC-MS, “transcriptomic profiling”. Paneles de marcadores moleculares Identificación de patógenos y evaluación de respuesta del huésped _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA MEDICA – ESPE AREA DE MATEMATICAS - UCE HOSPITAL CARLOS ANDRADE MARIN UCI UCI Neonatal UCI Pediatría Servicio de Infectología Laboratorio de Bacteriología ROCHE APPLIED SCIENCE LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA MEDICA – ESPE AREA DE MATEMATICAS - UCE _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR  

2010 2013

GRACIAS _______________________________________________________ INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR