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DIAGNOSTICO MOLECULAR
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DIAGNOSTICO ENFERMEDADES GENETICAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS
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DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES GENETICAS
Detección del gen responsable: ausencia del gen defecto causado por deleción defecto causado por una mutación puntual defecto causado por translocación defecto causado por incremento de trinucleótidos repetitivos
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DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS
I. Detección directa del agente etiológico - detección visual por microscopio cultivo del agente patogénico Problemas / Desventajas : Algunos parásitos son morfológicamente indistinguibles entre sí escondidos entre los tejidos baja sensibilidad patógenos dificiles de cultivar, contaminación de los cultivos con hongos toma mayor tiempo para que crezcan los patógenos en cultivo.
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II. Detección indirecta por presencia de anticuerpos
Problemas / Desventaja - no discrimina infección presente o pasada - reacciones cruzadas (por determinantes antigénicos compartidos por diferentes microorganismos)
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DIAGNOSTICO MOLECULAR
- Detección de algún componente o molécula del patógeno: DNA, RNA o Proteína. Se considera como diagnóstico directo. Actualmente son los sistemas de diagnóstico con mayor especificidad, mayor sensibilidad, y mayor rapidez.
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SISTEMA DE DIAGNOSTICO TRADICIONAL
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Conventional diagnosis methods
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Diagnóstico Molecular
Ribotyping Restriction fragment length polymorphism (RFLP) DNA hybridization PCR, RT-PCR, RAPD Secuenciamiento de ácidos nucleicos
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DIAGNOSTICO MOLECULAR : Tres niveles
Prenatal Pre-sintomático En tiempo real (monitoreo)
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DIAGNOSTICO MOLECULAR : Tres niveles
I. Prenatal : enfermedades hereditarias Predisposición genética – sospecha clínica II. Pre-sintomático: (Dx. temprano) Enfermedad infecciosa (fase temprana) Predisposición a Enfermedades como el cancer, autoinmunes, degenerativa, transtornos afectivos (historia clinica familiar)
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III. En tiempo real (monitoreo):
Características del patógeno (identificación, virulencia, resistencia a drogas) Estado inmunológico (carga antigénica, o cantidad de anticuerpos) Estado de la enfermedad (detección de marcadores) Monitoreo al tratamiento: marcadores, respuesta al tratamiento, resistencia, etc…
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Gel Electrophoresis
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Southern Blot Analysis
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Acido nucleico inmovilizado
Sonda marcada Acido nucleico inmovilizado
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RFLP GGATCC CCTAGG
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Diagnóstico molecular de Anemia Falciforme:
Hb A Pro - Glu - Glu CCT-GAG-GAG Hb S Pro - Val - Glu CCT GTG GAG La enzima de restricción MstII reconoce la secuencia CCTNAGG
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RFLP + DNA hybridization
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Hibridación In situ
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Fundamentos, Variantes & Aplicaciones
PCR Fundamentos, Variantes & Aplicaciones
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DIAGNOSTICO MOLECULAR EN EL FUTURO
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