RESULTADOS INTRODUCCION OBJETIVO PACIENTES Y METODOS CONCLUSIONES

Presentación del tema: "RESULTADOS INTRODUCCION OBJETIVO PACIENTES Y METODOS CONCLUSIONES"— Transcripción de la presentación:

1 RESULTADOS INTRODUCCION OBJETIVO PACIENTES Y METODOS CONCLUSIONES
Diagnóstico Genético Molecular de Síndrome de Xq-Frágil. Estado actual y proyecciones. Pizarro L¹.,Alliende M.A¹.,Curotto B ¹., Toro J¹., Codriansky Y ¹., Cortés F ¹.,Troncoso L² ². 1 Laboratorio de Genética y Enfermedades Metabólicas, Instituto de Nutrición y Tecnología de los Alimentos (INTA), Universidad de Chile. 2 Hospital Clínico San Borja Arriarán, Servicio de Neuropsiquiatría Infantil. INTRODUCCION RESULTADOS Se revisan resultados obtenidos en el período descrito. 444 análisis referidos con diagnóstico de SXF o RM ligado al X, 35% de ellos (155) fueron realizados por CDAF+ Southern Blot y 65% (289) por PCR, de ellos ( 237) tienen estudio cromosómico con cariotipo. Las tablas I , II y III, resumen los resultados. El Retraso Mental (RM) afecta al 2% de la población, a pesar de los avances científicos un porcentaje 40-60% de los pacientes permanece sin etiología específica. Del total de pacientes 30 a 40% corresponden a causas genéticas monogénicas y multifactoriales, alteraciones cromosómicas y reordenamientos crípticos. La heterogeneidad fenotípica y genética dificulta el diagnóstico y se ha focalizado la evaluación etiológica en grupos específicos, especialmente RM ligado al cromosoma X (XLMR), basado en la mayor frecuencia de RM en varones. El XLMR se ha dividido clínicamente en sindrómico y no sindrómico. Existen más de 150 formas de XLMR sindrómico descritas y al menos 70 genes identificados como causa de ellos, adicionalmente en otras 50 formas, se ha identificado la región del cromosoma X involucrada. El sindrome de Xq-Frágil (SXF) es la afección más frecuente y conocida entre las formas sindrómicas, el fenotipo característico dirige la búsqueda clínica y el clonamiento del gen FMR1 en familias afectadas ha permitido la identificación de los individuos con SXF. En los últimos años es conocida la expansión del fenotipo a FXTAS (Temblor y ataxia) y FXPOF(Falla ovárica precoz). En Chile se realiza diagnóstico desde Tabla I. Exámenes de Laboratorio realizados en el estudio etiológico de os pacientes Exámenes realizados Número de pacientes Cariograma medio deficiente de ácido fólico 236** Southern Blot + CDAF 155 Cariograma + PCR 237 PCR 52 TOTAL 444 **No se suman al total de casos revisados Tabla II: CARIOGRAMA ALTERADO NO CONCLUYENTE Ausencia de producto amplificado HOMBRES NORMAL PARA SXF Producto amplificado de 488 – 632 pb Análisis directo gen FMR1 por método SOUTHERN BLOT MUJERES PCR CARIOGRAMA + Fig.1: Paciente con SXF Fig.2: Sitio de fragilidad Xq27.3 OBJETIVO Evaluar resultados de 7 años de diagnóstico genético molecular de SXF en Laboratorio de Citogenética (INTA) y establecer la necesidad de desarrollar otras metodologías de investigación de causas de RM ligado al X. Protocolo Estudio Alliende y cols. Rev. Médica de Chile 2008. PACIENTES Y METODOS 50%= 47,XXY(4); 47,XYY( 4); 48, XXXY(1). C Revisión retrospectiva de los estudios genéticos referidos para descartar SXF, realizados a través de cariograma en medio deficiente de ácido fólico (CDAF) más Southern Blot, desarrollados entre Enero 2001 y Abril 2005, y análisis realizados por técnica de PCR asociada o no a cariograma , realizadas entre Abril 2005 a Junio 2008. La técnica de PCR realizada se desarrolla según método de Haddad y cols.1996. Tabla III: Casos positivos con ambas técnicas. PERÍODO Nº Pacientes SXF Casos Indices Familiares SXF Enero Abril 2005 ** 13 Abril Junio 2008 TOTAL Estructura locus FRAXA en Xq27.3 CONCLUSIONES MUTACIÓN COMPLETA El cariograma y PCR optimizan el diagnóstico etiológico de RM y SXF en varones, concordante con reportes extranjeros. El Southern Blot es esencial en pacientes de sexo femenino (mutaciones / premutaciones). El alto porcentaje de pacientes que resultan negativos para esta investigación causal de RM (84%) justifican la necesidad de investigar y desarrollar metodologías de investigación que involucren otros genes más recientemente descritos como causantes de RM. 200 PRE MUTACION CpG 60 N 3’ 5’ FMR - 1 ( CGG )n