La importancia del Laboratorio de Biología Molecular

Presentación del tema: "La importancia del Laboratorio de Biología Molecular"— Transcripción de la presentación:

1 La importancia del Laboratorio de Biología Molecular
Hepatitis Virales La importancia del Laboratorio de Biología Molecular Bioquímico Alejandro Kuc Servicio de Inmunología Hospital “Dr. Julio C. Perrando”

2 Virus de la Hepatitis C Bioq. Alejandro Kuc *Servicio de Inmunología
Hospital “Dr. Julio C. Perrando” *Cátedra Virología Clínica FaCENa - UNNE

3 HCV Agente etiológico de las HNANB transmitidas por transfusiones
Flia: Flaviviridae Género: hepacivirus Esférico Envuelto ARN (+) sc

4 evasión de la respuesta inmune
Genoma capside Proteina de cubierta proteasa/helicasa RNA polimerasa 5’ URT 3’ URT core E1 E2 NS2 NS3 NS4 NS5 región hipervariable evasión de la respuesta inmune 7 7 7

5 Variabilidad Genética
Genotipo: >70% identidad 6 hasta ahora Subtipo: > 90% Cuasiespecie: Intraindividuo En Argentina: 1a: 39% 1b: 33% 2a: 19% 3a: 7%

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7 Hepatitis por virus C Vías de transmisión Intrafamiliar 0-2%
Percutánea 90-50% Vertical 5 % ¿Desconocido? 5%

8 Vías de transmisión Exposición a sangre o fluidos contaminados
Transmisión vertical: madre-recién nacido Depende de la carga viral (> 2 x 10 6 copias/ml)‏ Aumenta en coinfección HIV-HCV Lactancia materna: no contraindicada Transmisión horizontal: exposición percutánea o de las membranas mucosas al material infectado

9 Hepatitis C – Datos Clínicos
Periodo de Incubación: Media 6-7 sem Clínica (ictericia): % Hepatitis crónica (HCV RNA>6 meses): 70-85% Manif. Extrahepáticas: % Inmunidad: No Anticuerpos protectores 8 8 9 8

10

11 Historia natural INFECCIÓN 10 años Hepatitis crónica 15 años Cirrosis
Hepatocarcinoma

12 Infección Aguda

13 Infección Crónica

14 Patrones de Viremia

15 14 14 14 15

16 Diagnóstico de Laboratorio
Anticuerpos Anti-VHC: F(-) en la fase aguda y en inmunosuprimidos. VENTANA: 7-8 semanas. EIA o RIA: Screening. S: 98,8-100% RIBA o LIA: Ensayo suplementario para confirmar. E: 100% Antígeno VHC - mediante EIA: Acorta el período de ventana en el screening RNA-VHC: Cualitativo: Puede utilizarse para diagnosticar la infección por VHC en la fase aguda. Cuantitativo (Carga Viral): Para monitorizar la respuesta a la terapia antiviral Genotipificación

17 Marcadores durante la infección temprana
HCV RNA Anti-HCV 12 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Infection Day 0 HCV RNA Day 12 HCV Antibody Day 70

18 NAT Cualitativa Acorta el período de Ventana: baja de 2 meses a 1-2 semanas Importante en Bancos de Sangre Accidentes transfusionales: 1/ a 1/ Control posterapéutico Dx de Hepatitis Aguda

19 NAT Cuantitativa (Carga Viral)
Pronóstico de evolución y respuesta al Tto La carga viral basal Curva viral (4 y 12 sem) Indica el cese del tratamiento No esta relacionada directamenete con riesgo de transmisión sexual ni nivel de daño hepático

20 Genotipificación Predice la respuesta al Tto y la duración del mismo
Determina la dosis de Ribavirina Genotipos 2 y 3 responden mejor y mas rápido que 1

21 Genotipificación Secuenciación es el Gold Standard
5’ 3’ core E1 E2 NS2 NS3 NS4 NS5 Secuenciación es el Gold Standard Amplificación de secuencias genotípicas especificas + RFLP Core 5´URT NS5 Hibridación Reversa (INNO-LiPA HCV, Innogenetics) Serotipifiación de genotipos (MurexTM HCV Serotyping 1 Assay)

22 Algoritmo Diagnóstico

23 Accidentes tranfusionales y avance diagnóstico

24 Importancia de la BM en el Seguimiento y Tratamiento

25

26 Hepatitis C Oculta HCV erradicada: HCV RNA (-) >24 sem de terminado el Tto Pero se observo que 40-45% de estos pacientes pueden tener HCV RNA detectable en biopsias Hep o Celulas mononucleares de Sangre circulante

27 Hepatitis por virus c Profilaxis. No se dispone de vacuna
(gran variabilidad genómica del virus)‏ No se dispone de gamma globulina

28 Profilaxis de la Hepatitis C
Screening de donantes de sangre y órganos Modificación de conductas de riesgo Precauciones con la sangre y fluidos corporales 15 15 28 15