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IDENTIFICACIÓN DE GENOMAS VIRALES
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AMPLIFICACIÓN DEL ÁCIDO NUCLEICO - PCR
94 ºC DESNATURALIZACIÓN DEL ADN 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 55-60 ºC ADHESIÓN DE LOS PRIMERS 5´ 3´ 5´ 5´ 3´ 72 ºC EXTENSIÓN (La Taq. polimerasa agrega nucleótidos) 3´ 5´ 5´ 3´ 3´ 5´
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TERMOCICLADOR AQUÍ SE REALIZAN LOS 3 PASOS DE AMPLIFICACIÓN DEL DNA:
1.- DESNATURALIZACIÓN DEL DNA 2.- PEGADO DE LOS PRIMERS 3.- EXTENSIÓN DE LAS CADENAS DE DNA ESTE PROCESO SE REPITE 30 A 40 VECES
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ARMADO DEL GEL DE AGAROSA PARA VISUALIZACIÓN POR
ELECTROFORESIS DE LOS PRODUCTOS DE LA PCR Agregado de Bromuro de etidio en el gel
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Siembra de las muestras
Se cubre el gel con buffer de corrida Siembra de las muestras
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Lectura en el transiluminador
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TECNICAS DE BLOTEO o TRANSFERENCIA:
Southern blot Northern blot Western blot Papel absorbente Membrana de nylon gel Papel absorbente Membrana de nylon Hibridación con sondas marcadas (ácidos nucleicos) Agregado de anticuerpos marcados (proteínas) Las bandas que aparecen corresponden al ácido nucleico o a las proteínas buscadas
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