Electroforesis capilar

Presentación del tema: "Electroforesis capilar"— Transcripción de la presentación:

1 Electroforesis capilar

2 Ventajas de la electroforesis capilar
Alta resolución (105 a 106 platos teóricos)-HPCE Requiere pequeño volumen de muestra (1-10 nl) Rápida separación (1 a 45 min.) Aplicable a todo tipo de sustancias Automatización Cuantificación (lineal) Reproducibilidad Puede acoplarse a espectrometría de masa Datos fundamentales

3 Esquema de equipo de CE

4 Tipos de moléculas que pueden ser separadas por CE
Proteínas Péptidos Amino ácidos Ácidos nucleicos Iones inorgánicos Bases orgánicas Ácidos orgánicos

5 Condiciones de CE Se utilizan altos voltajes 10-30kV.(>500V/cm; mA) Moléculas positivas, negativas o neutras puede separarse. La separación se realiza en un tubo capilar de sílica fundida cubierta con poliamida para darle flexibilidad. El tubo capilar tiene cm. De longitud y m de diámetro interno. Los grupos hidroxilos de la sílica se disocian dejando el tubo con una carga negativa.

6 Tubo capilar de sílica con grupos OH expuestos

7 Flujo electroendosmótico

8 Migración

9 Movilidad en CE m = v/E = Q/ 6prh

10 Criterio de separación
Modalidad Criterio de separación Sustancias EC de zona (CZE) Densidad de carga Moléculas pequeñas, péptidos, proteínas, DNA pequeño. Electroenfoque pl Péptidos, proteínas. Cromatografía micelar electrocinética capilar (MECC) Densidad de carga y coeficiente de reparto en las micelas, según la hidrofobicidad Moléculas pequeñas, péptidos, DNA. EC en gel Desnaturalizante No desnaturalizante Masa molecular Tamaño y densidad de carga. Péptidos, proteínas, DNA

11 Surfactantes en MECC

12 Inyección de la muestra