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¿Qué recordamos de todo esto?. Enzimas de restricción y otras enzimas. Clonación de un fragmento de DNA (plásmidos, fagos, cósmidos y YAC´s). PCR Southern-blot.

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Presentación del tema: "¿Qué recordamos de todo esto?. Enzimas de restricción y otras enzimas. Clonación de un fragmento de DNA (plásmidos, fagos, cósmidos y YAC´s). PCR Southern-blot."— Transcripción de la presentación:

1 ¿Qué recordamos de todo esto?

2 Enzimas de restricción y otras enzimas. Clonación de un fragmento de DNA (plásmidos, fagos, cósmidos y YAC´s). PCR Southern-blot e hibridación con sondas. Secuenciación. Técnicas básicas clásicas

3 ¿Enzimas? Técnicas básicas clásicas

4 Enzimas de restricción Nucleasa sintetizada por las bacterias como un mecanismo de defensa natural. Capaz de reconocer y cortar una secuencia específica de nucleótidos doble cadena. Longuitud de secuencia de reconocimiento ente 4 y 8 bp (excepto las meganucleasas) Primera enzima descubierta fue a partir de Haemophilus influenzae

5 Extremos cohexivos

6 Extremos romos

7 ¿Enzimas? Clonación de DNA Técnicas básicas clásicas

8 Vectores de clonación Replicación autónoma Mapa de restricción conocido: un único punto de corto en el sitio de clonación. Marcadores selectivos: Resistencia antibióticos. Cambios de color. Recuperación sencilla. Tipos de menor a mayor tamaño: Plásmido, fagos, cósmidos, BACs, etc.

9 De acuerdo, pero ¿Qué es una genoteca?

10 Técnicas básicas clásicas Inserción del fragmento de DNA a clonar en el vector de clonación

11 Técnicas básicas clásicas

12 ¿Enzimas? Clonación de DNA Técnicas básicas clásicas ¿PCR?

13 ¿Enzimas? Clonación de DNA Técnicas básicas clásicas ¿PCR? Vamos a verlo con un video!!!!!!!.

14 ¿Enzimas? Clonación de DNA Métodos de detección con sondas Técnicas básicas clásicas ¿PCR?

15 Técnica de Southern blot 1º PASO 2º PASO 3º PASO 4º PASO 5º PASO

16 ¿Enzimas? Clonación de DNA Métodos de detección con sondas ¿Secuenciación? Técnicas básicas clásicas ¿PCR?

17 ¿Y si vemos una peli? Método de Sanger y método automático ¿Y si vemos una peli? Método de Sanger y método automático

18 ¿Y respecto a la manipulación del genoma?


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