RESULTADOS: Tabla 1.- Mediana (por grupo de analizadores) del límite de interferencia por hemólisis para las magnitudes bioquímicas estudiadas * Incluyen métodos diferentes (ver material y métodos a, b, c, d ) Tabla 2.- Índice hemolítico suministrado por los fabricantes para cada magnitud estudiada (nc) no constan en el insert de la técnica EVALUACIÓN DE LOS LÍMITES DE INTERFERENCIA POR HEMÓLISIS PARA DIFERENTES MAGNITUDES Y MÉTODOS ANALÍTICOS M. A. Llopis (1), M.P. Fernández (2), M. J. Alsina (1), V. Álvarez (3), M. Montesinos (4), J. Minchinela (1), M I. Llovet (5), C. Biosca (6), M. Simón (7), E. Tarrés (8), R. Ruiz (3), M. Ibarz (9), R. Pastor (10), M. Domenech (11), C. Perich (12). (1) Laboratori Clínic Barcelonès Nord i Vallès Oriental, Badalona, (2) Laboratoris Clínics Hospital Vall d'Hebron, Barcelona, (3) Laboratoris Clínic L'Hospitalet, L'Hospitalet del Llobregat, (4) Laboratori Clínic Hospital Universitari Dr. Josep Trueta, Girona, (5) Laboratori Clínic Hospital Verge de la Cinta, Tortosa, (6) Servei Bioquímica Clínica Hospital Germans Trias i Pujol, Badalona, (7) Consorci de Laboratori Intercomarcal Anoia, Penedès i Garraf, Vilafranca del Penedès, (8) Laboratori Cínic Berguedà, Berga, (9) Laboratori Clínic Arnau de Vilanova, Lleida, (10) Laboratori Clínic Joan XXIII, Tarragona, (11) Laboratori Clínic Manso, Barcelona, (12) Laboratoris Clínics Bon Pastor, Barcelona La hemólisis es una de las causas principales de rechazo de muestras en los laboratorios. La falta de estandarización en la detección y cuantifica- cación de la hemólisis, hace difícil la comparación interlaboratorios. Nuestro grupo de 12 laboratorios del Institut Català de la Salut (ICS) con seis años de experiencia en la definición de indicadores y especificaciones de la calidad, ha realizado un estudio multicéntrico para evaluar los límites de interferencia por el grado de hemólisis para diferentes magnitudes, métodos analíticos y analizadores, con el objetivo de obtener en el futuro especificaciones de la calidad homogéneas para este indicador. A partir de muestras procedentes de un grupo de individuos sanos se preparan estándares con la siguiente concentración de hemoglobina: (0; 0,16; 0,30; 0,57; 0,97; 2,43; 4,85 y 6,93 g/L) analizados por el método de referencia modificado (cianometa-hemoglobina (ver póster nº 916). Han participado 12 laboratorios con los siguientes analizadores: 4 COBAS 711 (Roche) 3 AU 5400 (Olympus-Izasa) 1 Advia 2400 (Siemens) 1 DXC 800 (Beckman-Izasa) 1 Synchron LXi-725 (Beckman-Izasa) 1 COBAS 6000 (Roche) 1 Modular DP (Roche) 1 Vista (Siemens) Se han determinado las siguientes magnitudes por triplicado en cada uno de los estándares (métodos): Alanina aminotransferasa (ALT): a) Tampón Tris. Concentración de Alanina > 225 mM, b) Método suplementado con piridoxal fosfato Aspartato aminotransferasa (AST): a) Tampón Tris. Concentración de Aspartato > 100 mM, b) Método suplementado con piridoxal fosfato Creatina quinasa (CK): Métodos UV. a) Activador N-acetil-cisteína (NAC), b) Activador Monotioglicerol, c) Activador Ditioeritritol (DTE) Colesterol (COL): Colesterol oxidasa,esterasa, peroxidasa Fosfato (P): Fosfomolibdato a 340 nm Fosfatasa alcalina (FAL): Substrato 4-nitrofenilfosfat con tampón AMP (2-amino-2-metil-1-propanol) Hierro (FE): a) Ferrocina, b) TPTZ, c) Ferene Glucosa (GLU) a) glucosa oxidasa colorimétrico, b) glucosa oxidasa polarográfico, c) Hexoquinasa ү-glutamil-transferasa (GGT) a) Substrato gamma-glutamil-3-carboxi-4- nitroanilida con concentración > 4 mmol/L, b) Substrato gamma-glutamil-4- nitroanilida Potasio (K) Potenciometría indirecta Lactato deshidrogenasa (LDH) a) Piruvato a Lactato, tampón fosfato, b) Piruvato a Lactato, tampón imidazol, c) Piruvato a Lactato tampón BIS-Tris- Propano, d) Lactato a Piruvato, tampón N-metilglucamina, e) Lactato a Piruvato, tampón Tris Proteínas totales (PT): a) Biuret punto final, b) Biuret cinético Triglicéridos (TG): Lipasa/glicerol cinasa, colorimétrico Se han comparado los resultados obtenidos para cada magnitud para los distintos estándares de hemoglobina, con la muestra basal (concentración 0 g/L). El punto de corte para definir la interferencia de hemólisis para una magnitud concreta en cada laboratorio, se establece cuando se supera el error sistemático deseable basado en la variación biológica. Para cada analizador se establece el límite de interferencia como la mediana de los límites obtenidos en cada laboratorio. -El punto de corte de interferencia por hemólisis para la mayoría de magnitudes estudiadas es dependiente del método y/o analizador utilizado. -LDH, AST y K, magnitudes liberadas en el proceso de hemólisis, presentan homogeneidad del límite de interferencia entre laboratorios. -Es recomendable automatizar la detección de hemólisis en los analizadores, sobre todo para aquellas magnitudes en que el límite de interferencia es inferior a la detección visual (0,3 g/L). -Cada laboratorio debería establecer el límite de interferencia por hemólisis para cada magnitud, pues se observan discrepancias entre los límites recomendados por el fabricante y los límites encontrados en el estudio. MAGNITUD BIOQUÍMICA LÍMITE DE INTERFERENCIA POR HEMÓLISIS (g/L) SEGUN EL FABRICANTE ADVIA 2400 (Siemens) DCX 800, Synchron LXi-725 (Beckman- Izasa) AU 5400 (Olympus- Izasa) COBAS (Roche) MODULAR (Roche) VISTA (Siemens) ALT5 0,552 0,6 >10 AST50,5 nc0,4 0,25 0,25-0,5 CK50, COL7,55 577>10 P5,251,5 3, FAL55 4,525>10 FEnc0,5 120,80,25-0,5 GLU5,255 nc108,5-10>10 GGT52, Knc0,5 nc 0,25 LDHnc0,5 nc0,15 0,1 0,1-0,25 PT ,5 >10 TG5, >10 INTRODUCCION y OBJETIVO MATERIAL Y METODOSRESULTADOS CONCLUSIONES