CURSO DE POST-GRADO ● ESPECIALIZACIÓN EN CIENCIAS ● EL MÉTODO CIENTÍFICO EJE DE LOS CURSOS ● MÉTODO DE ESTUDIO Y DE APRENDER ● EL RAZONAMIENTO Y LA LÓGICA ● MÉTODOS DE EVALUACIÓN ● NIVELACIÓN DE LA INFORMACIÓN

LAS MACROMOLÉCULA S BIOLÓGICAS Biología: Diferentes niveles de descripción Diferentes fenómenos suceden, deben ser descriptos, se comprenden a diferentes niveles de descripción.

¿Cual es nuestro problema a estudiar? Durante el siglo XX se comenzó a introducir las descripciones a nivel atómico en la biología ¿Cual es nuestro camino y nuestra ubicación en los niveles anteriores? Descripción de las moléculas involucradas en funciones biológicas; uso de la química y de la física para entender las interacciones entre moléculas ¿Cual es nuestro programa?

Moléculas biológicas Proteínas ● Ácidos nucleicos ● Carbohidratos ● Lípidos ● Coenzimas ● Hormonas Polímeros Membranas

Funciones de las macromoléculas Proteínas Ácidos nucleicos.. Carbohidratos..... Lípidos Enzimas Reconocimiento molecular Proteínas de sostén Información genética Acumular energía Separar compartimentos ConformaciónFórmula Química Química F. Química Propiedadesfisicoquímicas

Proteínas ● Su estructura química está formada por la unión en cadena lineal de un conjunto de bloques. ● Cada bloque es uno de los 20 aminoácidos que se listan.

Excepciones a la cadena lineal ● El enlace de disulfuro

Propiedades de ácido-base

Quiralidad de los aminoácidos

Medir si una substancia es quiral

Representaciones de la quiralidad

Enantiómeros y diastereoisómeros

Otras representaciones Representación RS Proyección de Newman

VOLVEMOS A LA DISCUCIÓN GENERAL

Estrategias de investigación en bioquímica ● Estudio de una función ● Detección de la función elegida (ensayo). ● Búsqueda de una molécula responsable de la función (en general de una proteína????). ● Selección de una fuente (organismo y/o tejido idóneo). Purificación de la proteína.

Purificación de una proteína ● Solubilización (medio celular y tubo de ensayo) ● Estabilidad Solubilidad (pH, concentración salina, – temperatura) Desnaturalización – Actividad proteolítica. ● Detección Ensayo de actividad – E.L.I.S.A.

Solubilidad de proteínas

Cristalización de proteínas

Métodos de purificación de proteínas Tamaño 1) Diálisis y ultracentrifugación – 2) Electroforesis en gel – 3) Cromatografía de filtración en gel Polaridad 1) Cromatografía de adsorción – 2) Cromatografía en papel – 3) Cromatografía de fase reversa – 4) Cromatografía de interacción hidrofóbica Carga 1) Cromatografía de intercambio iónico – 2) Electroforesis – 3) Enfoque isoeléctrico Especificidad Cromatografía de afinidad

Cromatografía de filtración en gel

Cromatografía de intercambio iónico

Generación de un gradiente lineal de concentración Conc.salina Vol. Eluente

Electroforesis

Electroforesis en gel

Electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE)

SDS-PAGE [CH 3 -(CH 2 ) 10 -CH 2 -O-SO 3 ]Na + DOCECIL SULFATO DE SODIO (SDS)

Isoelectro- enfoque