USO E INTERPRETACION DE LAS PRUEBAS DE DIAGNOSTICO: SEROLOGIA Campaña Nacional contra la Brucelosis en los animales

PRUEBAS SEROLOGICAS Evalúan la respuesta inmune humoral en líquidos orgánicos. Ninguna prueba serológica permite descubrir la totalidad de los casos Importancia del diagnóstico de hato o poblacional en programas de control y erradicación

CLASIFICACION DE LAS PRUEBAS SEROLOGICAS Tamiz o de “screening” Confirmatorias De vigilancia epidemiológica Cualitativas: Prueba de tarjeta, Anillo en leche (resultados + ó -) Cuantitativas: Rivanol, FC’ (resultados en títulos)

Toma de muestra de sangre para diagnostico de brucelosis

PRUEBAS TAMIZ Alta sensibilidad: pocos o ningún falso negativo Pruebas cualitativas Sencillas Prácticas: fácil realización Económicas Ejemplo: prueba de tarjeta

PRUEBAS CONFIRMATORIAS Más específicas Son cuantitativas Mayor número de casos crónicos diagnosticados Diferencian títulos residuales de la vacunación de títulos de origen infeccioso Ejemplo: Rivanol, Fijación del Complemento.

PRUEBAS DE VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICA Son cualitativas Realización rápida Pruebas poblacionales o de hato Ejemplo: prueba de anillo en leche En áreas controladas y/o libres para descubrir hatos presuntamente infectados

DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO I Se requieren muestras repetidas. Muestra óptima para aislamiento en animales: contenido abomasal, placenta, feto, y membranas fetales; leche, nódulos linfáticos supramamarios Toma aséptica y envío inmediato y en refrigeración de las muestras. Las muestras deben ser frescas.

DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO I I Aislamiento a partir de sangre, sólo en animales bacterémicos, situación muy improbable Facilidad de contaminación de la muestra, sobre todo en abortos. Necesidad de personal capacitado: muestras de alto riesgo al personal. Tiempo prolongado de crecimiento: desde 15 días hasta 1 mes

PRUEBAS OFICIALES PARA EL DIAGNOSTICO SEROLOGICO DE BRUCELOSIS - NOM Para brucelas lisas: Tarjeta (rosa de bengala o “card test”) Rivanol Fijación del complemento Anillo en leche Para B. ovis: Inmunodifusión doble y FC’

PRUEBA DE TARJETA Prueba tamiz, cualitativa En sueros de bovinos, ovinos, caprinos Detecta IgG e IgM vs cepas lisas de Brucella Requiere suero sanguíneo no hemolisado Resultados: (+) ó (-) Concentración celular: 8% para bovinos y 3% para cabras y ovinos

PRUEBA DE RIVANOL (I) Prueba confirmatoria y cuantitativa para sueros de bovinos Detecta IgG. Requiere suero sanguíneo no hemolisado positivo a prueba de tarjeta. Resutados expresados en títulos de anticuerpos.

PRUEBA DE RIVANOL (II) Resultados: títulos 1:25, 1:50, 1:100, 1:200 y 1:400 Interpretación: Animales no vacunados se consideran positivos cuando hay aglutinación completa desde 1:25 Animales vacunados: positivos si hay aglutinación completa a partir de 1:50 Negativos: cuando no se observa aglutinación

FIJACION DE COMPLEMENTO Prueba cuantitativa, complementaria en todas las especies: bovinos, ovinos, caprinos Sueros no hemolisados indispensables Requiere personal y laboratorios especializados.

FIJACION DE COMPLEMENTO Interpretación de resultados Bovinos: No Vacunados: Positivo si el título es mayor o igual a 1:20. Vacunados: Positivos a 1:40. Caprinos y ovinos: Positivo a partir de 1:8.

ANILLO EN LECHE (I) Prueba de vigilancia epidemiológica Cualitativa Requiere muestras de leche fresca, refrigerada: 12 a 72 hs de haber sido tomadas Se requiere sólo 1 ml para realizar la prueba (muestra mínima: al menos 10 ml)

ANILLO EN LECHE (II) Interpretación En leche de vacas: Positivo = cualquier coloración de un anillo teñido en la superficie de la columna de leche Negativo = ausencia de anillo teñido en la superficie En leche de cabras: Reacción positiva si se forma un botón coloreado al fondo del tubo o grumos teñidos en la columna de leche. Negativo si se tiñe toda la columna.

DIAGNOSTICO DE EPIDIDIMITIS OVINA POR B. ovis Tamiz: Prueba de Inmunodifusión doble en agar, con antígeno soluble en solución salina caliente (HS) de B. ovis. Confirmatoria: Fijación de Complemento con antígeno de B. ovis. Sólo en machos > de 8 meses.