Comparación entre técnicas inmunológicas y moleculares para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas Elizabeth Ferrera,b, María Laresa , Mercedes Viettria y Mehudy Medinac. a-Instituto de Investigaciones Biomédicas Dr. Francisco J. Triana Alonso (BIOMED), Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Carabobo Sede Aragua, Maracay, Venezuela b-Departamento de Parasitología, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Carabobo Sede Aragua, Maracay, Venezuela c-Laboratorio de Diagnóstico de la Enfermedad de Chagas, Dirección General de Salud Ambiental, Ministerio del Poder Popular para la Salud, Maracay, Venezuela

OBJETIVO Comparar la eficacia diagnóstica de las técnicas inmunológicas con la de las moleculares en las diferentes fases de la enfermedad de Chagas.

METODOLOGÍA 39 en fase aguda 42 en fase crónica 20 sanos Muestra Biológica Suero y sangre Pacientes evaluados 39 en fase aguda 42 en fase crónica 20 sanos 10 pacientes con enfermedades relacionadas

Preparación del antígeno de Maeckelt TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS Cultivo de Parásitos Preparación del antígeno de Maeckelt HAI- IFI- ELISA

TÉCNICAS MOLECULARES Extracción de ADN PCR para la detección de ADN de minicírculo de kinetoplasto de T. cruzi PCR para la detección de ADN satélite de T. cruzi Electroforesis de ADN en geles de agarosa

Análisis de Resultados

Pruebas Inmunológicas CONCLUSIONES Pruebas Inmunológicas Menor sensibilidad en fase aguda debido a la falta de Ac para ser detectados. Mayor sensibilidad en fase crónica debido a la gran cantidad de Ac. Menor especificidad Pruebas Moleculares Mayor sensibilidad en fase aguda debido a la mayor parasitemia Menor sensibilidad en fase crónica debido a que los parásitos se encuentran en los tejidos. Mayor especificidad

Ventajas de PCR: Desventajas: Utilización en casos de baja parasitemia Diagnóstico de pacientes inmunocomprometidos Diagnóstico de Chagas congénito. Desventajas: Costo Escasa disponibilidad La OMS recomienda: el uso de pruebas parasitológicas para la confirmación de un caso agudo; para el cribado serológico se recomienda una prueba de sensibilidad elevada( IFI, ELISA, HAI), y para el diagnóstico, el uso de al menos 2 pruebas de antígenos y principios distintos. Se recomienda el uso de una tercera técnica ante casos de discrepancia.

Lo más recomendable, para garantizar un diagnóstico certero, es combinar el uso de las técnicas parasitológicas, inmunológicas y moleculares de acuerdo con la fase de la enfermedad que se sospecha

MUCHAS GRACIAS!!! -Rivarola María Lourdes -Orueta Pamela -Godoy María Renata -Nicolai Ariel