INMUNOHISTOQUIMICA DE TUMORES GINECOLOGICOS DRA. ALEJANDRA ZARATE OSORNO DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA HOSPITAL ESPAÑOL DE MEXICO

INMUNOHISTOQUIMICA PERFILES DIAGNOSTICOS PRONOSTICOS PREDICTIVOS

INMUNOHISTOQUIMICA EN GINECOLOGIA Insustituibles: Muestreo amplio del tumor Examen morfologico Diagnóstico definitivo: controvertido Inmunohistoquímica Fuentes potenciales de error Anticuerpo específico o panel de anticuerpos

INMUNOHISTOQUIMICA EN GINECOLOGIA La mayoría no requiere No hay anticuerpos específico para una neoplasia en particular Interpretación de la IHQ en el contexto de la morfología Expresión aberrante de Ag Utilizar siempre paneles y no un solo Ab McCluggage WG. Adv Anat Pathol 11:162-171, 2004 Mittal K. Arch Pathol Lab Med 2008;132:402-423

GINECOLOGIA ANTICUERPOS Pancitoqueratinas (AE1/AE3) Antígeno Carcinoembrionario (CEA) Citoqueratina 20 Citoqueratina 7 h-caldesmon Desmina Actina de músculo liso CD10 CD117 CA 125

GINECOLOGIA ANTICUERPOS Receptores de estrógenos Receptores de progesterona WT-1 Ki-67 Proteína p53 PLAP CD30 Gonadotropina coriónica, fracción beta Alfa-fetoproteína

GINECOLOGIA ANTICUERPOS Sinaptofisina Cromogranina Vimentina Calretinina MELAN-A Alfa-1-inhibina CD56 CD45 CD99

INMUNOHISTOQUIMICA NEOPLASIA MALIGNA INDIFERENCIADA Carcinoma indiferenciado Linfoma de alto grado (anaplásico o de células grandes) Melanoma maligno Sarcomas de celulas redondas Disgerminoma

INMUNOHISTOQUIMICA VULVA, VAGINA Y CERVIX Marcadores epiteliales: CK (AE1/AE3, 7 y 20) Marcadores de proliferacion (Ki-67) Marcadores mesenquimatosos: vimentina, desmina y actina, proteina s-100, miogenina, CD34, CD10 Marcadores neuroendocrinos (cromogranina, sinaptofisina) Enfermedad de Paget (GCDFP-15) Marcadores de VPH: proteína p16 Marcadores de melanoma: proteína S-100, MELAN-A, HMB-45, tirosinasa

IHQ CERVIX UTERINO Metaplasia escamosa vs. LEIBG: Ki-67 Atrofia escamosa vs. LEIAG: ki-67 Lesiones glandulares benignas vs. Lesiones preneoplásicas: p53, Ki-67, CEA Adenocarcinoma de endocérvix vs. endometrial: vimentina, CEA, Proteína p16, receptores hormonales Ca. neuroendocrino, vs. carcinoma escamoso poco diferenciado vs. linfoma: CK, marcadores neuroendocrinos, CD45

INMUNOHISTOQUIMICA LESIONES CERVICALES INTRAEPITELIALES PAPILOMA ESCAMOSO POLIPO FIBROEPITELIAL METAPLASIA ESCAMOSA INMADURA CAMBIOS ATROFICOS LESIONES GLANDULARES BENIGNAS CONDILOMA ACUMINADO LESION INTRAEPITELIAL DE ALTO GRADO ADENOCARCINOMA ENDOCERVICAL

INMUNOHISTOQUIMICA LESIONES CERVICALES INTRAEPITELIALES Marcadores de proliferación (Ki-67) Proteína p16

Ki-67 Ki-67

PROTEINA p16 Fuertemente expresada en los carcinomas cervicales Quinasa inhibidora dependiente de la ciclina Fuertemente expresada en los carcinomas cervicales Areas de metaplasia escamosa Tinción uniforme y difusa (núcleo y citoplasma) Otros marcadores VPH genérico Marcadores de proliferación: Ki-67 (MIB-1) Proteína p53 Adv Anat Pathol 8:83-92, 2001

p16

VPH Ki-67

EXPRESION DE PROTEINA p16 TEJIDO NORMAL Niños: Timo Adultos: Endometrio proliferativo Ductos mamarios Células gástricas Esófago Glándulas salivales Células neuroendócrinas

EXPRESION DE PROTEINA p16 NEOPLASIAS Dermatofibrosarcoma protuberans Adenocarcinoma gástrico Linfomas (Hodgkin y no Hodgkin) Tumores neuroendócrinos (carcinoide-células pequeñas) Adenocarcinoma pulmonar Carcinoma escamoso pulmonar

EXPRESION DE PROTEINA p16 NEOPLASIAS TRACTO GENITAL FEMENINO Cérvix: marcador de presencia de VPH de alto riesgo Carcinomas cérvix escamoso, glandular y de células pequeñas Leiomiosarcomas uterinos Carcinomas serosos ováricos Adv Anat Pathol 13:8-15, 2006

EXPRESION DE PROTEINA p16 LESIONES ESCAMOSAS CERVICALES Epitelio normal: ausente o focalmente positiva Lesión de bajo grado: tercio inferior del epitelio Lesión de alto grado: dos tercios superiores del epitelio Diagnóstico diferencial: Atrofia Metaplasia escamosa inmadura Metaplasia transicional Adv Anat Pathol 13:8-15, 2006

EXPRESION DE PROTEINA p16 LESIONES GLANDULARES CERVICALES Adenocarcinoma endocervical (excepto adenoma maligno) Adenocarcinoma in situ, diagnóstico diferencial: Hiperplasia microglandular Metaplasia tuboendometrial Endometriosis Diagnóstico diferencial con adenocarcinoma endometrial Adv Anat Pathol 13:8-15, 2006

p16 Ki-67

CONDILOMA ACUMINADO

EXPRESION DE PROTEINA p16 ALTERACIONES DISPLASICAS Y NEOPLASICAS DEL CERVIX Sobre-expresión es típica en displasia y neoplasia Expresión heterogénea Algunas lesiones son negativas Una prueba negativa no descarta la presencia de VPH de alto riesgo Inmunohistoquímica para proteína p16 y Ki-67 como prueba complementaria IHQ negativa: hacer pruebas moleculares BMC Cancer 4:58-68, 2004

PAS GCDFP-15 CK-7

CD34 CD10 R.E.

CK 8/18 CK7

CD56 CD56 CD117 TTF-1

CK-7 CK-5/6

ADENOCARCINOMA ENDOMETRIAL TIPOS 1 Y 2 ADENOCARCINOMA ENDOMETRIOIDE BAJO GRADO (I Y II) DEPENDIENTE DE ESTROGENOS TIPO 2 CARCINOMA SEROSO PAPILAR ALTO GRADO NO DEPENDIENTE DE ESTROGENOS PRONOSTICO Y TRATAMIENTO DIFERENTES

ADENOCARCINOMA ENDOMETRIAL TIPOS 1 Y 2 RECEPTORES ESTROGENOS POSITIVOS Ki-67 (BAJO INDICE) PROTEINA p53 NEGATIVO TIPO 2 RECEPTORES ESTROGENOS NEGATIVOS Ki-67 (ALTO INDICE) PROTEINA p53 POSITIVO

p53 R.E. Ki-67

R.E. p53 Ki-67

INMUNOHISTOQUIMICA ENDOMETRIAL VS. ENDOCERVICAL Biopsias pequeñas Invasión de endocérvix y endometrio Establecer el sitio de origen Tratamiento quirúrgico inicial diferente Pistas morfológicas

INMUNOHISTOQUIMICA CARCINOMA ENDOMETRIAL Inmunofenotipo característico Citoqueratina 7 Coexpresion de vimentina Focos de diferenciacion escamosa (CK 5/6) Expresión focal de CEA Expresión focal de proteína p16 Receptores hormonales (E y P)

INMUNOHISTOQUIMICA ENDOMETRIAL VS. ENDOCERVICAL VIMENTINA: + RECEPTORES E Y P: +/- QUERATINA 7: + CEA: -/+ Proteína p16: - ENDOCERVICAL VIMENTINA: - RECEPTORES E Y P: -/+ QUERATINA 7: + CEA: + Proteína p16:+

INMUNOHISTOQUIMICA ENDOMETRIAL VS. ENDOCERVICAL Anticuerpo Endometrial Endocervical Vimentina +/- -/+ RE y RP CEA Proteina p16 +

R.E. VIMENTINA

vimentina CEA

CEA p16 Vimentina R.E.

INMUNOHISTOQUIMICA CARCINOMA ENDOMETRIAL MARCADORES PRONOSTICOS Receptores hormonales (E y P) Indice de proliferación (ki-67) Sobreamplificación del c-erbB-2

H-caldesmon Actina ML

H-caldesmon

INMUNOHISTOQUIMICA TUMOR MIXTO MULLERIANO MALIGNO Marcadores epiteliales Marcadores mesenquimatosos (componentes heterólogos)

CK Desmina

INMUNOHISTOQUIMICA ESTROMA ENDOMETRIAL VS. MUSCULO LISO Nódulo del estroma endometrial Sarcoma del estroma endometrial Leiomioma celular CD10 (sarcoma del estroma endometrial, leiomiosarcoma, leiomioma celular) h-caldesmon (leiomioma y leiomiosarcomas) Desmina Actina especifica de músculo liso Oliva E y cols. Am J Surg Pathol 26:403-412, 2002

CD10 DESMINA

INMUNOHISTOQUIMICA CD10 EN NEOPLASIAS ENDOMETRIALES Neoplasias del estroma endometrial Adenocarcinoma mesonéfrico Adenocarcinoma endometrial (la mayoría) Adenocarcinoma endocervical (30%) Angiofibromas de la vulva Am J Surg Pathol 27:178-186, 2003

INMUNOHISTOQUIMICA TUMORES DEL ESTROMA ENDOMETRIAL Receptores hormonales (E y P) CD10 (CALLA) h-caldesmon (musculo liso) Actina específica de músculo liso CK (focal) Otros marcadores (cromogranina, sinaptofisina, WT-1)

CD10 WT-1

CD10 R.E.

CK 8/18 CD10

INMUNOHISTOQUIMICA DIAGNOSTICO DIFERENCIAL EN TUMORES OVARICOS Epiteliales (epitelio de superficie) Estroma y cordones sexuales Células germinales

INMUNOHISTOQUIMICA OVARIO TUMORES EPITELIO DE SUPERFICIE CK 7, 8, 18, 19 y 20 WT-1 Receptores de estrógenos y progesterona Serosos: WT-1, CK7, RE y RP, CA 125 Mucinosos: CA-125, e-caderina, CK7+/CK20+, CEA, CDX-2 Endometrioides: similares al endometrial Células claras: CK 7, p53, WT-1 -

CK 7 CA 125 WT-1

WT-1 CA 125 CK 7

p53 CK7

CK 7 CK 20 CA 125 CDX-2

INMUNOHISTOQUIMICA SEROSO OVARICO Vs. MESOTELIOMA WT-1 + CK 7 + VIMENTINA + CALRETININA + CD15- CK 5 Y 6 + RECEPTORES - CEA - BerEP4 - SEROSO OVARICO WT-1 + CK 7 + VIMENTINA + CALRETININA- CD15 + CK 5/6 -/+ RECEPTORES + CEA - BerEP4 +

WT-1 CK Calretinina

DIAGNOSTICO DIFERENCIAL EN TUMORES OVARICOS EPITELIALES CK 7 WT-1 CK 20 Receptores hormonales c-erbB-2 (HER-2/neu) Proteína p53

DIAGNOSTICO DIFERENCIAL EN TUMORES DEL ESTROMA OVARICO Alfa-1-inhibina MELAN-A (MART-1) Calretinina CD56 Actina específica de musculo liso CK

INMUNOHISTOQUIMICA TUMOR UTERINO QUE SEMEJA TUMOR OVARICO DE LOS CORDONES SEXUALES Tipos 1 y 2 Tipo 1: sarcoma endometrial Tipo 2: semejan al de la granulosa o celulas de Sertoli Localización: miometrio Evolución favorable, potencial maligno incierto IHQ: CK 7 y marcadores de músculo liso, inhibina, calretinina, MELAN-A, CD99, receptores hormonales

TUMOR UTERINO SIMILAR AL TUMOR OVARICO DE LOS CORDONES SEXUALES DIAGNOSTICO DIFERENCIAL Carcinoma indiferenciado Carcinoma neuroendocrino Adenocarcinoma endometrioide Neoplasia del estroma endometrial Neoplasia epitelioide de musculo liso Tumor trofoblastico del sitio placentario

INMUNOHISTOQUIMICA OVARICOS PRIMARIOS vs. METASTASIS Sitio frecuente de metástasis Mama: GCDFP-15, Mamoglobina Colorecto: CK-7-, CK-20+, CDX-2 Endometrio: WT-1 -, Vimentina+ Estómago (tubo digestivo): CK-20+ CK7- CDX-2, CA 19.9 Pulmón: TTF-1

GCDFP-15 Mamoglobina

CK 20 CDX-2

CK 7 GCDFP-15

CK 20 CK 7 CA 19.9

CA CELULAS EN ANILLO DE SELLO OVARIO ANTICUERPO OVARIO ESTOMAGO Citoqueratina 7 + +/- Citoqueratina 20 -/+ Receptores estrogenos - Receptores progesterona

OVARIO vs METASTASIS CK 7 + -/+ CK 20 - +/- WT-1 CA 125 CA 19.9 RE RP Ab Endometrio Ovario Seroso Ovario Mucinoso Cel Claras Mama GI PB Urotelial CK 7 + -/+ CK 20 - +/- WT-1 CA 125 CA 19.9 RE RP CDX-2 CD10 GCDFP Mamoglob

INMUNOHISTOQUIMICA TUMORES DE CELULAS GERMINALES Disgerminoma: PLAP, CD117 Tumor de senos endodérmicos: A-FP, CK, alfa-1-antitripsina Carcinoma embrionario: CK, A-FP, CD30 Coriocarcinoma: GCH, CK

PLAP CD117

AFP CK

CD30

TUMORES OVARICOS DE CELULAS PEQUENAS Y AZULES AB GRANULOSA CEL PEQ DISGERMINOMA PNET LINFOMA CK 8/18 -/+ + - WT-1 PLAP TTF-1 CD99 Calretinina +/- Inhibina CD56 CD45 Cromogranina Sinaptofisina

INMUNOHISTOQUIMICA ESTROMA OVARICO-CORDONES SEXUALES Afa-inhibina Calretinina MELAN A (MART-1) Actina CD56 McCluggage G y cols. Int J Ginecol Pathol 2007;26-322-327

Calretinina Inhibina Actina ML CD56

Calretinina Inhibina

Calretinina CK WT-1

INMUNOHISTOQUIMICA PECOMAS UTERINOS Células epitelioides con abundante citoplasma claro o eosinofílico Células perivasculares epitelioides Marcadores melanociticos (HMB-45) Marcadores de músculo (desmina)

CK7 WT-1 R.E.

Cromogranina Sinaptofisina

CK VIMENTINA CD10

MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCION