Electroforesis en gel

Identificación de clones portadores de un gen de interés Rastrear todas las colonias con plásmidos recombinantes Buscar el gen específico o producto proteico.

¿Cómo estudiar la expresión genética con electroforesis en gel? La electroforesis en gel es un método muy usado para separar moléculas de diversos tamaños y es la base de las técnicas que describiremos para identificar ADN, ARN y proteínas.

Fundamento de la técnica La técnica se basa en separar a las moléculas en base a su carga, su tamaño y otras propiedades físicas. Como los ácidos nucleicos, por ejemplo, poseen un grupo fosfato con carga negativa, frente a un campo energético se moverán hacia el extremo con carga positiva. A medida que se mueven por el gel, la mayor parte del gel obstruye el paso de las moléculas más largas en mayor medida que el de las moléculas más cortas y de esta manera las separa de acuerdo con su longitud. Por tanto, la electroforesis en gel separa una mezcla de molécula de ADN lineal en bandas, cada una formada por moléculas de ADN de la misma longitud.

Electroforesis en gel Las moléculas son forzadas a través del gel ubicado en un espacio entre dos límites motivado por una corriente eléctrica. 

Electroforesis en gel Al situar las moléculas en el gel y aplicar una diferencia de potencial eléctrico, las moléculas se mueven a diferentes velocidades, hacia el cátodo, si están cargadas positivamente, y hacia el ánodo, si están cargadas negativamente.

Electroforesis en gel Una aplicación muy importante para la electroforesis en gel es en la tecnología del ADN. Es una de las más importantes herramientas en biología molecular y es de valor crítico en muchos aspectos de la manipulación y estudio genético. Un uso es la identificación de moléculas ADN particulares por los patrones de banda que ellos producen después de ser cortado con varias enzimas de restricción.

Electroforesis en gel ADN viral, plasmídico y segmentos particulares de ADN cromosomal puede ser identificados por esta técnica. Separación y purificación de fragmentos individuales conteniendo genes interesantes, los cuales pueden ser recuperados del gel con actividad biológica completa.

Electroforesis en gel La electroforesis en gel hace posible determinar la diferencia genética y la relación evolutiva entre especies y plantas y animales. Usando esta tecnología es posible separar e identificar las proteínas que difieren en por lo menos en un solo aminoácido.

Paso a paso y características de la electroforesis en gel

Resultado de la corrida

Resúmen https://www.youtube.com/watch?v=U1g2qt3juZw