Construcción de un mapa de restricción del genoma circular pequeño del virus tumoral de DNA del polioma. (a) Autorradiografías de fragmentos de DNA marcados.

Presentación del tema: "Construcción de un mapa de restricción del genoma circular pequeño del virus tumoral de DNA del polioma. (a) Autorradiografías de fragmentos de DNA marcados."— Transcripción de la presentación:

1 Construcción de un mapa de restricción del genoma circular pequeño del virus tumoral de DNA del polioma. (a) Autorradiografías de fragmentos de DNA marcados con 32P que se sometieron a electroforesis en gel. El gel del lado izquierdo muestra el patrón de los fragmentos de DNA obtenidos después de la digestión completa del genoma de polioma con la enzima HpaII. Para determinar cómo se reúnen estos ocho fragmentos para conformar el genoma intacto es necesario tratar el DNA de tal manera que se genere superposición de fragmentos que puede producirse mediante el tratamiento del genoma intacto con una segunda enzima que divide la molécula en sitios diferentes o por el tratamiento del genoma con la misma enzima en condiciones distintas en las que el DNA no se digiera por completo como sucedió en el gel de la izquierda. Las dos muestras de la derecha representan ejemplos de digestiones parciales del genoma del polioma con HpaII. El gel central muestra los fragmentos generados por la digestión parcial del DNA circular súper helicoidal y el gel de la derecha muestra los fragmentos HpaII formados después que el genoma circular se convierte en una molécula lineal por acción de EcoR1 (una enzima que sólo hace un corte en el círculo). (b) Mapa de restricción del genoma de polioma alineado con base en la división hecha con HpaII. Se ilustran los ocho fragmentos de la digestión completa junto con el DNA en la parte superior. Los fragmentos superpuestos de la digestión parcial se muestran en su disposición ordenada por debajo del mapa. (Los fragmentos L y M migran al fondo del gel en la parte a, lado derecho.) (Tomada de Beverly E. Griffin, Mike Fried y Allison Cowie, Proc. Nat´l. Acad. Sci1. U.S.A. 71:2078, 1974.) De: Técnicas en biología celular y molecular, Biología celular y molecular. Conceptos y experimentos, 7e Citación: Karp G. Biología celular y molecular. Conceptos y experimentos, 7e; 2017 En: Recuperado: October 07, 2017 Copyright © 2017 McGraw-Hill Education. All rights reserved