MICOSIS SISTÉMICA POR INONOTUS TROPICALIS EN UN PERRO DOMÉSTICO 192_CC MICOSIS SISTÉMICA POR INONOTUS TROPICALIS EN UN PERRO DOMÉSTICO Iachini R.1, Hevia A.I.2, Fernández J.2, Toranzo A.I.2, Suárez-Alvarez R.O.2, Lazzari J.3, Refojo N.2, Canteros C.E.2 1Instituto de Zoonosis “Luis Pasteur”, CABA, Argentina 2Departamento Micología. INEI-ANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán, CABA, Argentina. 3Veterinaria Azcuénaga. CABA, Argentina. Introducción Las micosis por Inonotus tropicalis han sido recientemente documentadas en humanos y animales. Uno de los principales inconvenientes para su diagnóstico radica en que estos basidiomicetos rara vez exhiben características morfológicas que faciliten su identificación. Resumen clínico Canino hembra, de raza indefinida de talla mediana, de 9 años, que habitaba en un departamento de la Ciudad de Buenos Aires, con antecedentes de permanencia en zonas de la Mesopotamia Argentina en los primeros años de vida y visitas periódicas a posteriori. Tuvo como antecedente mordeduras de otro perro en enero 2015, con una lesión en el párpado inferior del ojo derecho, con inflamación periocular y de la esclerótica. Luego de 60 días comenzó con decaimiento, síndrome febril y adenomegalia pre-escapular. Se le realizó un drenaje quirúrgico del ganglio abcesado y se tomó una muestra para estudios histológicos y microbiológicos (Muestra 1). La adenomegalia evolucionó con fístulas supurativas sanguinolentas (figura 1) y en el examen clínico se observaron adenomegalias pre-escapulares, axilares e inguinales superficiales. Se tomaron nuevas muestras de los ganglios pre-escapulares derecho e izquierdo para estudios histológicos y microbiológicos (Muestra 2). A B Figura 1: A) imagen de las lesiones en el cuello del canino. B) detalle de las fístulas sanginolentas. A B Figura 2: Cortes histológicos de ganglio, A) Coloración H&E, 400x. Barra 10mm. B) Coloración de PAS 400x, Las flechas señalan las hifas. Exámenes complementarios Diagnóstico por imágenes. Los estudios ecográficos y radiográficos confirmaron la presencia de adenomegalias ilíacas internas y mediastínicas. Histología. En las muestras 1 y 2 se observaron hifas tabicadas en la tinción de Hematoxilina-Eosina (H&E) que resultaron positivas por tinción con Ácido Periódico de Shiff (PAS); se observó presencia de granulomas con células gigantes epitelioides y fagocitos (Figura 2 A y B). Otros análisis. Se realizaron estudios bioquímicos, hematológicos, serológicos y moleculares para descartar otras patología scomo brucelosis, leishmaniasis, hemoparasitosis y toxoplasmosis, cuyos resultados fueron negativos. En el proteinograma electroforético se observó una banda monoclonal tipo IgM. Microbiológicos. En el examen directo (ED) de los ganglios preescapulares en fresco con hidróxido de potasio 10% y tinción de Giemsa, se observaron abundantes hifas hialinas tabicadas y ramificadas (Figura 3 A y B). En los medios de cultivo para bacterias se aisló Staphylococcus intermedius y en agar Sabouraud desarrolló un hongo de micelio blanco de crecimiento lento. El hongo no produjo fructificación en agar papa dextrosado (APD) (Figura 4 A y B), agar avena arrollada y agar extracto de malta. Estudios Moleculares. Se extrajo ADN genómico a partir del la muestra 2 y del desarrollo en APD. Por secuenciación del fragmento ITS y posterior comparación con bases de datos públicas (GenBank) el hongo fue identificado como Inonotus tropicalis con 98% de similitud con una secuencia de esta especie. Se construyó un árbol filogenético incluyendo las secuencias obtenidas y las de especies representativas del género depositadas en el GenBank. Los aislamientos agruparon con las secuencias de Inonotus tropicalis aisladas de Brasil (Figura 5- recuadro azul). A B Figura 3: ED de ganglio, A) KOH 10%, 400x. B) Coloración de Giemsa 1000x. Barra 10mm. Las flechas señalan las hifas fúngicas. Figura 5: Reconstrucción filogenética utilizando secuencias de ITS, (478pb). Método estadístico: Neighbor Joining. Boostrap 2000 repeticiones. A B Figura 4: A) Cultivos en APD, 20 días a 28ºC. B) Disgregado de la colonia en Azul de Algodón-Lactofenol, 400x. Barra 10mm. Discusión y Diagnósticos Diferenciales La presencia de hifas en el tejido permitió diagnóstico presuntivo de hialohifomicosis. Para identificar el hongo fueron necesarios estudios complementarios, en este caso, la secuenciación del fragmento ITS permitió confirmar el diagnóstico e identificar el hongo como Inonotus tropicalis, un Basidiomycete que se aísla de la madera en descomposición en zonas tropicales y subtropicales. No se pudo determinar con certeza cual fue la vía de infección, sin embargo, no se puede descartar la inoculación traumática a través de la lesión ocular previa. Los pocos casos reportados en la literatura, se asocian a pacientes inmunocomprometidos, el proteinograma electroforético del can mostró una banda monoclonal, pero no se realizaron los estudios complementarios necesarios para saber si la banda estaba asociaba a una enfermedad inmuno debilitante. Fue tratado con itraconazol 7 mg/kg/día, vía oral con respuesta clínica favorable por dos meses y medio, luego presentó vómitos y se suspendió el tratamiento; a 15 días desarrollo de nuevo una adenomegalia pre-escapular izquierda idéntica a la inicial, seguida de un cuadro de peritonitis, pancreatitis y glomerulonefritis aguda, por lo que se le practicó la eutanasia.