Uso de la fluorescencia en estudios fisiológicos

Slides:



Advertisements
Presentaciones similares
PRESION ARTERIAL.
Advertisements


AGUA Y SAL.
FENOTIPO Propiedades Distintivas de los organismos, tanto estructurales como funcionales, producidas por la interacción del genotipo con el ambiente. LAS.
MULTIVERSIDAD LATINOAMERICANA CAMPUS TONALÁ Lípidos QUÍMICA II DOCENTE: Julieta de las Nieves Pérez Muñoz BLOQUE V. IDENTIFICA LA IMPORTANCIA DE LAS MACROMOLÉCULAS.
Sistema renal Funciones de los riñones. La observación de la orina, le permitirá saber cuando el sistema renal funciona correctamente. El volumen de orina.
FISIOLOGÍA DE LA NEURONA. COMUNICACIÓN INTRANEURAL CONDUCCIÓNDEL IMPULSO NERVIOSO.
Transmisión Sináptica Liceo Nº 1 Javiera Carrera Departamento de Biología Paulina Acevedo D.
Electrofisiología celular Potenciales eléctricos. Potencial de equilibrio. Potencial de membrana. Potencial de acción. Propagación de potenciales.
SEÑALIZACION INTRACELULAR. Diferentes células responden diferentes a la misma señal.
Electroforesis en gel. Identificación de clones portadores de un gen de interés -Rastrear todas las colonias con plásmidos recombinantes (Ej. Colonias.
Glándulas paratiroides Dr. Alejandro Segnini Bosch
MICROSCOPIOS ALGUNOS TIPOS DE MICROSCOPIOS.
Transmisión de señales entre células
Integración de vías metabólicas
PRUEBA FINAL CURSO Biomoléculas 3d.
Teoría celular.
REGULACIÓN DE LAS FUNCIONES CORPORALES Y HOMEOSTASIS
Antihipertensivos-Inhibidores del Sistema Adrenérgico
Biotecnología Es cualquier uso o alteración de organismos, células o moléculas biológicas para lograr objetivos prácticos y específicos. La biotecnología.
Transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET)
Conocer la morfología y función del Sistema Endocrino.
Inducción de proteína recombinante
Inducción de proteína recombinante
El uso de genes reporteros para definir elementos reguladores de DNA
Micromatriz de DNA. Las micromatrices de DNA también se conocen como genochips y cuentan con oligonucleótidos o DNA complementario (cDNA, complementary.
IMPULSO NERVIOSO.
Paratiroides, Páncreas y Suprarrenales. -Retroalimentación
Micromatriz de DNA y análisis de la expresión génica
Membrana celular.
Comunicación intercelular
Microscopia de fluorescencia confocal con exploración láser
Mecanismo de reabsorción del ion sodio (Na+) en el túbulo proximal
Transducción de señales integrantes: Yanira pozo.
Comunicación Celular.
Estructura de una proteína G y el ciclo de la proteína G
Tecnología del ADN recombinante
Duplicación del gen de amilasa durante la evolución humana
Tejido conectivo y planimetría
Zimógenos INTEGRANTES: Espinoza López Yuridia
El sistema Nervioso I Unidad.
(Principios y bases fisiológicas)
Potencial de Acción.
La parte superior de la figura muestra un gel SDS-poliacrilamida después de la electroforesis de una preparación de nAChR purificado. El receptor consiste.
Uso de variantes de GFP para seguir las interacciones dinámicas entre neuronas y sus células blanco in vivo. (a) Porción de cerebro de un ratón con dos.
Función de los receptores. A. Respuesta a la hormona
Conceptos generales, métodos y estrategias en la clonación de
Formación de un potencial de acción
Comunicación entre las células y su ambiente
La lámina nuclear. (a) Núcleo de una célula humana cultivada que se tiñó con anticuerpos fluorescentes par revelar la lámina nuclear (rojo), que se encuentra.
Características de las células del musculo cardiaco
1.Fundamentos del microscopio óptico 1.1 El microscopio de campo claro 1.2 Tinción de microorganismos para su observación al microscopio de campo claro.
Introducción a la endocrinología
TEMA 1: EL AGUA Y LAS SALES MINERALES
Técnica de micropunción para el estudio de la función tubular
Cuantificación de Proteínas
FUNCIONES DEL RIÑÓN 54:39.
FUNCIONES DEL RIÑÓN 54:39.
TRANSFORMACIÓN.
Resultados inducción de proteína recombinante
Proteína recombinante
M. en C. Montserrat López Coria
Proteína recombinante
Fenómenos eléctricos de las neuronas
ANTIHIPERTENSIVO S Y ANTIDIURÉTICOS. QUE ES LA PRESI Ó N ARTERIAL? ◦ La presión arterial es la fuerza que ejerce la sangre en las paredes arteriales ◦.
DiuréticosSimpaticolíticos Inhibidores de la actividad angiotensínica Inhibidores del canal de Ca²+ Vasodilatadores Tiazidicos Diuréticos.
ROJO Y AZUL COLORES. ROJO ES AZUL AZUL Y ROJO.
Rol del canal de potasio kir 7.1 en el riñon
1.Fundamentos del microscopio óptico 1.1 El microscopio de campo claro 1.2 Tinción de microorganismos para su observación al microscopio de campo claro.
Resultados restricción del plásmido
Transcripción de la presentación:

Uso de la fluorescencia en estudios fisiológicos Claudia Pizarro Diego Manque

Canal de potasio TASK2 Pertenece a la familia de canales de potasio K2P. Regulan el potencial de membrana en reposo. Regulan el volumen celular.

Angiotensina II Es una hormona peptídica que tiene como función regular la presión arterial. Además, aumenta la reabsorción de Na+ en los túbulos contorneados proximales.

¿Puede la angiotensina II modular el potencial de membrana en presencia de TASK2?

Transformación de células competentes DH5α Se transformó con el plásmido Task 2/ p CR3.1 Extracción de DNA plasmidial 200 µl

Ensayo de restricción y cuantificación del DNA plasmidial Enzima de restricción: EcoRI 2,9 µg/µl

Transfección de la línea estable HA-AT1 GFP con TASK2 etiqueta Receptor de angiotensina I Proteína verde fluorescente Se transfectó 0,7 µg de DNA plasmidial. Se monitorearon por fluorescencia 4 horas después.

Sondas utilizadas en los experimentos Microscopio confocal Sondas utilizadas en los experimentos Rhod 2: sirve para ver las concentraciones intracelulares de calcio. Su espectro de emisión cae en el rojo. FluoVolt: nos permite ver cambios en el potencial de membrana. Su espectro de emisión cae en el color verde.

HA – AT1 GFP Rhod2 FluoVolt merge

Rhod2 FluoVolt

Variación de la Fluorescencia de la sonda FluoVolt en células transfectada con TASK2 Ang II 1 µM K 100mM K 0,5mM FluoVolt

Conclusión Se aprecia una pequeña despolarización en la células HEK293 con el AT1 y el canal de K+ TASK2 en presencia de Angiotensina II. En cambio, la respuesta de las células en ausencia del TASK2 no muestra una variación de la fluorescencia de la sonda FluoVolt cuando se le agrega angiotensina II.