Diagnostico de Laboratorio Infección Respiratoria Aguda Grave IRAG

Componente de laboratorio Ante la detección de caso inusitado o conglomerado de IRAG Tomar muestra Menores de 5 años de edad: aspirado nasofaríngeo hasta 72 horas del inicio de los síntomas; De 5 años y más de edad: hisopado nasal y faríngeo combinado hasta 72 horas del inicio de los síntomas; Muestra de sangre – serología; Hemocultivo.

Infección Respiratoria Aguda Grave IRAG Posibles patógenos: ejemplos Hantavirus Virus de la dengue Leptospira Virus de la influenza Bacilo diftérico Estreptococo Pertusis Virus Sincitial Respiratorio Bacterias responsables de las neumonías SANGRE 2 muestras Fase aguda y convalecencia Sangre Muestras Hisopado de faríngeo (faringe posterior) Hisopado o aspirado Nasal o nasofaríngeo Estudios de laboratorio Cultivo, serotipificación, detección de antígenos, niveles de anticuerpos, susceptibilidad Fuente: adaptado de WHO- Guidelines for collection of clinical specimens during field investigation of outbreaks.

Métodos de Laboratório Diagnostico de Influenza

Diagnostico de Laboratorio de Influenza Es una herramienta esencial: En la detección y en la identificación temprana de agentes etiológicos. En la identificación oportuna de un nuevo subtipo de influenza (con potencial pandémico).

La sensibilidad y la especificidad de cualquier método de diagnóstico es influenciado por: El tipo de prueba Los procedimientos de ejecución de la técnica El espécimen clínico utilizado Momento de la toma de muestra Origen de la muestra Calidad de la muestra

El éxito del diagnostico virológico de influenza depende de: La toma de muestra dentro de las 72 horas del inicio de los síntomas El procedimiento adecuado de colección del espécimen Las condiciones de envío y del almacenamiento de las muestra antes de procesarla en el laboratorio

Colección de muestras clínicas Hisopo nasal y de faríngeo combinados Aspirado nasofaringeo Aspirado transtraqueal Lavado bronquioalveolar Sangre Situaciones Especiales (UCI)

Faríngeo

Foto autorizada por Dr. Hector Chiparelli - Uruguay

Fotos autorizadas por Dr. Hector Chiparelli - Uruguay

Métodos Imunofluorescencia indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza

Imunofluorescencia Detecta Influenza A, B; parainfluenza 1,2,3; VRS- virus sincitial respiratorio y adenovirus. Importante método para el diagnóstico diferencial entre los principales virus respiratorios. Pode ser realizado en centros de referencia o en el centro nacional de influenza.

Tinción por Inmunofluorescencia Indirecta de células de aspirado traqueal World Bank Training by Alexander Klimov, CDC

Métodos Imunofluorescencia Indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza

Cultivo Del Virus Para el aislamiento viral Técnica de alta sensibilidad pero compleja Realizada en el CNI o en el centro de referencia Importante por que permite disponibilidad de cepas virales para la producción de vacuna

Métodos Imunofluorescencia Indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza

Técnicas Moleculares Detecta el RNA viral presente en las muestras clínicas y en cultivos virales Alta sensibilidad Altísima complejidad Realizado en CNI, laboratorio de referencia. Método rápido: 24 hrs. para diagnóstico y caracterización

Métodos Imunofluorescencia Indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza

Serología Se utiliza para complementar el diagnóstico Realizado con muestras pareadas de suero del paciente, tomadas con un intervalo de dos semanas (fase aguda y convalesciente) Métodos: Test de Inhibición de la Hemoaglutinación (HI) Inmunoensayo de enzimas (ELISA) Prueba de neutralización del virus en cultivo de células Western Blot

Interpretación de los análisis de serología IHA Modulo 6: Manejo de Laboratorio Muestra Aguda Convaleciente Interpretación Bajo título No hay evidencia de infección Alto título Seroconversión (evidencia de infección reciente) Infección en el pasado imposible de determinar Ahora veamos cómo interpretar los resultados de los análisis de serología: Si tanto la muestra aguda como la muestra convaleciente presentan bajos niveles de los anticuerpos específicos de la influenza aviar, no hay evidencia de infección. Si la muestra aguda presenta bajos niveles de anticuerpos y la muestra convaleciente presenta altos niveles de los anticuerpos específicos de la influenza aviar, se da lo que se conoce como seroconversión. Esto es evidencia de que hay infección causada por la influenza aviar. Cuando los niveles de anticuerpos, tanto en la muestra aguda como en la convaleciente son altos, el análisis es inconcluso. Es posible que haya habido una exposición pasada a la influenza aviar. Sin embargo, no es probable que la infección actual sea causada por la influenza aviar.

Métodos Imunofluorescencia Indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza

Prueba Rápida para Influenza Apoya en la investigación de brotes de los equipos de respuestas rápida Apoya la decisión de iniciar tratamiento con antivirales antes de las 48 hrs.

Prueba Rápida para Influenza Desventajas: No recomendada para la vigilancia epidemiológica. No permite la identificación del subtipo viral. Obtención de resultados falsos negativos. Algunos Kits no realizan la identificación del tipo viral A/B. Costo elevado. Baja sensibilidad comparada al aislamiento viral. Tiene 70% de sensibilidad y 90 % de especificidad (CDC)