Laboratorio de Oncofarmacología Traslacional Centro de Investigación del Cáncer CSIC-Universidad de Salamanca

Procedimiento general Compañías farmacéuticas Ambiente académico / universitario Diseño y desarrollo “In vitro” “In vivo” Estudio preclínicos Estudios clínicos

Eficacia en líneas celulares Citotoxicidad MTT Proliferación BrdU (ELISA)

Eficacia en líneas celulares Modelos celulares sensibles y resistentes a fármacos convencionales. Sensible Resistente MM1S MM1R RPMI-8226 RPMI-LR5 RPMI-Dox40 U266 U266-LR7 U266-Dox40 OPM-1 OPM-2 MM144 INA-6 NCI-H929

Eficacia en células de pacientes Aspirado de MO Lisis de hematíes: NH4Cl Cultivo con fármaco Citometría de flujo Marcaje simultáneo AcMo Anexina V Identificación de poblaciones Apoptosis

Mecanismo de acción En todos los fármacos se analizarán vías generales, y en cada uno de ellos se realizarán estudios complementarios en función de sus dianas biológicas específicas. a. Estudios de apoptosis: Se utilizarán técnicas de Anexina-V por citometría de flujo y Western-Blot para conocer las principales proteínas implicadas en la muerte celular. b. Análisis del ciclo celular mediante citometría de flujo, y en caso de observar alguna alteración importante se analizarán las principales proteínas de ciclo celular mediante Western-Blot.

Mecanismo de acción c. Estudios de vías de señalización celular: Asimismo se estudiarán mediante Western-Blot el efecto causado por el tratamiento con las drogas sobre las vías más importantes de proliferación celular como son Erk, PI3K/AKT, NFkB, JAK/STAT. d. Estudios de farmacogenómica: Se analizarán las modificaciones producidas en el perfil de expresión génica por los fármacos que se van a estudiar. En muchos casos, estos estudios serán el punto de partida para la realización de otros estudios más específicos que delinearán mejor el mecanismo de acción.

Estudios “in vivo” Xenoinjertos de células tumorales CB17-SCID, nude Hembras 4-6 semanas Ratones Ratones modificados genéticamente Ratones HER2, BRCA1/p53 condicional Peso corporal Volumen tumoral Supervivencia Monitorización

Estudios de bioluminiscencia Estudios “in vivo” Estudios de bioluminiscencia AEW541 50 mg/ml

Evaluación de Eficacia Preclínica de 8 fármacos de UNIVALI (Brasil) en Mieloma Múltiple y Cáncer de Mama Triple Negativo Laboratorio de Oncofarmacología Traslacional Centro de Investigación del Cáncer (CIC-IBMCC) Salamanca

Eficacia Preclínica de 8 fármacos de UNIVALI (Brasil) en dos modelos celulares de Mieloma Múltiple

Eficacia de CH3ACIB en MM1S 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de CH3ACIBPZ en MM1S 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de CH3ACIBPNH en MM1S 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de ClisCTCH3B en MM1S

Eficacia de CINFM en MM1S 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de DCINFM en MM1S 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de TZDCIA en MM1S 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de TZDSO2CIA en MM1S 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de CH3ACIB en RPMI8226 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de CH3ACIBPZ en RPMI8226 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de CH3ACIBPNH en RPMI8226 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de ClisCTCH3B en RPMI8226 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de CINFM en RPMI8226 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de DCINFM en RPMI8226 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de TZDCIA en RPMI8226 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de TZDSO2CIA en RPMI8226 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Evaluación de Eficacia Preclínica de 8 fármacos de UNIVALI (Brasil) en Cáncer de Mama Triple Negativo

Eficacia de CH3ACIB en MDAMB231 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de CH3ACIBPZ en MDAMB231 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de CH3ACIBPNH en MDAMB231 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de ClisCTCH3B en MDAMB231 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de CINFM en MDAMB231 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de DCINFM en MDAMB231 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de TZDCIA en MDAMB231 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%

Eficacia de TZDSO2CIA en MDAMB231 23.14 % Anexina + 24.38 % Anexina + 83%