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CONTAMINACION MICROBIANA DE AGUA PARA HEMODIALISIS RELEVAMIENTO

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Presentación del tema: "CONTAMINACION MICROBIANA DE AGUA PARA HEMODIALISIS RELEVAMIENTO"— Transcripción de la presentación:

1 CONTAMINACION MICROBIANA DE AGUA PARA HEMODIALISIS RELEVAMIENTO
PERIODO 7/ /05 LABORATORIO BELTRAN - ZUNINO

2 Evaluación de calidad microbiológica de agua
para hemodiálisis - Número de centros evaluados: 31 - Número total de muestras: 4.107 - Período de estudio: 1/7/ /6/05

3 Requisitos microbiológicos/ metodología

4 Requisitos microbiológicos/ metodología

5 Requisitos microbiológicos/ metodología

6 Análisis microbiológicos
Análisis microbiológicos - Recuento de heterotróficos/ml - Búsqueda de Pseudomonas fluorescens, putida y aeruginosa / 10 ml - Recuento de coliformes totales /100 ml - Búsquedas eventuales de microorganismos específicos Análisis biológicos - Endotoxinas bacterianas

7 Metodología de Referencia :
Análisis microbiológicos: Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, American Public Health Association, (APHA), 20 Ed. Alcance y aplicación: métodos destinados al análisis de agua pertenecientes a un amplio rango de calidad: agua potable, industrial, superficie, etc. Métodos tomados como referencia por la USP para el análisis para uso farmacéutico. Endotoxinas bacterianas: US Pharmacopeia

8 Toma de muestra Técnica Aséptica Abrir llave descartar (según flujo)
Recoger la muestra (120 ml) Técnica Aséptica Quemar o sanitizar pico Refrigerar/ transportar Analizar (máx. 24 hs) Descartar aprox. 200 ml

9 Recuento de Heterotróficos
Referencia: Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, A.P.H.A., 20 Ed., 9215 C. Muestra 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml Condiciones de Incubación: 72 horas a 35 +/- 1 º C Examen de colonias con lente magnificador Medio de cultivo: Plate Count Agar

10 Búsqueda de Pseudomonas aeruginosa
Referencia: Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, A.P.H.A., 20 Ed., F. Muestra Caldo asparagina doble concentración 48 horas a 35 º Luz UV Examinar fluorescencia (si hay dudas dejar 24 hs a t. Amb.) Confirmar P. aeruginosa + 10 ml

11 Recuento de coliformes totales
Referencia: Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, A.P.H.A., 20 Ed. , 9222 B. 100 ml Filtrar membrana 0,45 micras + Confirmar C. totales Muestra Incubar 24 hs a 35 +/- 1 ºC Transferir a m-Endo

12 Coliformes totales en m - Endo Coliformes totales en Lauril Triptosa P. aeruginosa en caldo asparagina al UV (258 nm)

13 Biofilm luego de un tratamiento desinfectante

14 Determinación de endotoxinas bacterianas
Principios biológicos: En presencia de endotoxinas bacterianas, el reactivo preparado por lisado enzimático de amebocitos lavados del cangrejo Limulus polifemus produce una reacción de coagulación en cascada con la formación de un coágulo de naturaleza proteica

15 1. Confirmación de sensibilidad de reactivo LAL ()
2 3 4 ½ 2  ¼  Control - agua apírógena + LAL  = UE/ml Criterio aceptación:  obtenida entre ½ y 2 del valor declarado

16 2. Determinación de endotoxinas en muestra problema
Controles + Control - - Ensayo por duplicado utilizando una dilución de la muestra, control positivo de endotoxina, verificación de ausencia de efecto inhibidor de la muestra problema y control negativo - Informe: menor (<) o mayor o igual (>=)que el límite de detección definido (2 UE/ml)

17 Condiciones ambientales
Confiabilidad de los resultados Equipos - autoclaves - estufas - filtros Medios reactivos/ materiales Sistema de gestión de calidad Método Confiabilidad Condiciones ambientales Muestreador/ Analista

18 RESULTADOS ANALITICOS
1º Julio Junio 2005

19 % Heterotróficos < 200 ufc/ml según punto de muestreo
Período 7/02 - 6/05 C Ab O Pt Ps Sl Rc Pretratamiento: 75,1 % Agua tratada: 93,2% Nº Muestras = 4107 Nº Centros = 31

20 % Heterotróficos - Circuito agua tratada
Comparación de trieños / 02-05 Nº muestras = 1384/2923 Nº centros = 31 / 31

21 % Heterotróficos < 200 ufc/ml
Pico de Sala % Heterotróficos < 200 ufc/ml Evolución anual Nº muestras = 1.917 Nº centros = 29

22 % Heterotróficos según centro de diálisis
Agua tratada % Heterotróficos según centro de diálisis Enero Junio 2005 Centro Nº Nº Muestras = 617 Nº Centros = 23

23 % Heterotróficos según centro de diálisis
Agua tratada % Heterotróficos según centro de diálisis Julio Junio 2000 Centro Nº Nº Muestras = 885 Nº Centros = 21

24 % Heterotróficos - Cultivo de baño
Julio Junio 2005 Nº muestras baño = 171 Nº centros = 9

25 % P.aeruginosa, fluorescens y putida (+) según punto de muestreo
7/02-6/05 Nº muestras = Total (+) = 2,5 % (sin Bñ) Nº centros = 30 Nº centros implicados = 16 centros Ose C Ab O Ps Sl R Baño

26 % P. aeruginosa (+) - Evolución
7/97 - 6/00 7/02-6/05 C Ab O Ps Baño C Ab O Ps Baño

27 % P. aeruginosa , flourescens, putida (+) según punto de muestreo
7/ /04 1/05 - 6/05 % Nº centros implicados año 2005: 13 centros Nº muestras 2005 = 1.231 Total (+) 2005 = 5,4% Ose C Ab O PS Ose C Ab O PS

28 % Coliformes (+) según punto de muestreo
7/02-6/05 Nº centros implicados: 12 centros Nº muestras = 3.645 Total (+) = 0,8 % Ose C Ab O Ps Sl Rc

29 % Coliformes (+) según punto de muestreo
7/97 - 6/00 7/02-6/05 Nº centros implicados: 12 centros C Ab O Ps Sl Ose C Ab O Ps Sl

30 % Coliformes (+) según punto de muestreo
7/ /04 1/05-6/05 Nº centros implicados año 2005: 9 centros Ose C Ab O Ps Sl Ose C Ab O Ps Sl Nº muestras 2005 = 1.159 Total (+) = 1,2%

31

32 Endotoxinas bacterianas
Nº Muestras: 13 Nº Centros: 5 Resultados positivos: 0 Límites de detección: 5 y 2 UE/ml

33 CONCLUSIONES Mejora sistemática del nivel de heterotróficos en el agua
tratada: 93,2% muestras aceptables Problemas de Pseudomonas y Coliformes en el año 2005 en diversos centros Problemas de Pseudomonas y Coliformes en el año 2005 en el agua de entrada No se ha extendido el control de endotoxinas bacterianas


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