EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 ENZIMAS; CINÉTICA ENZIMÁTICA PROF. ADJ. CRISTINA MIER.

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1 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 ENZIMAS; CINÉTICA ENZIMÁTICA PROF. ADJ. CRISTINA MIER

2 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 DEFINICIÓN : NATURALEZA :PROTEÍNAS FUNCIÓN: CATALIZADORES (BIOLÓGICOS) 1900- 1955:TGO/AST

3 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 NOMENCLATURA: SUSTRATO + ASA NOMBRE TRIVIAL O PRÁCTICO(PEPSINA) NOMENCLATURA SISTEMATIZADA :IUB,1955 ENZIME COMISSION: EC

4 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 4 DÍGITOS SEPARADOS POR PERÍODOS(PUNTOS) 1º : DEFINE LA CLASE POR EL TIPO DE REACCIÓN 1)OXIDORREDUCTASAS 2)TRANSFERASAS 3)HIDROLASAS 4)LIASAS 5)ISOMERASAS 6)LIGASAS

5 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 2º)SUBCLASE 3º SUB –SUBCLASE 4º)Nº ESPECÍFICO DE SERIE EC 1.1.1.27 :LDH EC 1.4.1.3: GLDH EC 2.6.1.1 :AST EC 2.6.1.2 :ALT

6 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 ESTRUCTURA PROTEICA: PRIMARIA SECUNDARIA TERCIARIA CUATERNARIA DETERMINA :ACTIVIDABIOLÓGICA(AFINIDAD,VELOCIDAD) SITIO ACTIVO CARACTERÍSTICO INTEGRIDAD: DESNATURALIZACIÓN

7 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 INTEGRIDAD: DESNATURALIZACIÓN ALMACENAMIENTO (CONTAMINACIÓN, TEMPERATURA,PH) CATALIZADOR:SUSTANCIA QUE INCREMENTA LA TASA DE UNA DETERMINADA REACCIÓN QUÍMICA SIN SER CONSUMIDA NI ALTERADA. FISIOLOGÍA MÉTODOS DE LABORATORIO

8 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 SITIA ACTIVO : ESPECIFICIDAD (POR EL SUSTRATO) VARIAS FORMAS: ESTEREOESPECIFICIDAD DE GRUPO ISOENZIMAS: CATALIZAN LA MISMA REACCIÓN: (ESTRUCTURA CUATERNARIA) (ORIGEN GENÉTICO, HERENCIA,POLIMORFISMOS) ORIGEN EMBRIOLÓGICO,ORGANOESPECÍFICAS ISOFORMAS : POR PÉRDIDA DE AA VALOR DIAGNÓSTICO Y EVOLUTIVO

9 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 CINÉTICA ENZIMÁTICA S Sa Pa P E + SES P+E LA ENZIMA DISMINUYE LA ENERGÍA ACTIVACIÓN k1k2 K -1 k1 + k 2 /k-1 = KM

10 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 KM : CONSTANTE DE MICHAELIS Y MENTEN CARACTERÍSTICA DE CADA REACCIÓN 2 TIPOS DE CINÉTICA : ORDEN 1 (CONC. DE SUSTRATO VARIABLE) ORDEN 0(CONC. SUSTRATO 10-100 VECES EL VALOR DEL KM ) VEL= 91% DE V. maxima

11 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 DETERMINACIÓN DE AC. ENZIMÁTICA : ORDEN O DETERMINACIÓN DE SUSTRATO (ENZIMAS SON REACTIVOS): ORDEN 1 REACCIONES ACOPLADAS O INDICADORAS

12 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 FACTORES QUE DETERMINAN LA CINÉTICA: pH ÓPTIMO (7-8 EL MÁS HABITUAL)(VARÍA EL KM) TEMPERATURA: Q 10 ES LA TASA DE INCREMENTO DE VELOCIDAD POR CADA 10ºC DE INCREMENTO DE TEMP. ACTIVACIÓN Y DESNATURALIZACIÓN SON SIMULTÁNEAS MÉTODOS :37ºC COFACTORES:COENZIMAS:NAD,NADP,ATP METALES:Ca, Mg

13 EUTM,BIOQUÍMICA,DRA. MIER,2006 ANTIGÉNOS: MASA (NO ACTIVIDAD) APLICACIÓN: ENZIMAS COMO MARCADORES TUMORALES ES DISCUTIDO