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Cinética Enzimática
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Funciones de las Proteínas
Las funciones de las proteínas son específicas de cada tipo de proteína y permiten a las células defenderse de agentes externos, mantener su integridad, controlar y regular funciones, reparar daños… Todos los tipos de proteínas realizan su función de la misma forma: Por unión específica de otra molécula o ión (ligando o ligante) De la unión se derivan: Formación de estructuras celulares (Proteínas fibrosas) Transporte y almacenamiento Reactividad específica (catálisis) Cambios conformacionales (alosterismo, motores moleculares, transmisión y transducción de señales)
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Enzimas • Las enzimas son catalizadores biológicos que disminuyen la energía de activación de las reacciones que catalizan, pero no modifican la constante de equilibrio. • Por tanto aceleran en igual proporción la velocidad de la reacción en las dos direcciones.
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Irreversible simplificada
Reacciones catalizadas por enzimas Reversible Irreversible simplificada
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Curva de Evolución de los componentes de la reacción
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Leonor Michaelis (der)
Maud Menten (izq) Leonor Michaelis (der)
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Variables de la ecuación de velocidad
Variable dependiente: velocidad inicial Variables independientes: A) Concentración de enzima B) Concentración sustrato
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Bajo qué condiciones aplica la ecuación de Michaelis-Menten
Velocidad inicial No añadir producto al medio de ensayo Concentraciones de sustrato muy superior a la concentración de la enzima La concentración de sustrato debe permanecer “casi” constante durante el periodo de tiempo en que se mide la reacción
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Representación gráfica de la ecuación de Michaelis-Menten
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Transformación de la ecuación de Michaelis-Menten
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Paramétros cinéticos Son las constantes que aparecen en la ecuaciones de velocidad Están compuestos por las constantes de velocidad de los pasos que constituyen la reacción catalizada
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Unidades
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Velocidad máxima
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Constante catlítica (kcat)
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Constante de Michaelis-Menten (Km)
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Constante de especificidad
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Factores que afectan la velocidad
Concentración de sustrato o sustratos (cofactores) Concentración de enzima Inhibidores Activadores pH Temperatura
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Determinación de los parámetros cinéticos
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Regulación de la actividad enzimática por union a la enzima de ligandos que no son sustratos
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Tipos de Inhibidores
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Sólo se afecta la Km
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Afecta la Km y Vmax
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