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EVIDENCIA EX VIVO E IN VIVO DEL EFECTO PROLIFERADOR DE LA 1,25(OH)2D3 SOBRE LAS CMLV. PAPEL MEDIADOR DEL VEGF.

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1 EVIDENCIA EX VIVO E IN VIVO DEL EFECTO PROLIFERADOR DE LA 1,25(OH)2D3 SOBRE LAS CMLV. PAPEL MEDIADOR DEL VEGF

2 Métodos CMLV de aorta de rata Sprague-Dawley calcitriol Concentraciones diferentes CMLV Cultivo primario + Factor trófico: FGF

3 Efecto del calcitriol en la expresión de VDR VDR expression (%) 0 h12 h16 h24 h ,25(OH) 2 D 3 (100nM) 51 kD * *

4 Efecto del calcitriol en la proliferación de las CMLV in vitro * # # % over control 1,25(OH) 2 D 3 (nM) bFGF (ng/mL)

5 6.9% IN S PHASE 11.1% IN S PHASE 27.9% IN S PHASE 6.7% IN S PHASE 24.9% IN S PHASE 55.2% IN S PHASE TIME (HOURS) WITHOUT 1,25(OH) 2 D 3 WITH 100nM 1,25(OH) 2 D 3 Efecto del calcitriol en la progresión del ciclo celular de las CMLV in vitro

6 Efecto del calcitriol en la expresión de VEGF en las CMLV in vitro VEGF expression % * * pmols/4000 cells *

7 Efecto del VGA1102 en la proliferación de CMLV inducida por calcitriol % over control 1,25(OH) 2 D 3 (100nM) VGA1102 (1 M) * MTT Assay

8 % over control 1,25(OH) 2 D 3 (100nM) Anti VEGF (0.6 g/mL) * Efecto de anticuerpos anti-VEGF en la proliferación de CMLV inducida por calcitriol

9 Posible VDRE en el gen del VEGF 9721 CCTGGAGAAGCCGGGGCCCGAGAAGAGAGGGGAGAAAGAGAAGGAAGAGGAGAGGGGGCC GCAGTGGGCGCTCGGCTCTCGGGAGCCGGGCTCATGGACGGGTGAGGCGGCGGTGTGCGC AGACAGTGCTCCAGCCGCGCGCGCGCCCCAGGCCCCGGCCCGGGCCTCGGTTCCAGAAGG GAGAGGAGCCCGCCAAGGCGCGCAAGAGAGCGGGCTGCCTCGCAGTCCGAGCCGGAGAGG GAGCGCGAGCCGCGCCGGCCCCGGACGGGCCTCTGAAACCATGAACTTTCTGCTCTCTTG GGTGCACTGGACCCTGGCTTTACTGCTGTACCTCCACCATGCCAAGGTAAGCGGTCGTGC CTGGGCCCGTAAGCATTTACTAACTACTCTCCCTGCTAAAAGAGAGCCATCCGGGAGGTG ACTCAGGGCAGCTATGATAGGCCAGATGGGATGGGGTGGCTTTTTTCCTCATAAGATCCT CATAACATTGCTCCATTGAAATTGGGGTTCCCAACAGGTACCAGCATCCCACGGAGCCTC AGTACTGTGTGCAGAGGGATGGAGATGGTGGAGTAACCTTTTCGGGGGACCAGTAGGAAG ACTGTTGGCTCCCTTTCTCAGAAGCTCAGCAGACCTGGGTGAGGGCTGGGACTGGTTGGT CCCTCTCTTCCCACAGGTATCAGAGCCCCCTCTTGTTCCCAGGGGAGCCTAGGAGCAGCT GGGCCAAAGCCCAACCAGGAATTTTTCCAGGCTGGTTCCTATATCCAAGGGTGGGCTGGA GGTGGGGGCTTTGGGGAGCTCTTAAGGAAGACACGAGGAGGTGAAGGGGACTTTGTGGAA

10 Métodos Anillos de aorta de rata Sprague-Dawley calcitriol CMLV Ex vivo

11 Efecto del calcitriol en la proliferación de las CMLV ex vivo A1 A2 B1 B2 % of positive nucleus *

12 Métodos Rata Sprague-Dawley Con 5/6 de reducción de masa renal 8 semanas calcitriol CMLV in vivo

13 Efecto del calcitriol en la proliferación de las CMLV in vivo B A1 A2 B1 B2 Control vit D 1 g/kg * % of positive nucleus

14 Efecto del calcitriol en la arquitectura de la aorta No treatment mm 2 Area of the media Media/lumen ratio * Calcitriol 1 g/kg Calcitriol 1 g/kg

15 Conclusión El calcitriol induce un aumento en la proliferación de las CMLV in vitro e in vivo. Este efecto está mediado por un aumento en la expresión de VEGF. El aumento de proliferación de las CMLV in vivo produce un cambio en la arquitectura vascular.


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