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DIAGÓSTICO DE HIV LIC. RICARDO SALDAÑA. Por: Lic. Ricardo Saldaña2 PRUEBAS DE LABORATORIO Métodos Directos: Evidencian/cuantifican la presencia de antígenos.

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1 DIAGÓSTICO DE HIV LIC. RICARDO SALDAÑA

2 Por: Lic. Ricardo Saldaña2 PRUEBAS DE LABORATORIO Métodos Directos: Evidencian/cuantifican la presencia de antígenos en la muestra. –PCR cualitativa, –PCR cuantificada –cultivo y aislamiento viral, –antigenemia P-24)

3 Por: Lic. Ricardo Saldaña3 PRUEBAS DE LABORATORIO Métodos Indirectos: –Evidencian la presencia o ausencia de anticuerpos totales en la muestra. –Son los más utilizados. Pruebas rápidas ELISA

4 Por: Lic. Ricardo Saldaña4 Diagnóstico de VIH Se usan dos niveles de pruebaserológicas: Pruebas de Tamizaje: Ensayos inmunoenzimáticos Test de aglutinación Test de detección rápida Tienen alta sensibilidad. La posibilidad de tener falsos negativos es bajo.

5 Por: Lic. Ricardo Saldaña5 Uni-Gold Recombigen Multispot HIV-1/HIV-2 Reveal G2 OraQuick Advance Pruebas rápidas disponibles en el mercado

6 Por: Lic. Ricardo Saldaña6 Ventajas de las pruebas rápidas de VIH Versatilidad y existencia de diferentes principios inmunológicos así como en las muestras biológicas que se pueden utilizar. No necesitan un laboratorio muy sofisticado para utilizarlas. La realización y la interpretación de los resultados obtenidos es fácil. Los resultados preliminares se obtienen en poco tiempo, y cuando se combinan los resultados definitivos los podemos obtener en menos de una hora Personal a nivel técnico las puede realizar con la debida capacitación y supervisión de un profesional con experiencia.

7 Por: Lic. Ricardo Saldaña7 Fortalezas de las pruebas rápidas de VIH Algunas se pueden almacenar a temperatura ambiente. Se optimiza el uso de los recursos y el tiempo comparado con el ELISA. Los resultados obtenidos son igual de confiables que los resultados del ELISA y con menos limitaciones técnicas. Algunas requieren poca inversión económica.

8 Por: Lic. Ricardo Saldaña8 Debilidades de las pruebas rápidas de VIH El costo comparado de estas pruebas con el ELISA puede a veces ser mayor. Presencia de falsos positivos por lo que necesitan confirmación de los resultados obtenidos. El periodo de ventana es mas largo por lo que podemos tener resultados falso negativo comparado con el ELISA de cuarta generación.

9 Por: Lic. Ricardo Saldaña9 Causas de resultado falso- positivo: Relativas al suero: Relativo a la calidad y manipulación de la muestra: Calidad, extracción, almacenamiento y contaminación de la misma, estabilidad y calidad de los reactivos. Relativas a la presencia de auto anticuerpos: –Presencia de enfermedades autoinmunes (AR, LES). Relativas a otras condiciones: –Vacunaciones, Enf. Virales, I Renal, Cirrosis, Enfermedades hemato -oncológicas, alcoholismo, embarazo, etc.

10 Por: Lic. Ricardo Saldaña10 Causas de resultado falso- negativo: Periodo de ventana Tratamiento con inmunosupresores Procesos malignos Trasplante de médula ósea Disfunciones de las Células B Factores reumatoides Pérdida de estabilidad de los reactivos Reactivos que detectan principalmente p24 Pobre respuesta inmune

11 Por: Lic. Ricardo Saldaña11 Selección de pruebas rápidas de VIH apropiadas Es necesario tomar en cuenta tres factores: –El objetivo de hacer la prueba. –Sensibilidad y especificidad de la prueba. –Prevalencia de la infección de VIH en la población que será tamizada con las pruebas.

12 Por: Lic. Ricardo Saldaña12 Elección de Pruebas rápidas de VIH Los tres objetivos para hacer un tamizaje de anticuerpos contra VIH son: –Tamizaje de donadores de sangre u órganos. –Para fines epidemiológicos –Diagnóstico de personas infectadas.

13 Por: Lic. Ricardo Saldaña13 Sensibilidad y especificidad de la prueba Estos dos factores son críticos para diferenciar entre una persona infectada y una que no está infectada. Pruebas alta mente sensibles disminuyen la posibilidad de obtener resultados falsos negativo. Las pruebas altamente específicas disminuyen la posibilidad de tener resultados falsos positivo. La mejor elección dependerá del objetivo de hacer la pruebas. Los estándares mínimos son: Sensibilidad >99% y especificidad >95% preferiblemente validadas en nuestra población.

14 Por: Lic. Ricardo Saldaña14 Sensibilidad y especificidad de las pruebas a Verdaderos Positivos b Falsos positivos a + b c Falsos negativos d Verdaderos negativos c + d a+cb + d Resultados De la prueba Sensibilidad = a / (a + c) Especificidad = d / (b + d) VPP = a / (a + b) VPN = d/ (c + d)

15 Por: Lic. Ricardo Saldaña15 Detección de anticuerpos contra el VIH Pruebas de Tamizaje Pruebas de Confirmación Sensibilidad Falsos negativos es bajo Falsos positivos es bajo Especificidad

16 Por: Lic. Ricardo Saldaña16 Prevalencia de la infección de VIH Definición: Casos positivos * 100% población total La prevalencia puede variar de población a población o en un hospital de servicio a servicio. A > prevalencia > VPP y < VPN A > prevalencia > VPN y > VPP

17 Por: Lic. Ricardo Saldaña17 Bioline VIH ½ 3.0 Estándar Diagnostic Principio: Análisis Inmunocromatográfico Prueba de 3ra. generación Interpretación:Visual Muestras: Suero, plasma y sangre (EDTA) Volumen de muestra:10µl Tiempo:20 minutos Sensibilidad: 100.0% Especificidad: 99.4%

18 Por: Lic. Ricardo Saldaña18 Pruebas de laboratorio Oraquick Determine Instanscreen

19 Por: Lic. Ricardo Saldaña19 DETERMINE: Prueba rápida Características : Principio: Análisis Inmunocromatográfico Interpretación:Visual Muestras: Suero, plasma y sangre (EDTA) Volumen de muestra:50µl Tiempo:30-35 minutos Sensibilidad: 99.6% Especificidad: 99.4%

20 Por: Lic. Ricardo Saldaña20 Immunocomb II Características: Principio: Ensayo inmunoenzimático Indirecto. Interpretación:Visual Muestras: suero y plasma Volumen:50µl Tiempo: 60 minutos Sensibilidad: 100% Especificidad: 99.4% No necesita equipo automatizado

21 Por: Lic. Ricardo Saldaña21 ORAQUICK Características Principio: Análisis Inmunocromatográfico Interpretación:Visual Muestras: Suero, plasma y sangre completa y fluído oral. Tiempo:30-35 minutos Sensibilidad: 99.6% Especificidad: 99.4%

22 Por: Lic. Ricardo Saldaña22 PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS

23 Muchas Gracias por su atención.


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