Realización de antibiograma de una cepa bacteriana. 1

Tubo con suero fisiológico estéril Materiales disponibles Tubo con suero fisiológico estéril Agar con bacterias Medio de cultivo Mueller Hinton torunda Plano de colocación Discos Antibioticos

1. Preparación del inoculo

1.1. Con un asa de siembra estéril, pon una colonia bacteriana en el agar de la placa de Petri . Advertencia! La muestra se realiza en asepsia alrededor del mechero Bunsen.

1.2. Haz una suspensión con esta colonia bacteriana en una tubo estéril con suero fisiológico (5mL). En el suero, frota el asa de inoculación en las paredes del tubo para dispersar todas las bacterias. 1.3. Repite 4 veces, para tener introducidas 5 colonias bacterianas en el tubo. ADVERTENCIA! La muestra se realiza en asepsia alrededor del mechero Bunsen.

I 1.4 Homogeneiza tu tubo mediante rotación manual y escribe « I » en este tubo.

2. Inoculación del medio Mueller Hinton antibiograma

2.1. En el tubo de inoculación “I”, inserta una torunda estéril. Humedece la torunda y escurre el exceso de líquido en la pared del tubo. ADVERTENCIA! La muestra se realiza en asepsia alrededor del mechero Bunsen.

2.2. Inocúlalo en el medio de Mueller Hinton por extensión de la torunda en su superficie. Consigue estrías estrechas. 2.3. Reproduce la operación dos veces rotando 60° la caja cada vez para asegurarnos una buena distribución del inóculo en la superficie del medio: 60° = Rayas en 3 pases

2. Coloca los discos antibióticos.

3.1. Posiciona el agar Mueller Hinton previamente sembrado en el plano de depósito previsto. 3.2. Con unas pinzas estériles, situa los discos antibioticos en la superficie de agar Cuando rellenas con discos, aplica una pequeña presión para segurar el mantenimiento del disco, pero no demasiado para evitar el riesgo de perforación del agar.

Incuba la caja, en la posición invertida, 16 h a 37°C mínimo 4. Incubación de medio Incuba la caja, en la posición invertida, 16 h a 37°C mínimo

5. Analiza tus resultados

5.1. Tras la incubación, mide el diametro de las zonas de inhibición del crecimiento alrededor de los discos de antibióticos

5.2. Usa la tabla de lectura, para concluir la sensibilidad o la resistencia de la cepa a los diferentes antibióticos testados Antibiótico testado Resistencia si el diametro de inhibición es menor que : Sensible si el diametro de inhibición es mayor que: Ampicilina 14 mm 19 mm SXT 10 mm 16 mm Eritromycina 17 mm 22 mm Gentamicina

6. Conclusión Sugiere un antibiótico adecuado para el tratamiento de la infección nosocomial causada por tu bacteria