KOH Examen directo KOH - NaOH 20 – 40X.

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1 KOH Examen directo KOH - NaOH 20 – 40X

2 Hifas hialinas septadas con o sin ramificación
Piel - Uñas Hifas hialinas septadas con o sin ramificación a veces se fragmentan en artroconidios Hifas toruloídeas o hifas alteradas

3

4 Pelos: 3 tipos de parasitismo
Ectotrix: artroconidios en el exterior del pelo. (Microsporum canis) Ectotrix

5 Endótrix Fávico artroconidios e hifas en el interior del pelo
burbujas de aire en el interior del pelo, hifas y artroconidios en el interior y exterior.

6 Sabouraud (Sb) glucosado Agar papa (PDA)
4. Cultivo Sabouraud (Sb) glucosado Agar papa (PDA) Lactrimel pigmentos y fructificación DTM (Dermatophyte test medium) rojo de fenol que en presencia de metabolitos alcalinos producidos por los dermatofitos vira el color del medio amarillento a rojo Agar Miel de Sabouraud

7 Incubación: 25-28ºC 35-37ºC Tiempo: h\ 15 días 4. Cultivo
con antibióticos (cloranfenicol \ estreptomicina) con y sin cicloheximida Inhibe especies de Scopulariopsis, Fusarium, Endersonula, Trichosporon, Aspergillus

8 Observación Descripción Detalle
Identificación Observación Descripción Detalle

9 Morfología macroscópica
Identificación Colonias alcanzan su madurez y estabilidad entre 2-3 semanas. Se debe considerar: Textura (glabra, algodonosa granular, pulverulenta, etc) Topografía (rugosa, crateriforme, verrucosa, plegada) Color de la superficie y reverso de la colonia Velocidad de crecimiento Difusión de pigmento

10 MORFOLOGIA MICROSCOPICA
Macro conidios (15-90 micras) Hifas hialinas septadas, ramificadas. Conidios: Macroconidios y microconidios. Micro conidios (2-5 micras) Permiten la diferenciación en 3 géneros

11 Género Microsporum Macroconidios:
paredes gruesas, rugosas, fusiformes de tamaño variable, multiseptados (1-15 septos), Microconidios: - sésiles, pedicilados o clavados, escasos o ausentes (en algunas especies) - generalmente se disponen solitarios a lo largo de la hifa. (abundantes)

12 M. canis 180. Culture of M. canis on mycobiotic agar showing a spreading whitish, cottony surface growth with a golden-yellow reverse pigment. Note non-pigmented strains may occur.

13 M. gypseum 213. Culture of M. gypseum on mycobiotic agar showing a flat, spreading suede-like to granular, tawny-buff cinnamon coloured surface. Many cultures develop a central white downy umbo (dome) or a fluffy white tuft of mycelium and some also show a narrow, white periphery. A yellow-brown pigment is usually produced on the reverse, however a reddish-brown reverse pigment may be present in some strains.

14 Género Epidermophyton
E. floccosum Macroconidios : ampliamente clavados, extremos redondeados, paredes lisas y delgadas con 1-4 septos (gralmente abundantes) nacen solitarios o en racimos. No produce microconidios

15 E. floccosum 160. E. floccosum on mycobiotic agar. Colonies are usually greenish-brown or khaki coloured with a suede-like surface, raised and folded in the centre, with a flat periphery and submerged fringe of growth (slides 160 and 161). Older cultures may develop white pleomorphic tufts of mycelium (slide 161). A deep yellowish-brown reverse pigment is usually present (slide 162).

16 Trichophyton (abundantes) Microconidios:
- globosos, piriformes, clavados, sésiles, pedicilados, - nacen solitarios a lo largo de la hifa o como racimos de uvas. Macroconidios: Paredes delgadas y lisas , 1-12 septos, nacen solitarios o en racimos. Forma: variable, elongados (làpiz), clavado, fusiforme, cilindrofusiforme, extremo distal romo.

17 Trichophyton rubrum

18 Trichophyton mentagrophytes

19 T. interdigitale 259. T. mentagrophytes var. interdigitale on mycobiotic agar. Cultures are white or cream coloured, fluffy or downy, later becoming suede-like due to the production of numerous microconidia. Reverse side of the thallus may be non-pigmented or yellow-brown to red-brown in colour.

20 Trichophyton mentagrophytes
326. T. rubrum downy type on Kaminski's Lactritmel agar (Mycopathologia 1985; 91:57-59). Cultures are generally white, suede-like to downy with a characteristic deep wine-red reverse pigment. Note no reverse pigment is produced when these strains are grown on 1% peptone agar.

21 Determinación de caracteristicas fisiológicas o bioquímicas
contiene rojo de fenol, cuando se hidroliza la urea, se libera amonio, alcalinizando el medio Prueba de la ureasa Agar urea de Christensen: diferencia T rubrum de T. mentagrophytes Positivo : aparición de color rojo donde se inoculó la cepa incógnita Interpretación : T rubrum : negativo T mentagrophytes : positivo Incubar a 25° y leer diariamente hasta el 7° día

22 Perforación del pelo “in vitro”
Propósito : Diferenciar T.rubrum de T mentagrophytes detecta la formación de órganos perforadores. Técnica : - Colocar segmentos de pelo humano (pre-púberes ) de mm en una placa de petri. Autoclavar 120°C por 15 min. - Agregar 20 ml de agua destilada esteril y 2-3 gotas de extracto de levadura al 10% esterilizado previamente por filtración. - Inocular las placas con la colonia en estudio . -Incubar las placas a 25°C en oscuridad y examinar semanalmente durante 4 semanas. Lectura : Observación microscópica del pelo. Perforaciones en forma de cuña que penetran radialmente el pelo Interpretación : T. mentagrophytes: perfora el pelo. T. rubrum: crece y no perfora.

23 FIN!!!!!