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Publicada porConcha Somera Modificado hace 10 años
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ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO I: CONJUGACIÓN
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Composición de los ácidos nucleícos
Purinas Pirimidinas Adenina Guanina Citosina Uracilo Timina
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Polímeros lineales de nucleótidos
Polímeros lineales de nucleótidos. Nucleótidos cuyos grupo fosfato unen las posiciones 3’ y 5’ de residuos de azúcar consecutivos. Los fosfatos de estos polinucleótidos tienen carga negativa a pH fisiológico
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DNA 22 to 26 Å ancho
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Plásmidos Fragmentos de ADN extracromosómicos. Los plásmidos o vectores se replican y transcriben de manera independiente del AND cromosómico.
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Algunas características de los plásmidos:
Confieren resistencia a antibióticos. Confieren resistencia a metales. pBR322
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Mecanismos de transferencia horizontal de material genético:
Transformación Transducción Conjugación
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Cambio heredable de una célula u organismo conseguido por DNA exógeno
Cambio heredable de una célula u organismo conseguido por DNA exógeno. Sólo algunas bacterias pueden ser transformadas, éstas reciben el nombre de competentes.
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El virus bacteriófago se comporta como un vector intermediario entre dos bacterias.
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Fusión temporal de dos organismos unicelulares para el intercambio sexual de material genético
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Factor F Elemento en plásmido que le confiere la capacidad de ser transferido de una bacteria que lo posee a una bacteria que carece de este factor por conjugación. Este factor es portado en el episoma* F * Episoma: elemento genético en bacteria que se puede replicar libre en el citoplasma o puede ser insertado y replicado en el cromosoma bacteriano. Un ejemplo de episoma es el plásmido
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Tipos de plásmido de acuerdo al factor F
Plásmidos conjugativos contienen “tra-genes”, los cuales ejecutan complejos procesos de conjugación, como la transferencia de plásmidos a otra bacteria. Plásmidos “movilizables” sólo pueden transferirse en presencia de un plásmido conjugativo.
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Plasmido F
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- Bacterias F+ : si el factor F se encuentra libre en el citoplasma
- Bacterias F+ : si el factor F se encuentra libre en el citoplasma. - Bacterias Hfr : si el factor F se encuentra integrado en el cromosoma bacteriano. -Bacterias F-: carecen del factor F (células receptoras)
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CONJUGACIÓN BACTERIANA
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Apareamiento entre las bacterias: F+ y F-
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Células Hfr (high frequency recombination) Apareamiento entre las bacterias: Hfr y F-
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Procedimiento experimental
E. coli JM1452StrR (Receptora) + E. coli W3110/F´KmTn3 en LB (Donadora) Tubo con 1 mL LB, 0.5 mL de JM y 0.2 mL de W3 Incubación a 37°C por 1 hora sin agitación. Caja petri LB con 2% estreptomicina Sembrado por estría E. coli W3110/F´KmTn3 E. coli JM1452Str Mezcla Incubación por 24 horas a 37 °C, refrigerar a 4 °C Parchar 50 colonias aisladas en LB con 1) Estreptomicina y 2) Kanamicina Incubar 24 h a 37 °C Observar y analizar resultados Reportar % de colonias transconjugantes
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Sembrado por estría
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Actividades para la siguiente semana
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