Susceptibilidad antifúngica en candidemia: EUCAST vs CLSI en nuestras cepas (CANDIPOP); lectura a las 24 o 48h? cuando realizar detección de FK....? . Jesús Guinea Servicio de Microbiología Clínica y EI-VIH Hospital Gregorio Marañón Instituto de Investigación Gregorio Marañón Madrid

CONFLICTOS DE INTERES Proyectos de investigación (3 años): Fondo de Investigación Sanitaria (FIS), Fundación Mutua Madrileña, Gilead Conferencias invitadas (3 años): Astellas, Gilead, MSD, United Medical

CANDIDEMIA: MORTALIDAD Y TRATAMIENTO RETRASO TRATAMIENTO MORTALIDAD Morrell M. AAC, 2005 Garey KW. CID, 2006

Métodos para estudio sensibilidad en levaduras

Métodos para estudio sensibilidad en levaduras CLSI M27-A3 E-test EUCAST Edef 7.1 Sensititre YeasOne 10 Vitek Otros

CLSI y EUCAST CLSI EUCAST Sociedades ASM ESCMID Documentos Previo pago Gratis Microdilución ✓ Método referencia RPMI Placas Fondo en U Fondo plano Glucosa 0.2% 2% Inóculo 5 x 102 – 2,5 x 103 0,5-2,5 x 105 Incubación 24h Lectura placas Visual Espectrofotómetro BP y ECVs http://www.eucast.org/ast_of_fungi/

Lecturas de las placas CLSI M27-A3 ¿24h o 48h? Documentos originales a las 48h azoles y AmB Actualización 2008 lectura a las 24h: Buena correlación con 48h Menos problemas interpretación trailing Anticipación de los resultados Pfaller. JCM 2012

Lecturas de las placas CLSI M27-A3 ¿24h o 48h? Especie CA (entre 24h y 48h) C. albicans 99,9 C. parapsilosis 98,2 C. glabrata 67,5 (32% errores menores) C. tropicalis 99,5 Todas 95% (5% errores menores) Pfaller. JCM 2008

Lecturas de las placas, ¿24h o 48h? CLSI EUCAST Anfo B 24 h 24 h (Si DO>0,2) Azoles Candinas No fermentadores 72 h 48 h agitación (30º) CLSI M27-A3. 2008 EUCAST Edef 7.1 2012

Puntos de corte

CLSI M27-A3 o EUCAST Ambos son equivalentes EUCAST cuenta con BP actualizados Decisión en base a la lectura de CMI: EUCAST requiere un espectrofotómetro CLSI lectura de CMIs más subjetiva Implementable incluso en rutina

ESTUDIO CANDIPOP Estudio poblacional 29 hospitales españoles participantes 1 de mayo 2010 – 30 abril 2011 767 pacientes con fungemia (781 aislados) ID molecular (secuenciación ITS, Carlos III) AFST EUCAST 7.2 EDef y CLSI M27-A3 (Carlos III y HGUGM)

ESTUDIO CANDIPOP: Distribución de especies

Candidemia en España Almirante B. JCM 2005 Pemán J. JAC 2012 This figure is a summary of three population-based studies on candidemia performed in Spain during the last 10 years. The Candida species distribution has not changed considerable over this period. C. parapsilosis is quite frequent in Spain. C. albicans has decreased its frequency whereas C. glabrata’s frequency is slightly higher now. Almirante B. JCM 2005 Pemán J. JAC 2012 Puig M. CMI 2013

Sensibilidad a Fluconazol 80% Resistencia antifúngica: Candipop Especie Fluco Candinas CLSI EUCAST C. albicans 1,4 1 0,3 C. parapsilosis 2,5 C. glabrata 9,6 5,8 C. tropicalis 1,7 22 3,3 3,4 Todas 6 7 1,8 3,1 Sensibilidad a Fluconazol 80% Guinea, Zaragoza. AAC 2014

Resistencia fluconazol en España Hospitales Periodo Fluconazol R Ref. Barcelona 2002-2003 6,8% 45 hospitales 2009 3,5% 29 hospitales 2010-2011 6% 1 hospital 2007-2013 5% Cuenca-Estrella M. JAC, 2004 Pemán J. JAC, 2012 Guinea , Zaragoza. AAC 2014 Marcos-Zambrano L. AAC 2014

Resistencia antifúngica: Programa SENTRY FLUCONAZOL CASPO AND MIC C. albicans 0% 0,2 C. glabrata 2,5% 0,6 1,9 2,5 C. tropicalis 3,2% 1,1 C. krusei 100% 12,5 C. parapsilosis 6,8% Pfaller M. DMID, 2011

Mecanismos de acción equinocandinas fks1 fks2 Fksp Subunidad catalítica fks3 Rho Subunidad reguladora Cowen LE. Eukaryot Cell 2008 Perlin D. Drug Resistance Updates 2007

Mutaciones de resistencia a candinas Arendrup. Drug Res Up 2014

¿Cuándo buscar mutaciones en los FKS? AFST a todas cepas de Candida de hemocultivos Cepas con CMIs a candinas > ECVs o ECOFFs Arendrup. Drug Res Up 2014 Pfaller. JCM 2014

Resistencia a candinas en España Candipop HGUGM Total 2-3% 4,4% Intrinsicamente R a 1,7% 3,2% Candida 1% 1,2% C. albicans F641S (n=1) C. tropicalis F641L / S645F (n=2) R647G (n=1) C. glabrata F659 del (n=1) a Rhodotorula, Trichosporon, Cryptococcus Guinea, Zaragoza. AAC 2014 Marcos-Zambrano. AAC 2014

¿Candida de otros orígenes? Candidemia CI con candidemia CI Hemocultivo + (sin foco) Hemocultivo + Hemocultivo - + + Cultivo l. estéril + (focalidad) Cultivo l. estéril + (focalidad) 39,5% 28,4% 32 % L. peritoneal mayoritariamente Leroy. CCM 2009

25 pacientes con candidiasis abdominal + ≥ 3 días candinas 92% cirugía abdominal (40% infecciones de brecha) C. glabrata en 17 pacientes 25% pacientes infectados con mutantes FKS Mutantes WT P Días de tto candinas previo 119% 27% 0.01 Infección de brecha 45% 6% 0.03 Fallo terapéutico candina 100% -

CONCLUSIONES EUCAST / CLSI ambos válidos Puntos de corte limitados a especies y candidemia Lecturas a las 24 horas Baja resistencia antifúngica en España (Candipop) Tendencia de la resistencia es estable Mutaciones FKS en cepas con CMIs > ECVs Cepas de sangre y otros líquidos estériles (peritoneal) ¿Es hora de un nuevo Candipop?

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