Historia natural de la infección por M. tuberculosis LA LLEGADA : vías respiratorias inhalación.

La respuesta inmune en la tuberculosis IFN-γ IFN-γ IFN-γ IFN-γ IL-12 IL-1 IL-2 Ag IFN-γ

Historia natural de la infección por M. tuberculosis EL CONTACTO : Macrófagos Alveolares(MA) … …1era línea def.) Componentes del MTB (lipoarabinomananos, 19kDA prot, y otras glicoproteínas son captados por receptores TLR2 de los MA y activan producción de IL1 y TFN-α

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Historia natural de la infección por M. tuberculosis EL INGRESO: Receptores en el MA ( Fc, CR1,CR3/4, Manosa, Carroñeros, Surfact A) Fc induce prod de O y favorece fusión fago-lisosoma CR3 inhibe estallido O y maduración de fagosomas.

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Historia natural de la infección por M. tuberculosis LA FAGOCITOSIS: FAGOSOMA  FAGOLISOSOMA

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Historia natural de la infección por M. tuberculosis LA ELIMINACIÓN: Se liberan Ag bacterianos que acoplados a moléculas de CHC

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Historia natural de la infección por M. tuberculosis LA PRESENTACIÓN: Los Ag. son presentados a la los CD4+ y CD8+ (CD4-CD8-) Fundamental para la respuesta inmune reconocimiento de Ag. por los diferentes tipos de células que se activan y el tipo de producción de factores solubles que irán a producir

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Historia natural de la infección por M. tuberculosis LA RESPUESTA: Control de infección: IL-2, IL-12, IFN-γ IL-18,TNF- α, IL-8 y otros No protectora: IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, TGF-ß

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IL-12 Citocina temprana elaborada por los macrófagos, monocitos y Cel. Dendríticas A través de receptores específicos IL-12R ACCIONES PRINCIPALES Potente inductor de producción de IFN-γ POR LINFOCITOS T CD4+ CD8+ y NK Aumenta la proliferación de CD4+ Favorece la expansión clonal de los Th1 y Th4 Aumenta la acción citotóxica de los CD8+ y los NK

IL-12 Su producción se regula por: IFN-γ TNF-α IFN- α IFN- β TNF- β Enfermos con TB: Tienen un elevado número de monocitos productores de IL-12 Migración de Linf. T donde son activados y provocan gran producción de IFN-γ

Citocina muy importante: IFN-γ Citocina muy importante: Es producida por linfocitos T y NK (también macrófagos) Activa macrófagos - produccion de IL-1 IL-2 - promueven la expansión clonal. Induce mecanismos de destrucción intracelular de las bacterias

QUANTIFERON TB GOLD “IN TUBE” Para evaluar la respuesta inmune de tipo celular frente a una infección tuberculosa o una infección tuberculosa PRODUCCIÓN DE IFN-γ SE PUEDE MEDIR EL IFNγ LIBERADO QUANTIFERON TB GOLD “IN TUBE” SE PUEDE MEDIR LA CANTIDAD DE CÉLULAS PRODUCTORAS DE IFNγ TB-SPOT

Utilidad: ITBL y ETA Técnica: Mantoux Ag.: ppd RT23 HASTA EL AÑO 2001. SOLAMENTE SE CONTABA CON EL PPD PARA MEDIR LA RESPUESTA INMUNE inyectando antígenos de MTB en la dermis. Utilidad: ITBL y ETA Técnica: Mantoux Ag.: ppd RT23 Aplicación: Epidemiología, casos dudosos con Bacteriología.(-) Interpretación Subjetiva y variación individual Falsos positivos (MNT – BCG) Efecto Booster Grandes limitaciones:

Desempeño y características operacionales del PPD vs. IGRAs Rendimiento operativo TST IGRAs Sensibilidad estimada (ETA) 75 - 90 % 80 – 90 % Especificidad estimada 70 – 95 % 95 – 100 % Adaptada de: Pai M. y col . Indian J .Med. Microbiol 2005; 23: 151 - 158

Desempeño y características operacionales del PPD vs. IGRAs Rendimiento operativo TST IGRAs R. cruzada con MNT - BCG SI NO (M.kansasii) Test (+) y riesgo de ETB Moderada a fuerte Fuerte Adaptada de: Pai M. y col . Indian J .Med. Microbiol 2005; 23: 151 - 158

Desempeño y características operacionales del PPD vs. IGRAs Rendimiento operativo TST IGRAs Correlacion Exposic. a MTB SI SI (mayor) Beneficio trat. a positivos Reducción del 60% de TB Sin evidencia firmes Adaptada de: Pai M. y col . Indian J .Med. Microbiol 2005; 23: 151 - 158

Desempeño y características operacionales del PPD vs. IGRAs Rendimiento operativo TST IGRAs Resultados en VIH/SIDA Muy limitados Bueno con 100 CD4 Beneficio trat. a positivos Reducción del 60% de TB Sin evidencia firmes Adaptada de: Pai M. y col . Indian J .Med. Microbiol 2005; 23: 151 - 158

Desempeño y características operacionales del PPD vs. IGRAs Rendimiento operativo TST IGRAs Reproducibilidad Moderada Alta Fenómeno Booster SI NO Adaptada de: Pai M. y col . Indian J .Med. Microbiol 2005; 23: 151 - 158

Desempeño y características operacionales del PPD vs. IGRAs Rendimiento operativo TST IGRAs COSTOS Bajo- Moderado Moderado-Alto Visitas del paciente 2 1 Infraestructura SI (Poca) Personal Calificado SI Tiempo de resultados 3 días 1 – 2 días Adaptada de: Pai M. y col . Indian J .Med. Microbiol 2005; 23: 151 - 158

Mide la liberación de interferón gamma en monucleares de la sangre Que es el Quantiferon TB Gold In tube Es un ELISA Fundamento: Si estimulamos con Ags de MTB Linfocitos y mononucleares estos producirán liberación de IFNg. En caso de existir células de respuesta por una infección o enfermedad habrá liberación de IFNg Mide la liberación de interferón gamma en monucleares de la sangre Estimulados con Antígenos específicos de MTB( ESAT 6 + CF10 + TB 7.7)

Principio de la técnica ELISA Utilizada en QFTB GOLD Enzyme linked immunosorbent assay

Procedimiento: 1.- Se extraen 3- 5 ml de sange venosa 2.- Se coloca 1 ml en cada uno de los siguientes tubos tubos : Un tubo control Negativo Un tubo control positivo (contiene mitógeno inespecifíco) Un tubo problema (contiene Ag específicos de MTB) Los tubos se agitan por inversión delicadamente 10 veces. Se incuban a 37º 16 horas. Se centrifugan. Se extrae plasma el cual se utilizara para realizar el ELISA según instrucciones del fabricante

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: QFTB GOLD Nil Mitóg/nil QFT-G Interpretación ≥0.35 UI/ml y >50% sobre nil Cualquier POSITIVO Infección por M. Tuberculosis <0,35 UI/ml ≤0,7 ≥0,5 NEGATIVO Infección por M. Tuberculosis poco probable <0,5 Indet No se puede interpretar el resultado por respuesta baja al mitógeno. Puede darse en situaciones de inmunosupresión ≤50% sobre nil >0,7 No se puede interpretar el resultado por respuesta inespecífica basal elevada

CONCLUSIONES Los IGRAs contribuyen a mejorar el diagnóstico de la ITBL y de la ETA con bacteriología (-) Como otros métodos indirectos no constituyen el examen que define el diagnóstico

No es posible descartar por completo el PPD CONCLUSIONES No es posible descartar por completo el PPD IGRAs y PPD pueden usarse alternativamente o en forma secuencial según los casos no se recomienda la aplicación en paralelo Dependerá de la población y del objetivo.

CONCLUSIONES IFNg es altamente ESPECÍFICO Apropiado para : poblaciones con baja prevalencia de TB poblaciones vacunadas con BCG VIH/SIDA - CONTACTOS (seguimientos) Segunda visita del paciente improbable Inseguridad sobre realización y lectura del PDD