DETERMINACION DE NIVELES DE As PROYECTO FONIS SA04I2027 / 2004 MINISTERIO DE SALUD – CONYCIT DETERMINACION DE NIVELES DE As NO DIETARIO URINARIO EN UNA POBLACION DE TRABAJADORES EXPUESTOS II REGION

EXPOSICIÓN AL ARSÉNICO INORGANICO (As In) Exposición poblacional As en la naturaleza: PRESENCIA EN AGUAS HORTALIZAS Exposición laboral Proceso de fundición: el mineral de cobre es oxidado, liberándose trióxido de diarsénico, As2O3 y trisulfuros de As. Esta exposición se ve reflejada por determinaciones de As In más sus metabolitos metilados , denominado también As no dietario.

EXPOSICIÓN AL AS ORGÁNICO DE ORIGEN ALIMENTARIO Contenido en productos marinos: pescados, mariscos, algas como arsenobetaína, arsenocolina, arsenoazúcares formas reconocidas como no tóxicas. Exposición reflejada por determinaciones urinarias de As total, equivalente al As In y sus metabolitos metilados más el As orgánico de origen alimentario.

TOXICOCINÉTICA ARSÉNICO INORGÁNICO Vías de ingreso en el medio laboral: Vía inhalatoria principalmente. Vía oral secundariamente por falta de hábitos de higiene en el trabajo. Se acumula en hígado, riñón, corazón y pulmón y las más altas concentraciones se encuentran en fanéreos como pelo y uñas, se inicia a las dos semanas de exposición y se fija por años. La eliminación por vía urinaria es bastante rápida y se excreta hasta el 50% dentro de los dos primeros días.

EL DESTINO DEL ARSÉNICO INORGÁNICO Inhalación y/o Ingestión de As (III 0 V) Membrana celular As(III) MMA DMA Reducción de AS(V) Bilis metilación As(III), As(V) ORINA

La valoración de la exposición al As In a través de determinaciones urinarias se relaciona bien con la exposición . En trabajadores expuestos hay una correlación de los valores sanguíneos y urinarios de As inorgánico y sus metabolitos, parámetro propuesto para vigilancia laboral* * Vito Foà et cols “The Speciation of the chemical forms of As in the biological monitoring of exposure to inorganic As”; 1984, The Science of total Environment; Elsevier Science Publishers

EL PARÁMETRO AS In Y SUS METABOLITOS EN LA VIGILANCIA DE LA EXPOSICIÓN DE TRABAJADORES En poblaciones no expuestas laboralmente, los niveles urinarios de As In y sus metabolitos se correlacionan bien con los niveles del As In en el agua de bebida Por lo tanto el indicador As In y sus metabolitos refleja el riesgo tanto en trabajadores expuestos como en la población que ingiere agua con As. Es necesario conocer los valores de la población no expuesta laboralmente, asociado a la ingesta por agua de bebida para conocer la magnitud del factor de confusión para la valoración de la población expuesta laboralmente.

EFECTOS EN SALUD EFECTOS SISTEMICOS: Tipo irritativo Cardíaco: isquemia precoz al miocardio, arritmias Vascular: vasculitis periférica Respiratorio : traqueobronquitis, perforaciòn, tabique nasal Dérmico: hiperqueratosis, hipopigmentación Neurológico: parestesias, neuritis

EFECTOS EN SALUD EFECTOS CARCINOGÉNICOS: Clasificado IARC el As cancerígeno humano, grupo 1 La investigación epidemiológica ha permitido establecer asociaciones significativas entre exposición a As y mayor frecuencia de cánceres de pulmón, piel, vejiga, riñón, hígado y laringe Mecanismos Carcinogénicos: inducción anomalías cromosómicas, estrés oxidativo, reparación alterada del DNA, aumento de los factores de crecimiento

VALORES DE REFERENCIA D. S VALORES DE REFERENCIA D.S.594/1999, Art 113 LTB As urinario 220 µg/g creat (sin especificar parámetro) OTROS PAÍSES As In + DMA y MMA OBSERVACIONES ACGIH 50 µg /g creat/ 30 µg /l 2002 QUÉBEC 50 µg/g creat ALEMANIA 2003 FRANCIA BELGICA 30 µg/g creat OSHA FINLANDIA 5 µg/g creat* *Sólo As In

Rol del ISP: Laboratorio nacional y de referencia en materias de indicadores biológicos, LTB, valoración biológica de exposición (Títulos V; VI, Art 117, DS 594/99) La obtención de los valores de referencia, LTB, deben dar cuenta de la sobreexposición por la condición de trabajar en un ambiente que exponga a As

AAS-Generación de hidruro en batch. JUAN FERRUZ R. AAS-Generación de hidruro en batch.

Método Determinación de Arsénico Inorgánico AAS-Generación de Hidruros Centro Toxicológico de Québec Laboratorio de Salud Ocupacional 18 Muestras 18 Resultados

METODOLOGÍA Determinaciones de As inorgánico y sus derivados metilados: espectrofotometría de absorción atómica con formación de hidruros Los resultados se expresarron en µg de arsénico inorgánico y sus metabolitos por gramo de creatinina. Método de Espectrofotometría de Absorción Atómica con Generación de Hidruros, (EAA-GH) permite diferenciar entre las especies de arsénico inorgánico y sus metabolitos metilados del arsénico proveniente de la dieta con una estructura química compleja (Arsenobetaína, arsenocolina, arsenoazucares en general).

Método Determinación de Arsénico Inorgánico AAS-Generación de Hidruros Detector Lámpara de arsénico Celda de Cuarzo Argón Muestra/Estándar / HCl Borohidruro de sodio / NaOH

Desviación del Valor Target

Duplicados

Método Determinación de Arsénico Inorgánico Otras Metodologías AAS-Generación de hidruro en batch. AAS-Generación de hidruro en flujo continuo. AAS-Generación de hidruro en batch. AAS-Horno de Grafito con Corrector Zeeman. HPLC-Generación de Hidruros-Espectrofotometría de Fluorescencia Atómica. HPLC-HG-ICP-AES. HPLC-HG-ICP-MS.

Dra. LUCIA MOLINA METODOLOGÍA

METODOLOGÍA CRITERIOS DE INCLUSIÓN GRUPO EN ESTUDIO : Desempeñarse en el área de fundición, haber completado los dos primeros días de la jornada laboral semanal (se corroboró información entregada por la empresa) RESIDENTE CONTROL II REGIÓN : no trabajar expuesto a As, ser residente o haber permanecido en la II región las últimas 72 hr. En ellos se pareó fuente de agua potable, según comunas de residencia RESIDENTE CONTROL RM : no trabajar expuesto, haber permanecido en la RM las últimas 72 hr.

METODOLOGÍA EVALUACIÓN INDIVIDUAL ENCUESTA : información general del trabajador, de su trabajo y de la empresa, énfasis en el agua de bebida. Visualización piel. Muestra de orina. ÉTICA : consentimiento informado.

OBJETIVO GENERAL DEL ESTUDIO REALIZADO EL 2005 Contar con información actualizada sobre exposición al arsénico de trabajadores de la Minería del Cobre en II Región valorada a través del indicador arsénico urinario inorgánico y sus metabolitos (no-dietario) PROPÓSITO: Contar con fundamentos que permitan actualizar el parámetro y el valor de referencia que debiera utilizarse en la vigilancia de los trabajadores expuestos, considerando la fuente de exposición laboral y sus posibles factores de confusión (ingesta As I) para la mejor protección de la salud

METODOLOGÍA Estudio descriptivo transversal cuya población objetivo fueron trabajadores de fundiciones de la II región a los que se les determinó en una muestra puntual de orina los niveles de As no dietario corregidos por creatinina; estas determinaciones se realizaron además en dos grupos controles de la II región y uno de la RM 226 Trabajadores de fundición de la II región (varones) 350 Residentes de la II región no expuestos laboralmente al As 183 Residentes de la RM no expuestos laboralmente al As

CONCLUSIONES Los trabajadores evaluados fueron integrados por estar en programas de empresas mandantes, de contratistas, según información de las primeras o de la ASR. Todos fueron invitados a participar, sólo que hubo 10 trabajadores de fundición que rechazaron participar obedeciendo a líder de opinión y 2 que no cumplían criterios de inclusión. Para el análisis estadístico hubo pérdidas de determinaciones: 8% muestras con creatinina fuera de rango en la II región y 2% en la RM Se analizó 23 muestras de mujeres contratistas que están en labores de aseo en fundición a solicitud de la ASR; se perdieron 2 muetras por creatinina. No se tomó controles mujeres de la II región, se deja planteado el tema puesto que sólo el 22% de ellas está en programas de monitoreo por As

RESULTADOS VALORES DE As URINARIO NO DIETARIO, CINCO GRUPOS EVALUADOS (µg/g creat)

RESULTADOS Población Nº Promedio Mediana Desviación St TOTAL 706 VALORES DE As URINARIO NO DIETARIO, CINCO GRUPOS EVALUADOS (µg /gr creat) Población Nº Promedio Mediana Desviación St Fundición1 171 50 40 39.6 Fundición2 39 14 13 6.0 Residentes Calama 160 19 17 8.4 Antofagasta 164 20 10.0 ResidentesRM 172 08 07 3.5 TOTAL 706

As URINARIO NO DIETARIO, FUNDICIÓN Y CONTROLES ANTOFAGASTA RESULTADOS As URINARIO NO DIETARIO, FUNDICIÓN Y CONTROLES ANTOFAGASTA

RESULTADOS FUNDICIÓN RESIDENTES Nº Muestras 39 164 Promedio 13 19 As URINARIO NO DIETARIO, FUNDICIÓN RESIDENTES ANTOFAGASTA (µg /gr creat) FUNDICIÓN RESIDENTES Nº Muestras 39 164 Promedio 13 19 Mediana 14 20 Rango 4-28 2-59

RESULTADOS ANTOFAGASTA : Número de muestras de Fundición es restringido (son muestras puntuales de orina). Los trabajadores reciben durante la jornada agua filtrada y alimentos de una proveedora nacional. La diferencia es significativa, comparación de medianas; test no paramétrico Mann-Whitney (Wilcoxon) P 0.0000255 Statgraphics 5.0 Para fines de análisis final no se integró Antofagasta.

RESULTADOS As URINARIO NO DIETARIO, TRABAJADORES Y RESIDENTES CALAMA (µg /gr creat)

As URINARIO NO DIETARIO, FUNDICIÓN RESIDENTES CALAMA (µg /gr creat) RESULTADOS As URINARIO NO DIETARIO, FUNDICIÓN RESIDENTES CALAMA (µg /gr creat) FUNDICION RESIDENTES Nº muestras 171 160 Promedio 50 19 Mediana 40 17 Rango 10-328 2-63 Moda 34 16 Percentil 95 126 32 As >50 36% 1.25%

RESULTADOS CALAMA La diferencia observada entre los grupos estudiados es significativa, comparación de medianas; test no paramétrico Mann-Whitney (Wilcoxon) P 0.0 Statgraphics 5.0 Los trabajadores llevan alimentos de su hogar, utilizan agua corriente y agua filtrada (lo que puede ocurrir también en residentes según nivel de ingresos). En la fundición, se encontró sólo dos resultados sobre 220 ug/ gr creat de As urinario inorgánico y sus metabolitos.

As URINARIO NO DIETARIO, RESIDENTES : RM Y II Región (µg /gr creat) RESULTADOS As URINARIO NO DIETARIO, RESIDENTES : RM Y II Región (µg /gr creat) Grupos Nº Promedio Mediana Calama 172 19 17 Antofagasta 164 20 RM 08 07 Total 496

As URINARIO NO DIETARIO, RESIDENTES : RM Y II Región (µg /gr creat) RESULTADOS As URINARIO NO DIETARIO, RESIDENTES : RM Y II Región (µg /gr creat)

Se verifica que, mediante comparaciones post análisis de varianza, las diferencias entre Residents RM vs Residents Antofagasta y Residents RM vs Residents Calama son altamente significativas p<0.01 Por el contrario no hay diferencias significativas entre residentes Antofagasta vs residentes Calama. Con los resultados de Calama se realizó un cálculo que permitió establecer que si un trabajador de fundición presentaba valores de As no dietario urinario sobre 40 µg/g creatinina, este resultado reflejaría con un 95% de probabilidad una exposición laboral.

RESULTADOS As URINARIO NO DIETARIO, TRABAJADORES Y RESIDENTES CALAMA (µg /gr creat)

CONCLUSIONES La exposición de los trabajadores de la fundición de Calama evaluados es mayor que la exposición atribuible a la contaminación natural; el valor de corte obtenido en este estudio es 40 µg/g creatinina, As In +metabolitos. La exposición de los residentes de la II región evaluados (Calama, Chuqui y Antofagasta) es mayor que en los residentes de la RM donde no se ha descrito contaminación natural con As. Constituyendo un factor de confusión para valorar exposición laboral en la II región.

APLICABILIDAD DEL ESTUDIO Este estudio pretende poner de manifiesto el rango de valores de As urinario inorgánico y sus metabolitos que se puede encontrar en trabajadores identificados como potencialmente expuestos al As inorgánico por trabajar en fundiciones Se realizaron las determinaciones en la II Región por representar un territorio del país en que existe contaminación natural con As (cursos de agua que sirven para consumo, hortalizas) Con estos resultados pretendemos iniciar una reflexión que nos oriente para la actualización del valor de referencia, LTB, acercándonos a normativas de países desarrollados y que consideran la necesaria protección de los trabajadores frente al potencial cancerígeno del As inorgánico, entre otros efectos.