USO DE PANELES MULTIGÉN USO DE PANELES MULTIGÉN. IMPACTO EN UNA CONSULTA DE CÁNCER DE MAMA OVARIO HEREDITARIO A. Herrero Ibáñez (1), D. Miramar Gallart (2), A. Rodríguez Valle(2) , A. Nuño Alves (1), A. Comín Orce (1), P. Felices Lobera(1), I. Gurruchaga Sotes (1), B López Roldan (1). 1. Servicio de Oncología Médica 2. Unidad de genética médica. Servicio de Bioquímica clínica. Hospital Universitario Miguel Servet de Zaragoza No existen conflictos de intereses que declarar por parte de los autores.

Evolución histórica en la caracterización clínica y genética de los síndromes de cáncer hereditario <1900 1900 1975 1986 1993 La historia del cáncer hereditario comenzó con las observaciones de agrupaciones familiares con fenotipos peculiares y múltiples tipos de cáncer. Poliposis familiar. Sklifasouski y Cripps. Sanger desarrolló el método de secuenciación de ADN conocido como método de Sanger. Se descubren de los genes de reparación de mal apareamiento de bases del ADN y el fenómeno de la inestabilidad de microsatélites (MSI). Warthin, Lynch, Krush, describen y caracterizan los rasgos clínicos HNPCC. Se identifica el gen APC relacionado con la PAF 1994-5 1990-2003 2005 Aparecen las primeras tecnologías NGS que generan una mayor cantidad de lecturas del genoma y permiten obtener un resultado más sólido, a precios más asequibles y en un menor período de tiempo. Además, este avance permitió incorporar el análisis en paralelo de multitud de secuencias a la vez en plataformas manejables. Aislamiento del gen BRCA1 y mutaciones relacionadas con una mayor predisposición a padecer cáncer. BRCA2 en 1995. Proyecto Genoma Humano amplia colaboración internacional, y avances en el campo de la genómica.

Consulta de asesoramiento en cáncer hereditario del Hospital Miguel Servet de Zaragoza Inicio en 2003 en colaboración con el departamento de genética del servicio de bioquímica de nuestro centro. En 2010 la consulta se desdobla atendiendo una de ellas fundamentalmente síndromes de cáncer hereditario en la esfera de tumores digestivo y la otra centrándose en cáncer mama-ovario hereditario y otro síndromes. Mas de 1200 familias valoradas desde su inicio. Incremento exponencial en el número de familias valoradas en los últimos 5 años debido a: -Mayor difusión sobre la existencia de estos cuadros en la población general lo que genera mayor demanda. - Modificación de los criterios de selección de familias para estudio (todas las pacientes con cáncer de ovario deben ser evaluadas, cáncer de mama triple negativo …). -Mayor número de mutaciones detectadas implica mayor número de familiares sanos de las mismas que precisan asesoramiento. - Aparición de nuevos genes asociados a incremento de riesgo de cáncer (alta y baja penetrancia). En 2015 se implantan las técnicas de secuenciación masiva y paneles multigén generando una percepción de cambio en el número y tipo de mutaciones detectadas, motivo por el cual se realiza esta revisión histórica.

MATERIAL Y MÉTODOS RESULTADOS Analizamos de manera retrospectiva las últimas 200 familias estudiadas mediante método de secuenciación Sanger y MLPA BRCA1-2 y CHEK2 y las primeras 200 mediante un panel multigén de 24 genes. (APC,ATM,BARD1,BRCA1,BRCA2,BRIP1,CDH1,CHEK2,ERCC4,HOXB13,MLH1,MRE11A,MSH2,MSH6,MUTYH,NBN,PALB2,PMS1,PTEN,RAD51C,RAD51D,STK11,TP53,XRCC2) Todas ellas corresponden a familias con criterios de sospecha de cáncer mama ovario hereditario. RESULTADOS Resultados de las últimas 200 familias analizadas mediante método de secuenciación Sanger y MLPA. Total de 21 mutaciones detectadas . -Mutaciones patogénicas en BRCA1, 9 casos. -Mutaciones patogénicas en BRCA2, 12casos. -VUS, 27 casos. -Negativo 152. Porcentaje de detección de mutación patogénica en familias seleccionadas 10,5%.

Resultados de las primeras 200 familias analizadas mediante método NGS Resultados de las primeras 200 familias analizadas mediante método NGS. Total de 37 mutaciones detectadas. -Mutaciones patogénicas en BRCA1, 12casos. -Mutaciones patogénicas en BRCA2, 12 casos. -Mutaciones patogénicas en PALB2,3 casos. -Mutaciones patogénicas en ATM, 3 casos -Mutaciones patogénicas en BRIP1,3 casos. -Mutaciones patogénicas enRAD51D,1 casos. -Mutaciones patogénicas enRAD51C,1 casos. -Mutaciones patogénicas en CHEK 2 ,1 casos. -Mutaciones patogénicas heter en MUTYH,1 casos. - VUS 94 casos. -Negativo 69 casos. En total se aislaron 120 VUS (en muchos casos 2 o más en el mismo paciente) Porcentaje de detección de mutación patogénica en familias seleccionadas 18,5%.

En 12 casos (6% del total de familias y 32% sobre el total de mutaciones) nunca se hubiera podido detectar mutación usando la técnica antigua. En estas 12 familias se han estudiado 10 miembros sanos. El número de mutaciones en BRCA1-2 permanece muy similar con ambas técnicas (21 en grupo Sanger y 24 en grupo panel), hay un enorme incremento en el número de VUS detectadas (27 Sanger y 120 panel). Hallazgos inesperados. Se ha detectado una mutación RAD 51 C en una familia con antecedentes de cáncer de mama pero no de ovario. No está claramente establecida la relación entre esta mutación y un incremento de riesgo para cáncer de mama.

Uso de paneles. Ventajas e inconvenientes -Mayor coste efectividad (menor costo por gen analizado). -Mayor eficiencia en el tiempo. -Mayor tasa de mutaciones detectada. -Inconvenientes -Aumento de la detección de VUS. -Detección de mutaciones en genes cuyo riesgo de cáncer y manejo no está bien establecido -Hallazgos inesperados, mutaciones en genes que no correlacionan con la historia familiar. -

CONCLUSIONES -Los conocimientos y avances en el terreno del cáncer hereditario están teniendo un crecimiento exponencial desde finales del siglo XX. -Los criterios de selección de pacientes y familias para estudio están sufriendo un cambio constante ¿cuál es el límite?¿es solo una cuestión de coste económico?. -El descubrimiento de nuevos genes implicados abre nuevos incógnitas sobre la estimación de sus riegos y las mejores estrategias de manejo de portadores (riesgos de cáncer inciertos y / o sin recomendaciones basadas en la evidencia). ATM supone un incremento de riesgo de cáncer de mama pero no hay suficiente evidencia sobre el beneficio de la cirugía reductora de riesgo, posible incremento de riesgo de cáncer de ovario no bien establecido. ¿Están RAD51C y RAD51D asociadas a incremento de riesgo de cáncer de mama?.

CONCLUSIONES -El incremento de detección de VUS supone un reto en estas familias pero se espera que disminuya en un futuro debido a la rápida acumulación de datos. Actualmente, vivimos en una era en que nuestras capacidades técnicas han superado a nuestro conocimiento médico. Se están creando varios registros en un intento de catalogar y seleccionar estas variantes y avanzar en nuestro conocimiento sobre su utilidad clínica. -Es fundamental que las personas a estudio estén completamente informadas de la posibilidad de descubrir mutaciones imprevistas, beneficios, riesgos y limitaciones que tales pruebas pueden suponer.