El crustáceo anacostraco Thamnocephalus platyurus es más susceptible que Artemia salina (Crustacea: Anacostraca) en bioensayos de letalidad con extractos vegetales
Karen Rebeca PÉREZ CIFUENTES; Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, USAC Pablo MAYORGA SAGASTUME Servicios y Productos Ambientales (SEPRA) Guatemala
Bioensayos con Artemia salina Usados desde hace décadas Bioensayo rutinario a nivel mundial para medir actividad biológica de extractos vegetales potencialmente medicinales (tamizaje) ¿Hay otras opciones?
Objetivo Comparar la susceptibilidad de Thamnocephalus platyurus (crustáceo anacostraco de agua dulce) con la de Artemia salina (crustáceo anacostraco marino) en bioensayos de letalidad con 10 extractos vegetales y 5 fármacos
Metodología Los bioensayos: Thamnotoxkit F, con el crustáceo anacostraco de agua dulce Thamnocephalus platyurus Artoxkit M, con el crustáceo anacostraco marino Artemia salina
Thamnotoxkit F
Artoxkit M
Metodología 5 extractos (etanólicos) vegetales con actividad anti-Artemia conocida: Solanum americanum (hojas) Ocimum micranthum (aceite) Petiveria alliacea (raíz) Gliciridia sepium (corteza) Neurolaena lobata (hoja)
Metodología 5 extractos sin actividad anti-Artemia conocida: Curatella americana (hoja) Rhizophora mangle (corteza) Prunus barbata (hoja) Quercus crispifolia (hoja) Smilax domingensis (rizoma) Proporcionados por el Laboratorio de Citohistología, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, USAC
Metodología 5 fármacos: Furosemida Amoxicilina Cefadroxilo Secnidazol Acetaminofén Proporcionados por laboratorios farmacéuticos locales
Metodología Extracto concentrado redisuelto con etanol o DMSO + aguas estándar: agua de mar (ARC-test) agua dulce moderadamente dura (USEPA) Toxkits: Procedimientos Estándar Operacionales Eclosión: medio preaereado, caja Petri 9 cm, 25º C, 3000-4000 lux, 20-22 h 5 diluciones y un control en placa multipozos
O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O diluido concentrado control C5 C4 C3 C2 C1 O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O ENJUAGUE <------------ enjuague: 50 organismos / concentración 10 organismos en cada pozo
Metodología Incubación Cálculo de CL50 25º C, oscuridad T. platyurus: 24h A. salina: 48h Cálculo de CL50 método USEPA/600/4-85/013, 1985 manual y computarizado
Resultados CL50 de extractos vegetales con actividad anti- Artemia conocida 600 500 400 As 24h CL50 (ppm) 300 As 48h Tp 24h 200 100 Sa Om Pa Gs Nl
Resultados CL50 de extractos vegetales sin actividad anti-Artemia conocida 350 300 250 200 As 24h CL50 (ppm) As 48h 150 Tp 24h 100 50 Ca Rm Pb Qc Sd
Resultados CL50 de fármacos CL50 (ppm) Furo Amoxi Cefa Secni Aceta 600 500 400 As 24h CL50 (ppm) 300 As 48h Tp 24h 200 100 Furo Amoxi Cefa Secni Aceta
Conclusión Thamnocephalus platyurus es más susceptible que Artemia salina a extractos vegetales
Recomendaciones Estudios más extensos con T. platyurus y A. salina Estudios con otros Toxkits (protozoos, algas verdes unicelulares, rotíferos y otros crustáceos) Bioensayos con organismos patógenos con extractos sin actividad anti-Artemia conocida letales a T. platyurus
•Estos son resultados parciales de la tesis de Licenciatura en Química Farmacéutica de Karen R. Pérez C. •Financiamiento: K. Pérez SEPRA Microbiotests, Inc. (Deinze, Bélgica) •Agradecimientos: Dra. Ana Lucía Valle Dr. Armando Cáceres
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