+ E SINTESIS TERMODINAMICAMENTE CONTROLADA DE ANTIBIOTICOS Cefalotina Tienilacético 7 - ACA + E H + 3 N R ' O R - C - O- + H+ O R - C - OH DISOLVENTES Keq = [ RR’ ] [ H2O ] [ ROH ] [ R’NH2 ]
100 100 100 14 EFECTO DE CODISOLVENTES SOBRE DIFERENTES DERIVADOS DE DIFERENTES ACILASAS ACTIVIDAD ESTABILIDAD EN 50% DMF 20 40 60 80 100 100 100 100 K.citrophila Actividad relativa (%) Actividad Residual (%) E. coli 14 E. coli 15 30 45 60 75 Hidrólisis. Penicilina G pH 8, 37ºC Síntesis. Penicilina G pH6,5 , 50% DMF, 4ºC Tiempo ( horas ) K. citrophila E.coli Acetato sódico 10 mM pH 5, 25ºC
[ codisolvente] = 50% RCOOH + H2NR´ RCONHR´ RCOO- + H+ RCOOH DMF EFECTO DE LOS CODISOLVENTES SOBRE LOS RENDIMIENTOS DE STC PENICILINA G EFECTO DE LOS CODISOLVENTES SOBRE EL pK DE LOS ACIDOS CARBOXILICOS DMF Butanodiol RENDIMIENTO (%) Glicerina Tampón pH Acetonitrilo Acetona Dioxano DMF Metanol Butanodiol Etanol Glicerina Etilenglicol RCOOH + H2NR´ RCONHR´ [Sustratos] = 10 Mm , T= 4ºC [ codisolvente] = 50% RCOO- + H+ RCOOH
Rendimiento de Síntesis EFECTO DE DIFERENTES CODISOLVENTES ORGANICOS EN EL pK DE LOS ACIDOS CARBOXILICOS Y RENDIMIENTOS DE SINTESIS DE PENICILINA G EN CONDICIONES STANDARD Codisolvente pK Rendimiento de Síntesis Tampón 50% Acetona 50% Dioxano 50% DMS 50% DMF 50% Celosolve 50% Tetraglime 4.2 5.35 5.5 5.8 5.4 2% 53% 55% 56% 50%
GENERACION DE MICROAMBIENTES ARTIFICIALES EN EL ENTORNO DE LA PROTEINA Coinmovilización de polímeros hidrofílicos Modificación con polímeros hidrofílicos
EFECTO GLOBAL DE LA ESTABILIZACION DE PGA 100 90% tetraglime 80 60 70% tetraglime 55% dioxano Actividad Residual, (%) 40 20 50% dioxano 20 40 60 80 100 pH 6.5, 4ºC Tiempo, (horas)
Síntesis de Cefalotina DISEÑO DEL CATALIZADOR DEL MEDIO DE REACCION FUENTE ENZIMATICA Productividad: 6Kg / l / día Estabilidad derivados: Actividad > 90% después de dos meses Hidrólisis inespecífica 7- ACA < 1%