SÍNTESIS Y EVALUACIÓN DE POLÍMEROS MOLECULARMENTE IMPRESOS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE AMPICILINA B. Soledad 1., R.M. Garcinuño2., P. Fernández2, y J.S. Durand2. 1UCAB. Facultad de Ingeniería. Dpto. Química. Montalbán. Caracas. 2UNED. Facultad de Ciencias. Dpto. Ciencias Analíticas. C/ Senda del Rey, 9; 28040 Madrid. Síntesis de los polímeros de impronta molecular Resultados Método MISPE Columna Octadecilsilano químicamente enlazado a sílica porosa Fase móvil: agua, acetonitrilo, fosfato monobásico de potasio 1 M y ácido acético 1 N(909: 80: 10: 1 v/v) Diluyente: 10 mL de fosfato monobásico de potasio 1 M / 1 mL de ácido acético 1 N. Dilución con agua destilada hasta 1000 mL Detección UV a :254 nm Cuantificación: HPLC El MIP desarrollado utilizando ácido metacrílico como monómero funcional mostró mayor afinidad hacía la ampicilina que el polímero desarrollado utilizando metacrilato de metilo o la mezcla de metacrilato de metilo y ácido metacrílico. Los MIPs fueron empaquetados en cartuchos de extracción en fase sólida (MISPE) y estos fueron evaluados y caracterizados, encontrándose las condiciones de acondicionamiento, carga, lavado y elución adecuadas para el análisis de la ampicilina. Conclusiones Objetivos Determinación del antibiótico eritromicina en muestras de leche de oveja. Desarrollo Experimental Introducción Desarrollo de un polímero molecularmente impreso o de Impronta Molecular (MIP) específico para el antibiótico utilizado como molécula molde. Este objetivo se puede dividir en otros más concretos: a) Síntesis y evaluación de diferentes MIPs empleando monómeros funcionales de distinta naturaleza. b) Evaluación de la eficiencia de unión y elución de los MIPS sintetizados. c) Preparación de cartuchos MISPE (Molecularly Imprinted Solid Phase Extraction). Análisis por HPLC Análisis FT-IR Análisis FT-IR MIP 3 MIP 3 no mostró afinidad por amoxicilina, oxacilina, penicilina G y tosilato de sultamicilina TAMIZADO POLIMERIZACIÓN + MIP H2O2 Monómero funcional Metacrilato de metilo Ampicilina ACN Entrecruzante Etilenglicol dimetacrilato, EGMA UV (24h, 28 ºC) Disolvente Acetonitrilo Ácido metacrílico - Espectros FT-IR del MIP y NIP Similares Similitud en la estructura de la red Absorbancias: - Stretch del OH carbonílico(῀ 3500 cm-1) - Stretch del grupo carbonílico (῀ 1730 cm-1) - Stretch del C-O (῀ 1260 cm-1) Pico C-O en todos los polímeros  del enlace –C=C. También en espectros NIR. Similitud entre espectro del template y el precursor (MIP sin lavar) en C-N y C-C (500-1600 cm-1) Después del lavado, espectros MIP y NIP son comparables Template eliminado del precursor - Vibraciones de C-H (῀ 756, ῀ 1390, ῀ 1460, y ῀ 2956 cm-1) - Vibraciones de tensión del C-H  2990 y 2956 cm-1 - Banda en 1454 cm-1  Probable -CH2- - Banda en 1389 cm-1  Probable CH3  Polimerización del entrecruzante MIP 1 Lavado MIP 2 MIP 3 Uso de antibióticos en veterinaria Fines Terapéuticos Fines profilácticos Promotores del crecimiento Ingesta de alimentos con antibióticos Problemas en humanos por resistencia bacteriana y reacciones alérgicas Análisis de alimentos y determinación de su contenido En matrices complejas, es necesario el uso de técnicas de tratamiento de la muestra que tengan alta especificidad y sensibilidad La extracción en fase sólida con polímeros de impronta molecular ofrecen esta posibilidad (MISPE) Análisis de alimentos Polímeros que poseen propiedades de reconocimiento molecular Pasos principales para preparar un polímero de impronta molecular Enlazamiento de uno o varios monómeros funcionales con la molécula Polimerización Extracción de la molécula molde LXI Convención de AsoVAC 2011. Noviembre 13-18, 2011, Maracay, Venezuela