TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO (MO) COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema mecánico (montura): pie o base columna mecanismo de enfoque platina revólver tubo - sistema óptico: - sistema de iluminación: jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema mecánico (montura o soporte): pie: tiene peso (estabilidad); tiene la fuente de iluminación y potenciómetro (para regular la intensidad lumínica); sirve de soporte a la columna que sostiene el tubo y la platina. jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema mecánico (montura): mecanismo de enfoque: permite regular la distancia entre el preparado y los objetivos, desplazando en sentido vertical la platina; - tornillo macrométrico: enfoque grueso; para enfocar con objetivos de poco aumento - tornillo micrométrico: permite un enfoque fino (movimiento vertical imperceptible en el orden de 0,001 mm = 1micrómetro); se utiliza con los objetivos de mayor aumento jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema mecánico (montura): platina: soporte horizontal (rectangular o cuadrado) donde se colocan las preparaciones; presenta en el centro un orificio circular por donde pasa el rayo de luz producido por la fuente luminosa y proveniente del condensador; permite desplazar el portaobjetos en los ejes x e y del plano horizontal; debajo de la platina hay soportes para el condensador, el diafragma y los filtros. jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema mecánico (montura): revólver: semiesfera en la parte inferior del tubo, donde van atornillados los objetivos; el tubo: soporta la porción óptica del microscopio, oculares y objetivos; según longitud del tubo: - óptica infinita (símbolo ∞) - óptica finita jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema mecánico (montura) - sistema óptico: objetivos oculares condensador - sistema de iluminación jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema óptico: objetivos cercano al objeto de estudio; posee distancia focal muy corta y es posible colocar el objeto un poco más allá de su punto focal para obtener una IMAGEN REAL, INVERTIDA y AUMENTADA. jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - los objetivos forman una IMAGEN REAL, INVERTIDA y AUMENTADA del objeto examinado, situado un poco más allá del foco; jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema óptico: objetivos es un tubo cilíndrico que se enrosca en el revólver; en su interior revestimiento antirreflejos y diversas lentes alineadas; jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema óptico, objetivos, LOS AUMENTOS SECOS: lupa, aumento 4 x (puede ser 3,5 x, 4 x ó 5 x) objetivo de 10 x (puede ser 25 x) objetivo de 40 x (puede ser 45 x) DE INMERSIÓN objetivo de 100 x (se usa con aceite de inmersión, de “cedro”) el aumento final que proporciona un MO se calcula multiplicando la magnificación del objetivo utilizado por la del ocular; jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema óptico, objetivos, LOS AUMENTOS jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema óptico, objetivos, MICROSCOPÍA CON ACEITE DE INMERSIÓN aumenta la resolución jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema óptico, objetivos, LA RESOLUCIÓN (LÍMITE DE RESOLUCIÓN; PODER DE RESOLUCIÓN) La RESOLUCIÓN es la capacidad para producir imágenes separadas de objetos que se encuentran muy próximos; ES LA DISTANCIA MÁS PEQUEÑA ENTRE DOS PUNTOS, QUE PERMITE OBSERVARLOS COMO DISTINTOS; ASÍ, CONFORME DISMINUYE LA DISTANCIA, AUMENTA LA RESOLUCIÓN; el límite de resolución depende de la longitud de onda de la luz (λ) y de la apertura numérica (AN); según la fórmula de Abbe: Límite de resolución = (0,61·λ)/AN jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema óptico, objetivos, PODER DE RESOLUCIÓN en microscopía utilizamos el términos poder de resolución; el poder de resolución es INVERSAMENTE RECÍPROCO al límite de resolución; EL PODER DE RESOLUCIÓN SERÁ MAYOR CUANTO MENOR SEA EL LÍMITE DE RESOLUCIÓN; por lo que, para reducir el límite de resolución habrá que reducir la longitud de onda (λ) o aumentar la apertura numérica (AN). jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. RESOLUCIÓN. jfg

APERTURA NUMÉRICA. rango de ángulos para los cuales el sistema óptico acepta luz; ó capacidad del objetivo de utilizar un mayor o menor número de rayos luminosos en la formación de la imagen microscópica. queda definida por la siguiente ecuación: AN = n . sen α n = índice de refracción del medio sen α = ángulo de semiapertura jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. APERTURA NUMÉRICA. - cuanto mayor es la apertura numérica (AN) mejor será la resolución luz; - si AN = n . sen α, aumentamos la AN: 1. aumentando el índice de refracción del medio; 2. aumentando el ángulo de semiapertura; jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. APERTURA NUMÉRICA. - aumentamos la AN: 1. aumentando el índice de refracción del medio; 2. aumentando el ángulo de semiapertura; los objetivos de mayor aumento presentan mayor ángulo de semiapertura. jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. OBJETIVOS. - tipos de OBJETIVOS - objetivos SECOS y de INMERSIÓN; - para las correcciones cromáticas: ACROMÁTICOS SEMIAPOCROMÁTICOS APOCROMÁTICOS - para las correcciones geométricas OBJETIVOS PLANOS - óptica finita o infinita (funcionan con cualquier longitud del tubo) jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. OBJETIVOS características objetivos SECOS y de INMERSIÓN; jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. OBJETIVOS - PARA LA CORRECCIÓN DE LAS ABERRACIONES CROMÁTICAS ACROMÁTICOS, corrigen el rojo y el azul; SEMIAPOCROMÁTICOS, elaborados con fluorita, (presentan corrección cromática y de esfericidad) APOCROMÁTICOS, poseen más alto nivel de corrección cromática y de esfericidad - PARA LA CORRECCIÓN DE LAS ABERRACIONES GEOMÉTRICAS OBJETIVOS PLANOS (PLAN): PLAN-acromáticos; PLAN-fluoritas; PLAN-apocromáticos jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. NOMENCLATURA DE LOS OBJETIVOS - AUMENTO, rango 1x – 200 x; - APERTURA NUMÉRICA, junto a los aumentos, v.g. 10x/ 0,25; - DISTANCIA FOCAL (WD), en milímetros; - LONGITUD DEL TUBO (en mm o con el signo “infinito”); - ROSCA DEL OBJETIVO; - PROPIEDADES ÓPTICAS ESPECIALES; - CORRECCIONES ÓPTICAS (Achro, Fluar, Apo …); - CÓDIGO DE COLORES (según el aumento; según el medio de inmersión). jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. OCULARES. - aumenta la imagen producida por el objetivo y la transforma en una imagen virtual, invertida respecto al objeto; jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. OCULARES. - aumenta la imagen producida por el objetivo y la transforma en una imagen virtual, invertida respecto al objeto; jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. OCULARES. LOS OCULARES DISPONEN DE: - ajuste para la distancia interpupilar, entre 55 y 75 mm; - ajuste para las dioptrías; LOS AUMENTOS (MAGNIFICACIÓN): el principio de magnificación de un microscopio consiste en dos sistemas de lentes convexas que se combinan apropiadamente para magnificar las muestras, - M = Mobjetivo x Mocular, donde: Mobjetivo = aumento del objetivo. Mocular = aumento de los oculares (indicado en los oculares). jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. OCULARES. LAS LENTES DEL OCULAR: - el ocular está formado por un juego de lentes (2 ó más); destacan la inferior (o colectora) y la superior (u ocular) y un DIAFRAGMA (determina la forma del campo del microscopio (generalmente circular); jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. OCULARES. LAS LENTES DEL OCULAR: - el diafragma del ocular, que permite modificar la amplitud del cono de luz puede estar situado entre los dos juegos de lentes (ocular negativo), o puede estar por debajo (ocular positivo); - LENTE DE HUYGENS (dos lentes plano-convexas separadas por un diafragma); - LENTE DE RAMSDEN (dos lentes plano-convexas, colocadas por encima del diafragma); - OCULAR DE COMPENSACIÓN (corrige la aberración cromática); - ETC jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. OCULARES. REFERENCIAS (en la actualidad software): ESCALAS (situadas en el plano del diafragma) y SEÑALADOR p.e. ocular micrómetro con cruz diámetro: 19 mm 100 divisiones en total distancia entre cada división 0,1 mm longitud total 10 mm jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. NOMENCLATURA DE LOS OBJETIVOS. - AUMENTO, rango 10x – 25 x; - NÚMERO DE CAMPO, diámetro en milímetros de la apertura fija del diafragma; rango 18 – 26 mm; - INFORMACIÓN ADICIONAL (UW, H, comp, Plan-comp). jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. CONDENSADOR. jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. CONDENSADOR. - función: concentrar los rayos luminosos y proyectarlos sobre la preparación (histológica, citológica) a través del orificio de la platina; - formado por un sistema de lentes convergentes situadas en un soporte metálico; - posibilidades de movimiento en dirección vertical; - para observaciones con objetivos de gran aumento, se requiere que el condensador esté cerca de la platina; al trabajar con bajo aumento conviene retirar (bajar) el Condensador; - NUNCA SE CONTROLA LA INTENSIDAD DE LUZ CON EL CONDENSADOR. jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. DIAFRAGMA IRIS o DIAFRAGMA DE APERTURA. - se encuentra debajo del condensador; - función: gradúa la cantidad de rayos luminosos que llegan al objeto (la preparación histológica o citológica); - para observar preparaciones sin teñir o escasamente contrastadas, es conveniente cerrar el paso de luz, a fin de incrementar el contraste; jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. DIAFRAGMA IRIS o DIAFRAGMA DE APERTURA. - función: gradúa la cantidad de rayos luminosos que llegan al objeto (la preparación histológica o citológica); jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema de iluminación - en el m. óptico se sitúa debajo de la platina; - consta de fuente de luz, filtros y diafragma de campo (que regula la cantidad luz que llega al condensador y, por tanto, al resto del microscopio) - los filtros son cristales coloreados que dejan pasar radiaciones con una longitud de onda determinada y absorben las restantes; - los microscopios incorporan un filtro azul en su diseño; se conoce como filtro de luz día. - actualmente, la fuente de iluminación más frecuente es una bombilla Incandescente de tungsteno halógena. jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema de iluminación; recorrido de los rayos luminosos. jfg

TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE MICROSCOPIA. MICROSCOPÍA ÓPTICA. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. - sistema de iluminación - diafragma de campo; apertura. jfg