Feresin, Valentina - Testa, Sabrina ESTANDARIZACIÓN DE LA TÉCNICA DE AGLUTINACIÓN DIRECTA PARA EL INMUNODIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS Feresin, Valentina - Testa, Sabrina
Diagnóstico de la Enfermedad de Chagas en la fase CRÓNICA se basa en la detección de Anticuerpos específicos contra T. cruzi
La Confirmación es imprescindible porque el diagnóstico puede presentar reacciones cruzadas, principalmente con: * Leishmania spp. * T. rangeli * Plasmodium spp. *Toxoplasma gondii
La OMS recomienda el uso de 3 técnicas inmunológicas basadas en diferentes principios, de los cuales 2 deben ser POSITIVAS. * Hemaglutinación Indirecta (HAI) * Inmufluorescencia Indirecta (IFI) * ELISA
La Técnica de Aglutinación Directa presenta como ventajas: La Técnica de Aglutinación Directa presenta como ventajas: * Sencilla y económica * No requiere de equipos especializados. * Buena Sensibilidad y Especificidad * Detecta Ac dirigidos contra Ag de superficie * Rápidos resultados positivos
Estudio de la Estandarización de la Técnica de Aglutinación Directa Evaluación de DOS protocolos modificados Resultados Comparados con HAI ELISA IFI Midiendo la Concordancia y la Determinación de los índices diagnósticos
Materiales y Métodos Muestras Biológicas Controles (+) : 35 sueros, individuos con enfermedad de Chagas Controles (-): 35 sueros , individuos Sanos Controles Heterólogos : 46 Sueros, individuos con otras parasitosis
Trypanosoma cruzi Cultivo: epimastigotes de T. cruzi Preparación : con tratamiento Enzimático SIN tratamiento Enzimático Concentración Óptima: 50, 100, 250 y 500 x 106 parásitos /ml Coloración: Citrato de Sodio + Azul brillante de comassie Diluciones: 1/25, 1/50, y 1/100
Resultados: [C]de 500 x 106 parásitos/ml Adecuada Aglutinación Tratamiento de los parásitos: Trat. Enzimático y Sin Comportamiento Idéntico Coloración Parásitos coloreados visualizacion de aglutinación Diluciones de Suero Apropiadas Punto de Corte Dilución 1/50 Periodo de Incubación 18 horas
SUERO POSITIVO SUERO NEGATIVO
Indices Diágnosticos
Concordancia de la técnica de aglutinación directa con las pruebas de referencias
Conclusión - Tiene Potencial para uso como prueba de rutina. - Puede emplearse en áreas rurales y urbanas donde NO se cuente con : *Infraestructura adecuada *Equipos requeridos