MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS DR. IVÁN SALMERÓN I.Q DANIA ARELY QUEZADA QUIROZ

INTRODUCCIÓN  Crecimiento de células  El crecimiento de las células adherentes empieza con una fase de latencia en la cual ellas se sujetan a la superficie de crecimiento e inician la proliferación.

INTRODUCCIÓN  Inhibición del crecimiento por incremento celular.  Se muestra un crecimiento exponencial al esparcir las células en la superficie hasta que se limita.  Células epitelioides de L. sericata en medio L-15, adheridas a la superficie del frasco, luego de dos días de cultivo. Aumento: 200X.

INTRODUCCIÓN  Existe una variedad de modelos matemáticos que se han desarrollado para conocer la cantidad de aspectos de los inhibidores de crecimiento para estudiar las diferentes fases de crecimiento de las células mamíferas.  Los modelos de crecimiento estructural de la célula son principalmente empíricos, provenientes de sistemas biológicos por medio de la conversión de sustratos en productos.

INTRODUCCIÓN  Estudios experimentales muestran que el incremento de las células también incrementa el tamaño antes de dividirse, debido a que se nota el retaso en el incremento de biomasa y número de células

INTRODUCCIÓN  Se desarrolló un modelo que considerara el numero de células, el diámetro y el volumen para describir las células de Riñón canino de Madin Darby en seis placas con agujeros.  Los parámetros de modelo se estimaron por 3 experimentos independientes con diferentes condiciones de pre cultivación.

MATERIALES Y MÉTODOS Estas se cultivaron a 37 °C y 5% de CO Se llevaron las muestras a recipientes con agujeros El pre-cultivo fue a 37 °C Las células MDCK fueron pre- cultivadas en GMEM Cultivación 0.66 x 10 6 ∆ 0.45 x x 10 6

MÉTODO ANALÍTICO Cada cultivo fue analizado por separado Se eliminó el sobre nadante y se lavo la muestra 1 Se recogieron las células con un rascador Para el recuento y promedio se utilizó un Analizador de viabilidad celular 2 Se calculó el volumen celular del cultivo Se obtuvo el error 3

CÁLCULO Ajuste del modelo por medio de MATLAB Los modelos y datos fueron tratados con el modelo biólogico Toolbox 2 Las integraciones se realizaron con el CVODE de SUNDIALS Todas las simulaciones se llevaron a cabo en un sistema de Linux

EVALUACIÓN DE LOS PARÁMETROS DEL MODELO El algoritmo busca los valores de los parámetros que minimizan la distancia entre la simulación y los datos. Los parámetros de confianza se evaluaron mediante el uso de un método de arranque con 3000 iteraciones

MODELO DE CRECIMIENTO DE LA CÉLULA CRECIMIENTO CELULAR  Ecuaciones de equilibrio de la población son una manera elegante para caracterizar exhaustivamente el crecimiento en los procesos de cultivo en relación con la masa celular y número de células ( Fredrickson y Mantzaris de 2002 y Fredrickson, 2003 ).

CRECIMIENTO CELULAR  El modelo de este trabajo se utilizan datos que se obtiene con los dispositivos de conteo automático de células, y se compone de parámetros utilizados normalmente para los modelos basados ​​ en el número de células. Velocidad de transición Constante Concentración de glucosa Número de clases Tasa de crecimiento específico Factor de escalamiento

INHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO EN FUNCIÓN DEL VOLUMEN CELULAR  La transición entre la fase exponencial y la fase estacionaria de crecimiento de las células MDCK adherentes se suele suponer a ser dependiente de la densidad.  En consecuencia, las células crecerán con μ max, siempre y cuando todos los sustratos esenciales estén disponibles en cantidades suficientes.  En este trabajo, la inhibición se supone que es una función del volumen de la célula. El volumen de la célula se puede calcular sobre la base de los números de células y los diámetros de células. Suma de las células en todas las clases Numero de células en la clase i Promedio del diámetro de las células Diámetro críticoDiámetro mínimo

INHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO EN FUNCIÓN DEL VOLUMEN CELULAR Factor de inhibición de crecimiento Volumen celular

VELOCIDAD METABÓLICA  Las células consumen los sustratos para mantener o aumentar su biomasa. Por lo tanto, las tasas de absorción de sustrato son comúnmente vinculados a la concentración del número de células o su aumento ( Bock et al., 2009 y Mohler et al., 2008 ). Velocidad de volumen de consumo especifico Rendimiento del crecimiento especifico de la célula.

RESULTADOS

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