INESTABILIDAD DE MICROSATELITES EN EL CARCINOMA COLORRECTAL. A. Payá HGU ALICANTE

Vías Oncogénicas Mutadora Supresora 15% 85% MLH1, MSH2, MSH6, PMS2, PMS1 Inestabilidad microsatélites (diploides) Carcinoma Colorrectal Hereditario no Polipósico (CCHNP ó Sdre.de Lynch) Supresora 85% APC, K-ras, p53 Inestabilidad cromosómica (aneuploides) Poliposis Colónica Familiar

VIA MUTADORA Terminología - Alteracion del Sistema de Reparación de Errores de Replicación (RER) del ADN RER+ - Inestabilidad de Microsatélites IMS+ - Fenotipo Mutador

INACTIVACION GENES REPARADORES MLH1, MSH2, MSH6 AUSENCIA DE PROTEINA ACUMULACION DE ERRORES INESTABILIDAD MICROSATELITES

Utilidad de identificación de Fenotipo Mutador Identificación de CCHNP (Sdre. de Lynch) Pronóstico Valor predictivo respuesta a tto? IMS+ Mejor respuesta a QT (5-FU)

Metodos de Detección Fenotipo Mutador ANALISIS DE MICROSATÉLITES INMUNOHISTOQUÍMICA MLH1 MSH2 MSH6

Microsatélites Secuencias repetitivas cortas presentes en regiones codificantes y no codificantes (A)n, (CA)n, (CAG)n, (CAGT)n ...

Inestabilidad Microsatélites Mutaciones en microsatélites Debidos a apareamiento incorrecto por deslizamiento Mononucleótidos Deleciones Di-, tri-, tetras- Deleciones o Inserciones

Mecanismo de correción errores por apareamiento incorrecto Complejo primario MSH2/MSH6 90% MSH2/MSH3 Complejo secundario MLH1/PMS2 MLH1/MLH3

Análisis de microsatélites Microsatélites consenso BAT25, BAT26, D2S123, D5S346, D17S250 BAT26 detecta 98% IMS Cuasi-monomórfico (0.8% polimorfismos) Puede utilizarse sólo, sin necesidad de comparar con ADN no tumoral

BAT26

Inmunohistoquímica Proteína no expresada = gen inactivado MLH1, MSH2, MSH6 (optativo) Tinción nuclear Controles internos positivos (linfocitos, estroma, base criptas) Alta sensibilidad (80-100%) y especificidad (92-100 %) Opción válida para detección de fenotipo mutador

MLH1 MSH2

Inmunohistoquímica II La ausencia de MLH1 no implica mutación germinal (85% esporádicos) La ausencia de MSH2 siempre se asocia con mutación germinal La ausencia de MSH2 se asocia (86%) a ausencia de MSH6

Carcinoma de Colon Hereditario no Polipósico (Sdre. de Lynch) Sdre. de cáncer hereditario Mutaciones germinales MLH1(3p22-23), MSH2 (2p16), MSH6 (2p16), PMS1, PMS2 Herencia autosómica dominante alta penetrancia (85%) Tumores IMS 2% CCR. Tumor hereditario más frecuente Dx.clínico: Criterios de Amsterdam

Criterios de Amsterdam 3 familiares de 1º grado con CCR o tumores asociados a CCHNP (endometrio, intestino delgado, estómago, ureter/pelvis renal) 2 o + generaciones sucesivas Un afectado <50 años

Criterios de Amsterdam Frecuencia mutaciones 98% IMS+ Mutaciones Germinales 70% MLH1 30-40% MSH2 50-60% MSH6 5-10%

Criterios de Bethesda pacientes con criterios de Amsterdam individuos con 2 tumores de la esfera CCHNP individuos con CCR y un familiar de 1º grado con CCR o tumor de la esfera CCHNP (<45 años) o adenoma colorrectal < 40 años individuos con CCR o cáncer de endometrio <45 años. individuos con CCR en hemicolon derecho con patrón indiferenciado <45 años. individuos con CCR tipo células “en anillo de sello” <45 años. individuos con adenoma colorrectal diagnosticado <40 años

Criterios de Bethesda Frecuencia de mutaciones 30% IMS + 15% Mutaciones Germinales

CCR Criterios de Bethesda/Amsterdam IMS+ IMS- NO expresión MLH1/MSH2 Análisis genético MLH1/MSH2 No análisis genético Negativo Positivo Screening a familiares y caso índice Análisis genético a familiares

CARACTERISTICAS PATOLOGICAS Esporádicos y familiares indistinguibles Colon dcho Tipo medular, mucinoso Linfocitosis intraepitelial Crecimiento expansivo Infiltrado inflamatorio tipo Crohn

MLH1

MSH2

IMS 1.106 CCR 5.8% IMS+ 1.260 CCR 5.8% no expresión INMUNOHISTOQUÍMICA 96% no expresión MLH1/MSH2 1.260 CCR 5.8% no expresión 58 MLH1 (78%) 16 MSH2 (22%)