Tinción Negativa Objetivo: Realizar una tinción negativa. Principios:

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1 Tinción Negativa Objetivo: Realizar una tinción negativa. Principios:
Una tinción negativa requiere el uso de un tinte ácido como lo es el India ink o nigrosina. La tinción acídica con el cromógeno cargado negativamente, no podría penetrar a la célula debido a la carga negativa en la superficie de la bacteria.

2 Tinción Negativa Principios:
Por lo tanto, las células no teñidas son fácilmente detectadas contra el fondo de color. La aplicación parcial de la tinción negativa es doble. Ya que no se requiere la fijación de calor y la célula no están sujetos a los efectos distorsionadores de los productos químicos y el calor, su tamaño natural y la forma pueden ser vistos.

3 Tinción Negativa Materiales: Principios:
Además, es posible observar bacterias que son difíciles de teñir , tales como algunos espirilos. Materiales: Cultivo de 24 horas Tinte ácidico (nigrosina) Mechero “Loop” de inoculación Bandeja de tinción Microscopio Papel de lente Porta objeto

4 Tinción Negativa Procedimiento:
Vierta una gota del tinte ácidico cerca de uno de los extremos del lado limpio de la laminilla.

5 Tinción Negativa Procedimiento:
Utilizando técnicas estériles, colocar con el loop parte del cultivo de la bacteria en la gota del tinte y mezclar.

6 Tinción Negativa Con el borde de la segunda laminilla mantenga a un ángulo de 45 grados y colocado delante de la suspensión bacteriana, empujar la mezcla para formar una capa delgada. Séquelo al aire (NO caliente) Examine en microscopio.

7 Tinción Negativa Bacillis

8 Tinción de Cápsula

9 Objetivos Conceptos básicos sobre la base química de la tinción de  la cápsula. El procedimiento para distinguir el material cápsular de la célula bacteriana.

10 Tinción de Cápsula Cápsula:
Es una capa gelatinosa externa que es secretada por la célula que rodea y se adhiere a la pared celular. No es común en todos los organismos. Células con cápsula fuerte suelen ser más virulentos. Causan enfermedades. Están protegidos de la fagocitosis.

11 Tinción de Cápsula cápsula: Se componen de azúcares y proteínas.
No es vital, pueden tenerla como no pueden tenerla. La tinción de cápsula se denomina como una tinción negativa. Ya que se tiñe el fondo de la preparación y no el organismo.

12 Tinción de Cápsula

13 Tinción de Cápsula La tinción es muchos más difícil:
El material de la cápsula es soluble en agua. El tinte puede ser removido por los lavados vigorosos. Se utilizan dos tintes: Cristal Violeta: Célula y cápsula cogen el color oscuro. Sulfato de Cobre: Sirve como agente de lavado, despinta la cápsula y se fija a la cápsula. Se verá azul en contraste con el color violeta oscuro de la célula.

14 Tinción de Cápsula

15 Tinción de Cápsula Materiales: Procedimientos: Mechero
Loop” de inoculación Microscopio Papel de lente Porta objeto Materiales: Cultivo de 48 horas Cristal violeta Sulfato de Cobre 20% Laminilla Procedimientos: En una laminilla limpia, coloque varias gotas de cristal violeta.

16 Tinción de Cápsula (Método Antoni)
Procedimiento: Utilizando técnicas asépticas añada con el loop parte del cultivo al tinte. Regar la muestra de forma uniforme hasta quedar una capa fina y déjelo de 5-7 min. Dejar secar al aire. NO FIJAR POR CALOR

17 Tinción de Cápsula (Método Antoni)
Lavar con sulfato de cobre al 20 %.

18 Tinción de Cápsula (Método Antoni)
Dejar secar el extendido al aire. Observar al microscopio bajo objetivo de inmersión.

19 Tinción de Cápsula (Método Antoni)

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